1、道昌中华人民共和国国家标准2012-04-25发布食品安全国家标准食品添加剂番茄红GB 28316-2012 2012-06-25实施数码棚中华人民共和国卫生部发布1 范围食品安全国家标准食品添加剂番茄红GB 28316-2012 本标准适用于以番茄CLycoersicon)或番茄制品为原料，以超临界流体(包括二氧化碳等)或有机溶剂为萃取介质制备的食品添加剂番茄红。2 分子式、结构式、相对分子质量2. 1 分子式番茄红素:C40 H S6 2.2 结构式C比CH3、J、/飞/、/、/、J户、/飞CH3 CHa C比全反式番茄红素化学结构式2.3 相对分子质量536.87C按2007年国际相对原
2、子质量)3 技术要求3. 1 感官要求:应符合表1的规定。表1感官要求项目要求检验方法色泽深红色取适量样晶置于清洁、干燥的白瓷盘中，状态膏状物或油状液体或粉末(晶体)在自然光线下，观察其色泽和状态1 GB 28316-2012 3.2 理化指标:应符合表2的规定。表21里化指标项目指标检测方法番茄红素含量，w/%飞J;?;5.0 附录A中A.3总类胡萝卡素含量，Z旷%，、;:;，5.5 附录A中A.4铅(Pb)/(mg/kg)吉二1. 0 GB 5009. 12 总碑(以As计)/(mg/kg)主二3.0 GB/T 5009. 11 残留溶剂./(mg/kg) 主三50b 乙酸乙酶:附录A中A
3、.5正己烧:GB/T5009.37残留溶剂注:商品化的番茄红产品应以符合本标准的番茄红为原料，可添加符合食品添加剂质量规格要求的明胶、抗氧化剂和(或)食用的糊精、植物油、淀粉而制成，其番茄红素含量和总类胡萝卡素含量符合标识值。a超临界流体萃取的产品除外。b乙酸乙酶和正己:院单独或两者之和。2 A.1 一般规定附录A检验方法GB 28316-2012 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682-2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中
4、所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2 鉴别试验A. 2.1 溶解性易溶于乙酸乙醋和正己烧，部分溶于乙醇和丙隅，不溶于水。A.2.2 颜色反应称取约0.01g试样，榕于10mL丙酣中，形成橙红色透明溶液，向其中连续滴加等体积的5%硝酸铀溶液(5g溶于100mL水中)和1mol/L硫酸溶液，试样溶液的颜色变浅。A.2.3 特征服收峰取适量试样，溶于正己烧中，此试样溶液在446nm、472nm、505nm附近波长处有特征吸收峰。A.3 番茄红素含量的测定A. 3.1 试剂和材料A. 3. 1. 1 二氯甲:皖z色谱纯。A. 3. 1. 2 乙睛:色谱纯。A. 3. 1. 3 乙酸乙醋
5、z色谱纯。A. 3.1.4 水:一级水。A. 3.1.5 乙醇。A. 3.1.6 石油醒:沸程60oC90 oC。A. 3. 1. 7 2，6-二叔丁基对甲酣(BHT)。A. 3. 1. 8 番茄红素对照品:纯度二三90%。A.3.2 仪器和设备A. 3. 2.1 高效液相色谱仪。A.3.2.2 紫外-可见分光光度计。A.3.3 参考色谱条件A. 3. 3.1 色谱柱:固定相为Cl8, 250 mmX4. 6 mm，5m;或其他等效的色谱柱。3 GB 28316-2012 A.3.3.2 柱温:25.C。A. 3. 3. 3 检测器z紫外/可见光检测器或二极管阵列检测器。A.3.3.4 检测波
6、长:472nm。A. 3. 3. 5 流动相:流动相A为乙腊溶液(9+1)，流动相B为乙酸乙醋。洗脱条件为二元线型梯度:流动相B在20min内由0%上升到100%，20min后流动相B保持100%运行5min。A.3.3.6 流速:1. 0 mL/min. A.3.3.7 进样量:10L。A.3.4 分析步骤A. 3. 4.1 BHT溶班的配制准确称量2.5g BHT置于500mL棕色容量瓶中，用二氯甲烧定容，浓度为5000 mg/L，密闭避光放置，可稳定储存3个月。A.3.4.2 番茄红素对照晶溶液的配制分别称取10mg番茄红素对照品和20mg BHT，精确至0.0001 g，取少量二氯甲皖
7、溶解后，转移至100mL棕色容量瓶中，用二氯甲皖定容，混合均匀。由于番茄红素不稳定，番茄红素对照品溶液使用前应采用A.3.4.3方法标定其纯度。番茄红素对照品溶液应在一20.C条件下储存，24h内可使用。A.3.4.3 番茄红素对照晶溶班的标定量取1mL(V A)番茄红素对照品榕液，置于50mL(VB)棕色容量瓶中，加入5mL乙醇和5mL BHT溶液，用石油酷定容，混匀。将此榕液置于1cm比色皿中，以石油酿作空白对照，用紫外-可见光分光光度计在472nm附近的最大吸收波长处测定吸光度。吸光度应控制在o.30. 7之间，否则应调整溶液浓度，再重新测定吸光度。番茄红素对照品溶液中番茄红素浓度以CS
8、T计，单位为毫克每升(mg/L) ，按公式(A.l)计算z式中zAmax X D X 10 000 CST二3450 Amax 一一番茄红素对照品溶液在472nm附近的最大吸收波长处测得的吸光度值;D 稀释因子CV1l/VA); 10000一一浓度换算因子;3 450一一番茄红素的吸光系数。A.3.4.4 标准曲线的制备.( A.1 ) 分别吸取适量番茄红素对照品榕液，用二氯甲皖稀释，并用棕色容量瓶定容，配制成浓度分别为1.0g/mL、5.0g/mL、10.0g/mL、20.0g/mL、30.0g/mL、40.0g/mL、50.0g/mL系列的番茄红素标准溶液。在A.3. 3参考色谱条件下，对
9、系列的番茄红素标准溶液进行色谱分析，得到峰面积值-番茄红素浓度的标准曲线图。A.3. 4. 5 试样液的配制取适量试样置于玻璃容器中，于60.C水浴中30min融化。称取融化后的试样1.0 g1. 2 g，精确至0.0001g，用少量二氯甲皖溶解后转移至100mL棕色容量瓶中，加入10mL BHT溶液，超声混匀，冷却至室温，用二氯甲:皖定容。再取1mL置于50mL棕色容量瓶中，用二氯甲烧定容，混匀后用于高效液相色谱分析。4 GB 28316-2012 A.3.4.6 测定在A.3. 3参考色谱条件下，对试样液进行色谱分析，以保留时间和光谱特征定性，以试样中番茄红素组分峰面积与标准曲线比较定量。
10、A.3.5 结果计算番茄红素含量以质量分数Wj计，数值以%表示，按公式(A.2)计算:c v . / 1 r n/ Wj=、J. . 1 ;:;- X 100% .( A.2 ) 式中zc 根据标准曲线查得的试样液中番茄红素浓度的数值，单位为微克每毫升(g/mL);V 一一试样定容体积的数值，单位为毫升(mL); m 一一?试样质量的数值，单位为克(g);1 000X1 000一一质量换算因子。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。A.4 总类胡萝卡素含量的测定A. 4.1 试剂和材料A. 4. 1. 1 二氯甲烧。A. 4. 1. 2 2，6-二叔丁基对甲酣
11、(BHT)。A. 4.1.3 乙醇。A. 4. 1. 4 石油膛。A. 4. 1. 5 BHT榕液:准确称量2.5g BHT置于500mL棕色容量瓶中，用二氯甲:皖定容，浓度为5000 mg/L，密闭避光放置，可稳定储存3个月。A.4.2 仪器和设备紫外-可见光分光光度计。A.4.3 分析步骤A. 4.3.1 试样液的制备取适量试样置于玻璃容器中，60.C水浴30min融化。称取融化后的试样1.0g1.2g，精确至0.000 1 g，取少量二氯甲:皖溶解后置于100mL棕色容量瓶中，加入10mL BHT溶液，超声泪匀，冷却至室温，二氯甲烧定容(溶液A)。从溶液A中转移5mL(Vc)，置于50m
12、L(VD)棕色容量瓶中，二氯甲烧定容(溶液B)。转移2mL(VE)溶液B置于100mL棕色容量瓶(VF)中，添加10mL乙醇，石油酷定容，混合均匀，记作溶液C。A. 4. 3. 2 测定采用紫外-可见光分光光度计扫描，1cm比色皿，波长范围300nm550 nm，石油酿作空白，记录溶液C的最大吸光度(吸光度应控制在O.20. 8之间)。A.4.3.3 结果计算总类胡萝卡素含量以番茄红素的质量分数W2计，数值以%表示，按公式(A.3)计算z5 GB 28316-2012 式中:A 一溶液C的最大吸光度值;AXD 2= .:-:X100 ms X 3450 ms 一一试样质量的数值，单位为克(g)
13、; D 稀释因子(V F X V D) / (V E X V c) ; 3 450 番茄红素的吸光系数。.( A.3 ) 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2%。A.5 Z酸乙醋的测定A. 5.1 仪器和设备配备顶空进样器和氢火焰离子检测器(FID)的气相色谱仪。A.5.2 参考色谱条件A. 5. 2.1 色谱柱:交联键合5%二苯基95%聚二甲基硅氧烧固定液的石英毛细管柱，30mXO. 53 mm, 膜厚3.0m;或其他等效的色谱柱。A.5.2.2 载气:氮气。A.5.2.3 载气流量:4.0mL/mino A.5.2.4
14、 进样口温度:180 c。A.5.2.5 柱温:73 oC，保持5min，以25oC/min的速率升温至160.C，保持1min。A.5.2.6 检测器温度:230 .C。A.5.2.7 进样体积:1mL定量环。A.5.2.8 分流比:1 : 6。A.5.3 顶空条件A. 5. 3.1 顶空瓶平衡温度及时间:70 .C , 120.0 min. A.5.3.2 定量环温度:100 .C。A. 5. 3. 3 传输线温度:110 .C。A.5.3.4 混合方式z每3omin搅拌1min A.5.3.5 加压时间:0.2min。A.5.3.6 定量环填充时间:0.2min. A.5.3.7 定量环
15、平衡时间:0.05min. A.5.3.8 进样时间:1. 0 min。A. 5. 3. 9 顶空瓶压力:95. 15 kPa(13. 8 psi)。A.5.3.10 进样量:1mL。A.5.4 分析步骤A. 5.4.1 对照渣制备A. 5. 4. 1. 1 Z酸Z醋贮备液A(10 000 mg/kg) 在天平上放置一空量瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋500mg，再精密加入邻苯二甲酸二乙醋使得溶剂量达到50.00g，精确至0.1mg，超声混匀。此溶液在室温环境下可稳定存放2个月。. GB 28316-2012 A. 5. 4. 1. 2 Z.酸Z醋贮备液B(100 mg/kg) 在天平上放置一
16、空量瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋贮备液A500 mg，再精密加入邻苯二甲酸二乙醋使得溶剂量达到50.00g，精确至0.1mg，超声混匀。此溶液在室温环境下可稳定存放2个月。A. 5. 4. 1. 3 乙酸Z醋标准溶渡C(5mg/kg) 在天平上放置一空顶空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋贮备液B500 mg，再精密加入邻苯二甲酸二乙醋使得溶剂量达到10.00g，精确至0.1mg，放入1个12mm15 mm的磁力搅拌棒。密封，混匀。A. 5. 4. 1. 4 Z.酸Z醋标准溶液D(10 mg/kg) 在天平上放置一空顶空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋贮备液B1000 mg，再精密加入邻苯二甲酸二
17、乙醋使得溶剂量达到10.00g，精确至0.1mg，放入1个12mm15 mm的磁力搅拌棒。密封，混匀。A. 5. 4. 1. 5 乙酸乙醋标准溶灌E(17.5 mg/kg) 在天平上放置一空顶空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋贮备液B1 750 mg，再精密加入邻苯二甲酸二乙醋使得溶剂量达到10.00g，精确至0.1mg，放入1个12mm15 mm的磁力搅拌棒。密封，混匀。A.5.4.1.6 Z酸Z醋标准溶液F(25mg/kg) 在天平上放置一空顶空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙醋贮备液B2500 mg，再精密加入邻苯二甲酸二乙醋使得溶剂量达到10.00g，精确至0.1mg，放入1个12mm15
18、mm的磁力搅拌棒。密封，混匀。A. 5. 4. 2 试样液制备测定前，取约30g试样，加热至40.C50 .C，机械搅拌。趁热精密称取5000 mg，置于1个预先称重的顶空瓶中，精密加入邻苯二甲酸二乙醋，使试样和潜剂的总重为10.00g，精确至0.1mg，放入l个12mm15 mm的磁力搅拌棒。密封，混匀。A. 5. 4. 3 测定取乙酸乙醋标准溶液C、D、E、F和试样液，按A.5. 3和A.5. 2分别进样。A.5.5 结果计算乙酸乙醋含量以质量分数W3计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(A.。计算:式中zW3 =As X (s工)x生飞.t1STI m2 As 一一试样液中乙酸
19、乙醋色谱峰的峰面积;.( A.4 ) CsT/AsT一-根据乙酸乙醋标准溶液C、溶液D、溶液E、溶液F相应浓度和峰面积计算得到的浓度/峰面积比的平均值;mj 一一试样液的总重，单位为克(g); m 一一试样质量，单位为克(g)。7 NFON|-gN阁。国华人民共和国家标准食品安全国家标准中食品添加荆番茄红GB 28316 2012 * 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤印张0.75字数14千字2012年6月第一次印刷开本880X12301/16 2012年6月第一版* 书号:155066. 1-45247定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB 28316-2012 打印日期:2012年6月28日F002
