1、毒国中华人民共和国国家标准GB 28309-2012 食品安全国家标准食品添加剂酸性红(偶氮玉红)2012-04-25发布2012-06-25实施中华人民共和国卫生部发布GB 28309-2012 食品安全国家标准食品添加剂酸性红(偶氮玉红)1 范围本标准适用于1-荼胶-4-磺酸铀经重氮化后与1-荼酣-4-磺酸铀偶合而制得的食品添加剂酸性红(偶氮玉红)。2 化学名称、结构式、分子式和相对分子质量2. 1 化学名称1-起基-2-(4-偶氮荼磺酸)-4-荼磺酸二铀盐2.2 结构式2.3 分子式C20 H12 N 2 Na2 07 S2 2.4 相对分子质量、_!)HO飞、川S飞户问f二yS03Na
2、 502.43(按2007年国际相对原子质量)3 技术要求3. 1 感官要求:应符合表1的规定。表1感官要求项目要求检验方法色泽红褐色至暗红褐色取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，状态粉末或颗粒观察其色泽和状态1 GB 28309-2012 3.2 理化指标:应符合表2的规定。表2理化指标项目指标检验方法酸性红(偶氮玉红)含量，/%;?! 85.0 附录A中A.3干燥减量、氯化物(以NaCl计)及硫酸盐(以Na2SO.计)总量，w/%15.0 附录A中人4水不溶物，w/%、0.20 附录A中A.5副染料，/%运二1. 0 附录A中A.6未反应原料总和，四/%三二0.50 附录A中
3、A.7未磺化芳族伯胶(以苯胶计)，w/%4二0.01 附录A中A.8总碑(以As计)/(mg/kg)运二1. 0 GB/T 5009. 11 铅(Pb)/(mg/kg)4二2.0 GB 5009. 12 2 GB 28309-2012 A.1 一般规定附录A检验方法本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682-2008规定的三级水。试验中所用标准榕液、杂质标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T 602、GB/T603的规定制备。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2 鉴别试验A.2.1 试剂和材料A.2. 1.
4、 1 硫酸。A. 2. 1. 2 乙酸镀溶液:1.5g/La A.2.2 仪器和设备A. 2. 2.1 分光光度计。A.2.2.2 比色皿:10mma A.2.3 鉴别方法A. 2. 3.1 称取约0.1g试样，精确至0.01g，溶于100mL水中，溶液为澄清红色。A.2.3.2 称取约0.1g试样，精确至0.01g，加10mL硫酸，溶液显红色，取此溶液23滴于5mL水中，溶液显红色。A.2.3.3 称取约0.1g试样，精确至0.01g，溶于100mL乙酸镜榕液中，取此溶液1mL，加乙酸镀溶液至100mL，该溶液的最大吸收波长为516nm士2nma A.3 酸性红(偶氯玉红)含量的测定A. 3
5、.1 三氧化铁商定法(仲裁法)A. 3. 1. 1 方法提要在酸性介质中，酸性红(偶氮玉红)中的偶氨基被三氯化铁还原分解，按三氧化铁标准滴定溶液的消耗量，计算酸性红(偶氮玉红)的含量。A. 3. 1. 2 试剂和材料A. 3.1.2.1 拧棱酸三铀。A.3.1.2.2 三氯化铁标准滴定溶液:c(TiCI3)=0.1 mol/L(现配现用，配制方法见附录B)。A.3. 1.2.3 二氧化碳。A. 3. 1. 3 仪器和设备见图A.1a 3 GB 28309-2012 B A一一锥形瓶(500mL); B一一棕色滴定管(50mL); C一一包黑纸的下口玻璃瓶(2000mL); D一一装有100g/
6、L碳酸镀溶液和100g/L硫酸亚铁溶液等量混合液的容器(5000 mL); E 活塞;F一一空瓶;G一一装有水的洗气瓶。圈A.1三氯化铁1商定法的装置圈A. 3.1.4 分析步骤称取约0.5g试样，精确至0.0001g，置于500mL锥形瓶中，加入50mL新煮沸并冷却至室温的水，溶解，加入15g拧攘酸三铀和150mL新煮沸并冷却至室温的水，振荡溶解后，按图A.1装好仪器，在液面下通入二氧化碳的同时，加热至沸，并用三氧化铁标准滴定溶液滴定到其固有颜色消失为终点。A.3. 1.5 结果计算4 酸性红(偶氮玉红)含量以质量分数Wj计，数值以%表示，按公式(A.1)计算:式中:ttJ1=c(V /1
7、000) (M/的x100% ( A.1 ) tj c 一一三氯化铁标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(mol/L); V 一一滴定试样耗用的三氯化铁标准滴定榕液体积的准确数值，单位为毫升(mL);1 000 体积换算因子;M 一一酸性红(偶氮玉红)的摩尔质量数值，单位为克每摩尔(g/mol)M(C20 H12比Na207S2)= 502.43J; 4 一-浓度换算因子;mj 一一试样质量的数值，单位为克(g)。实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留一位小数。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于1.0%。A.3.2 分光光度比色法A. 3. 2.1 方法提要GB
8、28309-2012 将试样与己知含量的酸性红(偶氮玉红)标准品分别用水溶解，用乙酸镀溶液稀释定容后，在最大吸收波长处，分别测其吸光度值，然后计算其含量。A.3.2.2 试剂和材料A. 3. 2. 2.1 乙酸镀溶液:1. 5 g/L。A.3.2.2.2 酸性红(偶氮玉红)标准品:85.0%(质量分数，按A.3.1测定).A.3.2.3 仪器和设备A. 3. 2. 3. 1 分光光度计。A. 3. 2. 3. 2 比色皿:10mm。A.3.2.4 分析步骤A. 3. 2. 4.1 酸性红(偶氨玉红)标准溶液的制备称取约0.25g酸性红(偶氮玉红)标准品，精确到0.0001 g，榕于适量水中，移
9、入1000mL容量瓶中，加水稀释并定容至刻度，摇匀。吸取10mL，移入500mL容量瓶中，加乙酸镀溶液稀释并定容至刻度，摇匀，备用。A.3.2.4.2 酸性红(偶氨玉红)试样溶施的制备称量与操作方法同A.3. 2. 4. 1标准溶液的配制。A.3.2.4.3 测定取适量酸性红(偶氮玉红)标准溶液和酸性红(偶氮玉红)试样溶液，分别置于10mm比色皿中，同在最大吸收波长(516nm:l: 2 nm)处用分光光度计测定各自的吸光度值，用乙酸镀溶液作参比液。A.3.2.5 结果计算酸性红(偶氮玉红)含量以质量分数W2计，数值以%表示，按公式(A.2)计算zAm o W2=石;二Wo式中zA一一酸性红(
10、偶氮玉红)试样榕液的吸光度值;mo一一酸性红(偶氮玉红)标准品质量的数值，单位为克(g); A。一一酸性红(偶氮玉红)标准溶液的吸光度值;m -一试样质量的数值，单位为克(g); 切。一一-酸性红(偶氮玉红)标准品含量的数值，%。.( A.2 ) 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留一位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于1.0%。5 GB 28309-2012 A.4 干燥减量、氧化物(以NaCl计)及硫酸盐(以Na2S04计)总量的测定A.4.1 干燥减量的测定A. 4. 1. 1 分析步骤称取约2g试样，精确至0.001g，置于己在135oC :l: 2
11、oC恒温干燥箱恒量的称量瓶中，在135oC :l: 2 oC 恒温干燥箱中烘至恒量。A.4. 1. 2 结果计算干燥减量以质量分数W3计，数值以%表示，按公式(儿3)计算z式中zW3=生二旦旦x100% tz mz-一一试样干燥前质量的数值，单位为克(g); m3一一试样干燥至恒量后质量的数值，单位为克(g)0 .( A. 3 ) 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留一位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%。A.4.2 氧化物(以NaCl计)的测定A. 4. 2.1 试剂和材料A. 4. 2. 1. 1 硝基苯。A. 4. 2. 1.2 活性炭:767针
12、型。A.4.2.1.3 硝酸溶液:1+1。A. 4. 2.1.4 硝酸银溶液:c(AgN03)=0.1 mol/Lo A. 4. 2. 1. 5 硫酸铁镀溶液z称取约14g硫酸铁镜，溶于100mL水中，过滤，加10mL硝酸，贮存于棕色瓶中。A. 4. 2. 1. 6 硫氨酸镀标准滴定洛液:c(N凡CNS)= O. 1 mol/L, A.4. 2. 2 分析步骤A. 4. 2. 2.1 试样溶液的制备称取约2g试样，精确至0.001g，溶于150mL水中，加约15g活性炭，温和煮沸2min3 min，加入1mL硝酸溶液，不断摇动均匀，放置30min(其间不时摇动)。用干燥滤纸过墟。如滤液有色，则
13、再加5g活性炭，不时摇动下放置1h，再用干燥滤纸过滤(如仍有色则更换活性炭重复操作至滤液元色)。每次以10mL水洗活性炭三次，滤液合并移至200mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。用于氯化物和硫酸盐含量的测定。A.4.2.2.2 测定移取50mL试样溶液，置于500mL锥形瓶中，加2mL硝酸溶液和10mL硝酸银溶液(氯化物含量多时要多加些)及5mL硝基苯，剧烈摇动至氯化银凝结，加入1mL硫酸铁镀溶液，用硫氨酸镀标准滴定溶液滴定过量的硝酸银到终点并保持1min，同时以同样方法做一空白试验。A.4. 2. 3 结果计算氯化物(以NaCl计)含量以质量分数t的计，数值以%表示，按公式(A.4)计算:6
14、GB 28309-2012 Cj(Vj-Vo)/l OOOJMj ,n/ !. x 100% ( A. 4 ) W4 = m4 (50/200)川式中:Cj 一一硫氨酸镀标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(mol/L); Vj -一一滴定空白溶液耗用硫氨酸镀标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL);V。一一滴定试样溶液耗用硫氨酸镀标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL); 1000 -一体积换算因子;M j -一氯化铀的摩尔质量数值，单位为克每摩尔(g/mol)Mj(NaCD =58. 4J; 叫一-试样质量的数值，单位为克(g); 50/200-稀释因子。实验结果以平行测
15、定结果的算术平均值为准(保留一位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.3%。A.4.3 磺酸盐(以Na2S04计)的测定A. 4. 3.1 试剂和材料A. 4. 3. 1. 1 氢氧化铀溶液:0.2g/L。A. 4. 3. 1. 2 盐酸溶液:1 +990 A. 4. 3. 1. 3 氯化顿标准滴定溶液:c(1/2BaC12) = O. 1 mol/L(配制方法见附录CLA. 4. 3. 1. 4 酷敢指示液:10g/L。A. 4. 3.1.5 玫瑰红酸铀指示液z称取0.1g玫瑰红酸铀，溶于10mL水中(现用现配)。A.4.3.2 分析步骤吸取25mL试样溶液(A.4
16、. 2. 2. 1) ，置于250mL锥形瓶中，加1滴酣敢指示液，滴加氢氧化铀溶液呈粉红色，然后滴加盐酸洛液至粉红色消失，摇匀，溶解后在不断摇动下用氧化坝标准滴定溶液滴定，以玫瑰红酸铀指示液作外指示液，反应液与指示液在滤纸上交汇处呈现玫瑰红色斑点并保持2min不褪色为终点。同时以相同方法做空白试验。A.4.3.3 结果计算硫酸盐(以Na2S04计)含量以质量分数Ws计，数值以%表示，按公式(A.5)计算zC2(V2 - V3)/1 000J(M2/2) x 100% .( A.5 ) WS = ms (25/200) 式中zC2 一一氯化顿标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(mol/L
17、); V2 滴定试样溶液耗用氯化顿标准滴定潜液体积的准确数值，单位为毫升(mL); 只一一滴定空白溶液耗用氯化顿标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL);1000 -一体积换算因子;M2 一一硫酸铀的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/moDM2 (Na2S04)二142.04J;2 -一浓度换算因子;昕一一试样质量的数值，单位为克(g); 25/200-稀释因子。实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留一位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%。A.4.4 干燥减量、氧化物(以NaCI计)及耐酸盐(以Na2S04计总量的结果计算干燥减量、氯化物(以Na
18、Cl计)及硫酸盐(以Na2S04计)的总量以质量分数叫计，数值以%表示，GB 28309-2012 按公式(A.6)计算:W6 =W3 +W4 +ws ( A. 6 ) 式中zW3一一干燥减量，%;t叫zWs一硫酸盐(以Na句zS04计)含量，%。A.5 水不溶物的测定A. 5.1 仪器和设备A.5. 1. 1 玻璃砂芯增塌:G4，孔径为5m15moA. 5. 1. 2 恒温干燥箱。A.5.2 分析步骤称取约3g试样，精确至0.001g，置于500mL烧杯中，加入50oC60 oC热水250mL，使之溶解，用已在135oC士2.C烘至恒量的G4玻璃砂芯增塌过滤，并用热水充分洗涤到洗涤液元色，在
19、135.C士2.C 恒温干燥箱中烘至恒量。A.5.3 结果计算水不溶物以质量分数W7计，数值以%表示，按公式(A.7)计算:式中:W7=豆豆x100% m7 ms一一-干燥后水不溶物质量的数值，单位为克(g);m7 试样质量的数值，单位为克(g)。.( A.7 ) 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留两位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.05%。A.6 副染料的测定A.6.1 方法提要用纸上层析法将各组分分离，洗脱，然后用分光光度法定量。A.6.2 试剂和材料A. 6. 2.1 无水乙醇。A.6. 2. 2 正丁醇。A.6. 2. 3 丙酣溶液:1十10A
20、.6. 2. 4 氨水溶液:4+960A.6. 2. 5 碳酸氢铀溶液:4g/L。A.6.3 仪器和设备A. 6.3.1 分光光度计。GB 28309-2012 层析滤纸:1号中速，150mmX250 mm。层析缸:240 mmX300 mmo 微量进样器:100L。纳氏比色管:50mL有玻璃磨口塞。玻璃砂芯漏斗:G3，孔径为15m-40m。50 mm比色皿。10 mm比色皿。A. 6. 3. 2 A.6.3.3 A. 6. 3. 4 A. 6. 3.5 A.6.3.6 A. 6. 3. 7 A. 6. 3. 8 分析步骤A.6.4 纸上层析条件展开:ffJJ:正丁醇+元水乙醇+氨水溶液=6十
21、2+3。温度:20oC-25 oC。A. 6. 4.1 A. 6. 4. 1. 1 A. 6. 4. 1. 2 试样溶班的制备称取1g试样，精确至0.001g，置于烧杯中，加入造量水溶解后，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀备用，该试样溶液浓度为1%。A. 6. 4. 2 试样洗出班的制备用微量进样器吸取100L试样溶液，均匀地注在离滤纸底边25mm的一条基线上，成一直线，使其在滤纸上的宽度不超过5mm，长度为130mm，用吹风机吹干。将滤纸放入装有预先配制好展开剂的层析缸中展开，滤纸底边漫入展开剂液面下10mm，待展开剂前沿线上升至150mm或直到副染料分离满意为止。取出层析滤纸，用冷
22、风吹干。用空白滤纸在相同条件下展开，该空白滤纸必须与上述步骤展开用的滤纸在同一张滤纸上相邻部位裁取。副染料纸上层析示意图见图A.20A.6.4.3 150 mm 副染料(1)主染料副染料。)i 基线 UJ c、3-,-130 mm EEOmN , 9 副染料纸上层析示意图圄A.2GB 28309-2012 将展开后取得的各个副染料和在空白滤纸上与各副染料相对应的部位的滤纸按同样大小剪下，并剪成约5mmX 15 mm的细条，分别置于50mL的纳氏比色管中，准确加入5mL丙酣溶液，摇动3 min5 min后，再准确加入20mL碳酸氢铀溶液，充分摇动，然后分别在G3玻璃砂芯漏斗中自然过滤，滤液必须澄
23、清，元悬浮物。分别得到各副染料和空白的洗出液。在各自副染料的最大吸收波长处，用50mm比色皿，将各副染料的洗出液在分光光度计上测定各自的吸光度值。在分光光度计上测定吸光度时，以5mL丙酣溶液和20mL碳酸氢铀溶液的混合液作参比液。A.6.4.4 标准溶班的制备吸取2mL 1%的试样溶液移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，该溶液为标准溶液。A.6.4.5 标准洗出霞的制备用微量进样器吸取标准溶液100L，均匀地点注在离滤纸底边25mm的一条基线上，用吹风机吹干。将滤纸放入装有预先配制好展开剂的层析缸中展开，待展开剂前沿线上升40mm，取出用冷风吹干，剪下所有展开的染料部分，按A.6.4.3
24、的方法进行萃取操作，得到标准洗出液。用10mm比色皿在最大吸收波长处测吸光度值。同时用空白滤纸在相同条件下展开，按相同方法操作后测洗出液的吸光度值。A.6.4.6 结果计算副染料的含量以质量分数叫计，数值以%表示，按公式(A.的计算zkAj-bj)十+(An - bn)J/5 Wg = (As - bs) (100/2) 式中zA j , ,An 各副染料洗出液以50mm光径长度测定出的吸光度值;bj，bn各副染料对照空白洗出液以50mm光径长度测定出的吸光度值;As 标准洗出液以10mm光径长度测定出的吸光度值;bs -一标准对照空白洗出液以10mm光径长度测定出的吸光度值;5 一一折算成以
25、10mm光径长度的比数;100/2 一一-标准洗出液折算成1%试样溶液的比数;W. 试样中酸性红(偶氮玉红)的质量分数，%。.( A.8 ) 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准(保留一位小数)。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%。A.7 未反应原料总和的测定A.7.1 方法提要采用反相液相色谱法，用外标法分别定量各未反应中间体，最后计算未反应中间体总和的质量分数。A.7.2 试剂和材料A. 7. 2.1 乙睛。A.7.2.2 乙酸镀溶液:15 g/L。A.7.2.3 1-荼胶-4-磺酸铀。A.7.2.4 1-荼酣-4-磺酸铀。GB 28309-2012 A.7.3
26、 仪器和设备A. 7. 3.1 液相色谱仪z输液泵-流量范围o.1 mL/min5. 0 mL/min.在此范围内其流量稳定性为士1%。A.7.3.2 检测器t多波长紫外分光检测器或具有同等性能的紫外分光检测器。A.7.3.3 色谱柱z长为150mm.内径为4.6mm的不锈钢柱，固定相为C18.粒径5maA. 7. 3. 4 色谱工作站或积分仪。A.7.3.5 超声波发生器。A.7.3.6 定量环:20LaA. 7. 4 参考色谱条件A. 7. 4.1 检测波长:254nma A.7.4.2 柱温:30.C。A.7.4.3 流动相:A.乙酸镀溶液;B.乙睛。浓度梯度:35 min线性浓度梯度从
27、A:B(100 : 0)至A:B(60 : 40).再5min线性浓度梯度从A:B(60 : 40)至A:B(O : 100)。A.7.4.4 流量:1. 0 mL/min。A. 7. 4. 5 进样量:20L。可根据仪器不同，选择最佳分析条件，流动相应摇匀后用超声波发生器进行脱气。A.7.5 试样溶班的制备称取约0.1g酸性红(偶氮玉红)试样，精确至0.0001g.加乙酸镜溶液溶解并定容至100mLa A.7.6 标准溶液的制备分别称取约0.01g.精确至0.0001g.置于真空干燥器中干燥24h后的1-荼胶-4-磺酸铀标准品和4-起基-1-荼磺酸铀标准品。用乙酸镀溶液分别溶解并定容至100
28、mL。然后分别吸取10.0mL、5.0 mL、2.0mL、1.0 mL上述各标准榕液，用乙酸锻溶液定容至100mL.制备成系列浓度的标准溶液。A. 7. 7 分析步骤在A.7. 4参考色谱条件下，分别用微量注射器吸取试样溶液及系列浓度的标准溶液，注入并充满定量环进行色谱检测，待最后一个组分流出完毕，进行结果处理。测定各标准溶液物质的峰面积，分别绘制成各标准曲线。测定试样溶液中的1-荼胶-4-磺酸铀和1-荼酣4-磺酸铀的峰面积，根据各标准曲线求出1-荼股-4-磺酸铀的含量(叫和1-荼酣-4-磺酸铀的含量(w。(参考色谱图见附录Da)A. 7. 8 结果计算未反应原料总和以质量分数Wll计，数值以
29、%表示，按公式(A.的计算:式中zW9一一1-秦腔-4-磺酸铀的含量.%;Wl0一-1-荼酣-4-磺酸铀的含量.%。A.8 未磺化芳族伯肢(以苯膀计)的测定A. 8.1 方法提要Wll =W9 +Vl0 .( A.9 ) 以乙酸乙醋萃取出试样中未磺化芳族伯股成分，将萃取液和苯胶标准溶液分别经重氮化和偶合后GB 28309-2012 再测定各自生成染料的吸光度予以比较与判别。A. 8. 2 试剂和材料A. 8. 2.1 乙酸乙醋。A.8.2.2 盐酸溶液:1+10。A.8.2.3 盐酸溶液:1+3。A.8.2.4 漠化饵溶液:500g/Lo A.8.2.5 碳酸铀溶液:200g/Lo A.8.2
30、.6 氢氧化铀溶液:40g/Lo A. 8.2. 7 氢氧化纳溶液:4g/L。A. 8. 2. 8 R盐溶液:2-荼酣-3.6-二磺酸二铀盐榕液，浓度为20g/Lo A.8.2.9 亚硝酸铀溶液:3.52g/Lo A.8.2.10 苯胶标准溶液:0.1000 g/L。用小烧杯称取0.5000 g新蒸馆的苯股，移至500rnL容量瓶中，以150rnL盐酸溶液CA.8. 2. 3)分三次洗涤烧杯，并人500rnL容量瓶中，用水稀释至刻度。移取25 rnL该溶液至另一250rnL容量瓶中，用水定容。此溶液苯股浓度为0.1000g/L。A.8.3 仪器和设备A. 8. 3.1 分光光度计。A. 8.
31、3. 2 40 rnrn比色皿。A.8.4 试样萃取溶液的配制称取约2.0g试样，精确至0.001g.置于150rnL烧杯中，加100rnL水和5rnL氢氧化铀溶液CA. 8. 2. 6).在温水浴中搅拌至完全溶解。将此溶液移入分液漏斗中，少量水洗净烧杯。每次以50rnL 乙酸乙醋萃取两次，合并萃取液。以10rnL氢氧化铀溶液CA.8. 2. 7)洗涤乙酸乙醋萃取液，除去痕量色素。再每次以10rnL盐酸溶液CA.8. 2. 3)对乙酸乙醋溶液反萃取三次。合并该盐酸萃取液，然后用水稀释至100rnL.摇匀。此溶液为试样萃取溶液。A.8.5 标准对照溶液的制备吸取2.0rnL苯胶标准溶液至100r
32、nL容量瓶中，用盐酸榕液CA.8. 2. 2)稀释至刻度，混合均匀，此为标准对照溶液。A.8.6 重氧化偶合溶璋的制备吸取10rnL试样萃取溶液，移入透明洁净的试管中，浸人盛有冰水混合物的烧杯内冷却10rnino 在试管中加入1rnL澳化饵溶液及0.5rnL亚硝酸铀溶液，稍用力摇匀后仍置于冰水浴中冷却10rnin. 进行重氮化反应。另取一个25rnL容量瓶移入1rnLR盐溶液和10rnL碳酸铀榕液。将上述试管中的苯胶重氮盐溶液加至盛有R盐榕液的容量瓶中，边加边略振摇容量瓶，用少许水洗净试管一并加人容量瓶中，再以水定容。充分海匀后在暗处放置15rnin。该榕液为试样重氮化偶合溶液。标准重氮化偶合
33、溶液的制备，吸取10rnL标准对照溶液，其余步骤同上。A. 8. 7 参比溶液的制备吸取10rnL盐酸搭液CA.8. 2. 2)、10rnL碳酸铀溶液及1rnL R盐溶液于25mL容量瓶中，用水定容。该溶液为参比溶液。12 GB 28309-2012 A. 8. 8 分析步骤将标准重氮化偶合溶液和试样重氮化偶合溶液分别置于比色皿中，在510nm波长处用分光光度计测定各自的吸光度A.、Ab以A.8. 7制备的溶液为参比溶液。A. 8. 9 结果判定Ab三三A.即为合格。13 GB 28309-2012 B.1 试剂和材料B. 1. 1 盐酸。B. 1.2 硫酸亚铁债。B. 1.3 硫氨酸镀溶液:
34、200g/Lo B. 1.4 硫酸溶液:1+1。B. 1.5 三氯化铁潜液。附录B三氧化铁标准滴定溶液的配制方法B. 1.6 重错酸伺标准滴定溶液:c(l/6K2Cr207)=0.1mol/LJ，按GB/T602配制与标定。B.2 仪器和设备见图A.1。B.3 三氧化铁标准滴定溶液的配制B. 3.1 配制取100mL三氯化铁溶液和75mL盐酸，置于1000mL棕色容量瓶中，用新煮沸并已冷却到室温的水稀释至刻度，摇匀，立即倒入避光的下口瓶中，在二氧化碳气体保护下贮藏。B.3.2 标定称取硫酸亚铁镀约3g，精确至0.0001g，置于500mL锥形瓶中，在二氧化碳气流保护作用下，加入50mL新煮沸并
35、己冷却的水，使其溶解，再加入25mL硫酸溶液，继续在液面下通人二氧化碳气流作保护，迅速准确加人35mL重错酸饵标准滴定溶液，然后用需标定的三氯化铁标准溶液滴定到接近计算量终点，立即加入25mL硫氨酸镀溶液，并继续用需标定的三氧化铁标准溶液滴定到红色转变为绿色，即为终点。整个滴定过程应在二氧化碳气流保护下操作，同时做一空白试验。B.3.3 结果计算三氯化铁标准滴定溶液的浓度以c(TiCU计，单位以摩尔每升(mol/L)表示，按公式(B.l)计算:式中zc-cVl 一V2 -V3 c一一重错酸饵标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(mol/L); Vj一一重错酸锦标准滴定溶液体积的准确数值，
36、单位为毫升(mL);.(B. 1) V2一一滴定被重锚酸饵标准滴定溶液氧化成高铁所用去的三氯化铁标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL); V3-一滴定空白用去三氯化铁标准滴定榕液体积的准确数值，单位为毫升(mL)。计算结果表示到小数点后4位。以上标定需在分析样品时即时标定。14 C. 1 试剂和材料C. 1. 1 氯化坝。C. 1.2 氨水。附录C氯化银标准溶液的配制方法C. 1.3 硫酸标准滴定溶液:c(1/2HzS04) =0.1 mol/LJ，按GB/T601配制与标定。C. 1.4 玫瑰红酸铀指示液:称取0.1g玫瑰红酸销，溶于10mL水中(现用现配)。C. 1.5 广范pH试
37、纸。C.2 配制GB 28309-2012 称取12.25g氯化坝，溶于500mL水，移入1000 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。C.3 标定方法吸取20mL硫酸标准滴定溶液，置于250mL锥形瓶中，加50mL水，并用氨水中和到广范pH试纸为8，然后用氧化顿标准滴定溶液滴定，以玫瑰红酸锅指示液作外指示液，反应液与指示液在滤纸上交汇处呈现玫瑰红色斑点且保持2min不褪色为终点。C.4 结果计算刽化银标准滴定溶液浓度的以c(1/2BaClz)计，单位以摩尔每升(mol/L)表示，按公式(C.l)计算:式中zC1 XV4 c=一一一一Vs C1一一硫酸标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(m
38、ol/L); V4一一硫酸标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL);Vs一一消耗氧化顿标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升(mL)。计算结果表示到小数点后4位。.( C.1 ) 15 GB 28309-2012 附录D酸性红(偶氨玉红)液相色谱示意固和各组分参考保留时间D.1 酸性红(偶氯玉红)液相色谱示意图酸性红(偶氮玉红)液相色谱图示意图见0.1。1. 5 1. 0 0.5 0.0 0 5 1-1-荼胶-4-磺酸销52一-1-茶盼-4-磺酸销z3一一酸性红(偶氮玉红)。10 15 。a血|20 25 圄D.1酸性红(偶氯玉红)液相色谱图示意图D.2 酸性红(偶氨玉红)各组分参考保留
39、时间表D.1酸性红(偶氯玉红)各组分参考保留时间峰号组分名称1 1茶胶-4-磺酸锅2 1-茶酷-4-磺酸销3 酸性红(偶氮玉红30 保留时间口un11.88 16.68 27.50 35 时间/min注:不同仪器、不同分离柱、甚至不同时间进样各组分的保留时间均会有所不同，但各组分的洗脱顺序是不变的。16 NFON|8的N阁。国华人民共和国家标准食品安全国家标准由t食品添加剂酸性红(偶氨玉红)GB 28309-2012 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销祷印张1.25 字数30千字2012年6月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2012年6月第一版晤书号:155066. 1-45185定价21. 00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB 28309-2012 打印日期:2012年7月2日F002
