1、GB 19170-2003 前言本标准的附录A、附录B均为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位2上海市农业科学院食用菌研究所、农业部食用菌产品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人g王南、谭琦、曹晖。I GB 19170-2003 冒|言栽培香菇使用的菌种是人工培育的纯菌丝体及培养基的混合体。我国采用三级扩大繁育程序即母种、原种、栽培种培育香菇菌种。为了规范我国香菇菌种生产、经销和使用,确保我国香菇生产持续健康发展,特制定本标准。E GB 19170-23 香菇菌种1 范围本标准规定了香菇(Lentinulaedodes)菌种的质量要求、试验方法、检验规则及标签、
2、包装、运输、贮存。本标准适用于香菇菌种的生产、流通和使用.2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T 191 包装储运图示标志(GB!T191-2000.eqv ISO 780.1997) GB/T 4789. 28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB/T 12728-1991 食用菌术语GB 19172-2003 平菇菌种NY /T 528-2002
3、 食用菌露种生产技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 母种stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,以玻璃试管为培养容器和使用单位,也称一级种、试管种。NY /T 528-2002.定义3.3J3.2 原种pre -culture spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物.常以玻璃菌种瓶或塑料菌种瓶或15cmX28cm聚丙烯塑料袋为容器。NY/T 5282002.定义3.4J3.3 栽编种spawn 由原种移植、扩大培养而成的茵丝体纯培养物.常以玻璃瓶或塑料袋为容器。栽培种只能用于栽培,不可再次扩大繁殖菌种。3.
4、4 3.5 NY /T 528-2002.定义3.5J额顽现象皿tagonism具有不同遗传基因的菌落间产生不生长区带或形成不同形式线行边缘的现象。GB 19172-2003.定义3.4J角变阳torGB 19170-2003 3.6 因菌丝体局部变异或感染病毒而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象.GB 19172-2003,定义3.5J高温抑制线high temperatured line 食用菌菌种在生产过程中受高温的不良影响,培养物出现的圄状发黄、发暗或菌丝变稀弱的现象。GB 191722003,定义3.6J 3.7 生物学效率biolugical efficienc
5、y 单位数量培养料的干物质与所培养产生出的子实体或菌丝体干重之间的比率。GB/T 12728-1991,定义2.1.20J 3.8 种性characters of variety 食用菌的品种特性是鉴别食用菌菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括对温度、湿度、酸碱度、光线和氧气的要求,抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性状。NY /T 528-2002,定义3.8J4 质量要求4. 1 母种4. 1. 1 容器规格应符合NY/T 528-2002中4.7.1.1规定。4. 1.2 感官要求应符合表1规定。表1母种感官要求项目要求容器完整,无损棉塞或无棉塑料盖
6、干燥、洁净,松紧适度,能满足透气和滤菌要求培养基灌入量为试管总容积的四分之一至五分之一培养基斜面*度顶端距棉塞40mm ,._, 50 mm 接种量(接种块大小(3-5) mmX (3-5) mm 菌丝生长量长满斜面菌丝体特征洁白浓密、棉毛状菌丝体表面均匀、平整、元角变菌种外观菌丝分泌物无菌落边缘整齐杂菌菌落元斜面背面外观培养基不干缩,颜色均匀、无暗斑、无色素气昧有香菇菌种特有的香味,元酸、臭、霉等异味2 GB 19170-2003 4. 1. 3 微生物学要求应符合表2规定。褒2母种微生物学要求项目要求菌丝生长状态粗壮,丰满,均匀银状联合有杂菌无4. 1. 4 菌丝生长速度在PDA培养基上,
7、在适温(24c土1C)下,长满斜面10天14天。4. 1.5 母种栽培性状s母种供种单位,需经出菇试验确证农艺性状和商品性等种性合格后.方可用于扩大繁殖或出售。4.2 原种4. 2. 1 容器规格应符合NY/T 528-2002中4.7.1.2规定。4.2.2 感官要求应符合表3规定。褒3原种感富要求项目要求容器完整,无损棉塞或无棉塑料盖干燥、洁净.松紧适度,能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶袋口的距离50mm土5mm 接种量(每支母种接原种数,接种物大小(4-的瓶袋) :;主12mmX 15 mrn 菌丝生长量长满容器菌丝体特征洁白浓密、生长旺健培养物表面菌丝体生长均匀,元角变,无高温抑制
8、线培养基及菌丝体紧贴瓶壁,无干缩菌种外观培养物表面分摇物元,允许有少量深黄色至棕褐色水珠杂菌菌落元额顽现象无于实体原基无气味有香菇菌种特有的香味,无酸、臭、霉等异味4.2.3 微生物学要求应符合表2规定。4.2.4 菌丝生长速度在适宜培养基上,在适温(23C士2C)下,菌丝长满容器应35天50天。4.3 栽培种4. 3. 1 容器规格应符合NY/T 528-2002中4.7.1.3规定。4.3.2 感官要求应符合表4规定。表4栽培种感盲要求项目容器要求完整,无损棉塞或元棉塑料盖干燥、洁净,松紧适度,能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶(袋)口的距离50 mm土5mm 接种量每瓶原种接栽培种数(
9、30-50)瓶(袋)3 GB 19170-2003 表4(续)项目要求菌丝生长量长满容器菌丝体特征洁白浓密、生长旺健不同部位菌丝体生长均匀,元角变,无高温抑制线培养基及菌丝体紧贴瓶f袋壁,无干缩菌种外观培养物表面分泌物元或有少量深黄色至棕褐色市珠杂菌菌落元顿顽现象无于实体原基元气味有香菇菌种特有的香味,元酸、臭、霉等异味4.3.3 微生物学指标应符合表2规定。4.3.4 菌丝生长速度=在适宜培养基上,在适温(23C土2C)下,茵丝长满容器一般40天50天。5 抽样5. 1 质检部门的抽样应具有代表性。5.2 母种按品种、培养条件、接种时间分批编号P原种、栽培种按菌种来源、制种方法和接种时间分批
10、编号。按批随机抽取被检样品。5.3 母种、原种、栽培种的抽样量分别为该批菌种量的10%、5%、1%。但每批抽样数量不得少于10支(瓶、袋h超过100支(瓶、袋)的,可进行两级抽样P6 试验方法6. 1 感官检验按表5逐项进行。表5检验项目检验方法检验项目检验方法母种、原种肉眼观察、测量容器肉眼观察接种量栽培种检查生产记录棉塞、元棉塑料盖肉眼观察培养基上表面距瓶(袋)肉眼观察口的距离母种培养基灌入量肉眼观察菌种外观各项肉眼观察杂菌菌落除外)母种斜面长度肉眼观察杂菌菌落肉眼观察,必要时用5X放大镜观察母种斜面背面外观肉眼观察气味鼻嗅6.2 微生物学检验6. 2. 1 表2中菌丝生长状态和锁状联合用
11、放大倍数不低于lOX40的光学显微镜对培养物的水封片进行观察,每检样应观察不少于50个视野。6.2.2 细菌检验:取少量疑有细菌污染的培养物,按元菌操作接种于GB/T4789. 28中4.8规定的营养肉汤培养液中,25C28C振荡培养l天2天,观察培养液是否混浊。培养液混浊,为有细菌污染;4 GB 19170-2003 培养液澄清,为无细菌污染。6.2.3 霉菌检验取少量疑有霉菌污染的培养物,按无菌操作接种于GBjT4789. 28中4.79规定的PDA培养基中,25C28C培养5天7天,菌落出现白色以外的杂色者,或有异味者为霉菌污染物,必要时按6.2. 1进行水封片镜检。6.3 菌丝生长速度
12、6. 3. 1 母种.PDA培养基,24C土lC培养,计算长满需天数。6.3.2 原种和栽培种z按第B.1、B.2、B.3章规定的配方任选之一,在24(;士1(;培养,计算长满需天数。6.4 母种农艺性状和商晶性状将被检母种制成原种。采用第B.1章规定的培养基配方,制做菌捧45根。接种后,分三组进行常规管理,根据表6所列项目,做好栽培记录,统计检验结查。同时将该母种的出发菌株设为对照,亦做同样处理。对比二者的检验结果,以时间计的检验项目中,被检母种的任何一项时间较对照菌株推迟五天以上(含五天)者,为不合格;产量显著低于对照菌株者,为不合格;菇体外观形态与对照明显不同或畸形者为不合格。表6母种栽
13、培中农艺性状和商晶性状检验记录检验项目检验结果检验项目检验结果母种长满所需时间/天总产/g原种长满所需时间/天单产/g菌棒长满所需时间/天单菇质量/g第一潮菇产量最高的时间/天生物学效率/(%)第二潮菇产量最高的时间/天菇形、质地、色泽产菇盛期持续的时间/天菇盖直径、厚度、柄长、柄直径/mm6.5 留样各级菌种都要留样备查,留样的数量应每个批号菌种3支(瓶)5支(瓶),于4C6C下贮存,母种和原种七个月,栽培种五个月。7 检验规则判定规则按质量要求进行。检验项目全部符合质量要求时,为合格菌种,其中任何一项不符合要求,均为不合格菌种。B 标签、包装、运输、贮存8. 1 标签8. 1. 1 产品标
14、签每支(瓶、袋)菌种应贴有清晰注明以下要素的标签ga) 产品名称(如z香菇母种), b) 品种名称(如:241-4), c) 生产单位cxx菌种厂), d) 接种日期cxxxx.xx. XX) , e) 执行标准。8. 1. 2 包装标签每箱菌种应贴有清晰注明以下要素的包装标签g5 GB 19170-2003 a) 产品名称;b) 品种名称gc) 厂名、厂址、联系电话sd 出厂日期,e) 保质期、贮存条件$0 数量;g) 执行标准。8. 1. 3 包装储运图示标志按GB/T191规定,应注明以下图示标志ga) 小心轻放标志;b) 防水、防潮、防冻标志;c) 防晒、防高温标志;d) 防止倒置标志
15、ge) 防止重压标志。8.2 包装8.2. 1 母种外包装采用木盒或有足够强度的纸材和j做的纸箱,内部用棉花、碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满。8.2.2 原种、栽培种外包装采用有足够强度的纸材制做的纸箱,菌种问用碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满。纸箱上部和底部用8cm宽的胶带封口,并用打包带捆扎两道,箱内附产品合格证书和使用说明(包括菌种种性、培养基配方及适用范围)。8.3 运输8.3. 1 不得与有毒物品混装混运。8.3.2 气温达30C以上时,需用。C-20C的冷藏车运输。8.3.3 运输中必须有防震、防晒、防尘、防雨淋、防冻、防杂菌污染的措施。8.4 贮存8.4. 1 母种
16、在4C-6C下贮存,贮存期不超过三个月。8.4.2 原种在0C-1OC下贮存,贮存期不超过40夭。8.4.3 栽培种应尽快使用,14天内可在温度不超过25C、清洁、通风、干燥(相对湿度50%-70%人避光的室内存放。在1C-6C下贮存时,贮存期不超过45天。6 GB 19170-2003 附录A(规范性附录)母种常用培养基及其配方A.l PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯200以用浸出汁),葡萄糖20g,琼脂20g,水1000mL.pH值自然。A.2 CPDA培养基(综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯200gC用浸出汁),葡萄糖20g,磷酸二氢御2g,硫酸镜O.5 g,琼脂20g,水1000 mL, pH值自然。附录B(规范性附录)原神和栽培种常用绪养基配方B. 1 木屑培养基阔叶树木屑78%,款皮20%,糖1%,石膏1%,含水量58%土2%。B.2 木屑棉籽壳培养基阔叶树木屑63%,棉籽壳15%,款皮20%,糖1%,石膏1%,含水量58%士2%。B.3 木屑玉米芯培养基阔叶树木屑63%,玉米芯粉15%,款皮20%,糖1%,石音1%,含水量58%士2%。