1、GB/T 17811一1999前言本标准等效采用美国公职分析化学家协会(AOAC)0995年版)(动物蛋白质饲料的胃蛋白酶消化率测定方法过滤法。在技术内容上，原方法中所用的恒温搅动器气根据实际情况改用恒温平转摇床;再则，限于国内试剂条件，选用市场上易购的胃蛋白酶试剂(1; 3 000)代替原方法指定的胃蛋臼酶试剂(1; 10000)。本标准由中华人民共和国国内贸易部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(武汉)负责起草。本标准主要起草人2屈利文、钱助。:JQ 1 范围中华人民共和国国家标准动物蛋白质饲料消化革的测定胃蛋白酶法Determination
2、of digestibility in anlmal protein feeds-Pepsln method 本标准规定了动物蛋白质饲料消化率的胃蛋臼酶测定方法。GB/T 17811 1999 本标准适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率的胃蛋白酶测定方法。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 6432一1994饲料中粗蛋白测定方法GB/T 6433-1994 饲料粗脂肪测定方法GB/T 6682-1992 分析实验室用
3、水规格和试验方法3 方法原理脱过脂的试样，用温热的胃蛋臼酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化16h，过滤分离不溶性残1画，洗涤、干燥，测定残渣的粗蛋白含量。同时，测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白含量。4 试剂本标准所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯。实验室用水应符合GB/T6682中兰级水的规格。4. 1 o. 2 %胃蛋白酶溶液z将6.1mL浓盐酸稀释至1000 mL水中(溶液pHl2)，加热至4245C , 加入2g活性为1: 10 000生化级胃蛋白酶若活性不是1: 10 000，可使用活性1: 3 000生化级胃蛋白酶1)(不可使用非生化级胃蛋臼酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应
4、为每毫升20IUJ，并缓慢搅拌直至溶解。勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热。!自用前配制。4.2 乙自遣。4.3 内酬。4.4 定氮试剂:按GB/T6432中试剂及配制方法规定。果用说明:1) ()AC中指定为1100000国家质量技术监督局1999-08-10批准2000- 02-01实施2lfp GB/T 17811一19995 仪器、设备5. 1 恒温式平转摇床1jz温控范围2050C，7)(浴式或空气浴式均巧，转速可调(l5300r/min)。5.2 实验室用样品粉碎机。5.3 索氏抽提器、脱脂设备z按GB/T6433中仪器、设备规定。5.4 定氮仪器、设备按GB/T6432中仪
5、器、设备规定。5.5 实验室常用仪器、设备。6试样和j备取具有代表性试样.用四分法缩分至200g，然后粉碎至全部过0.90mm孔筛(20目)，混匀装于密封容器，保存备用。7 测定步骤7. 1 月且脂称取12g试样用乙磁(4.2)脱脂(含脂肪小于1%可不脱脂，含脂肪1%10%建议脱脂，含脂肪大于10%则必须脱脂)。脱脂方法可参照GB/T6433中粗脂肪抽提方法进行。脱脂后的样品需烘f，?2 胃蛋白酶消化称取脱脂烘干(7.1)后的样品若干克(精确至O.000 2 g，含氮量约580mg)于250mL带盖磨口瓶中，加150mI.新配制的并已预热至4245C的胃蛋白酶溶液(4.1) ，要确保样品完全被
6、胃蛋白酶溶液浸湿，盖紧瓶盖，将瓶夹于恒温摇床(5.。上，于45C恒定搅动16h进行保温消化。7.3 消化残渣的处理从搅动器上取下磨口瓶，呈45。角放置，让残渣沉淀15min以上，随后在铺有快速滤纸的布氏漏斗k抽滤，先用少量水将瓶盖上的残渣洗至滤纸上，再将磨口瓶保持沉淀时的角度移至布氏漏斗t.慢慢倾出内容物，使之通过滤纸后形成连续的细流，避免任何不必要的搅动。液体通过滤纸的速度应与倾入的速度相同。当上层液体通过滤纸后，于瓶中加入15mL丙酬，用拇指盖住瓶口剧烈振摇，放开。再用拇指堵住瓶口，在滤纸上方将瓶倒置振摇，放开拇指让丙酣和残渣流到滤纸上。再用一份15mL的丙嗣进行洗涤，照t法振摇和倒出。检
7、查瓶子，并用丙嗣再次洗涤。当全部液体通过滤器后，用洗瓶以少量丙嗣洗涤漏斗壁t残渣两次，并抽干。从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸，无损地移入凯氏烧瓶中，并将凯氏烧瓶白If105C烘箱内烘干。7.4 粗蛋白的测定将上述(7.3)烘干的残渣按GB/T6432中方法测定粗蛋白含量(W，)。同时，称取脱脂烘干(7.1)后的样品若干克(精确至O.000 2 g，含氮量约580mg)，直接按GB/T6432方法测定脱脂未酶解的样品中粗蛋白的含量(W，), 8 分析结果的计算及表示8. 1 结果按式()计算W，肌YAX(%) =一二百，. , X 100 式f，X-试样的胃蛋白酶消化率，%; ) 1 ( 果用说明:口气()lC方法中.规定使用t!i温搅动器。二II G8/T 17811-1999 W, 脱脂未酶解的原样品中粗蛋白的平均含量，%; W，一脱脂酶解后残渣中粗蛋白的平均含量，%。所得结果表示到小数点后一位。8.2 允许差每个试样脱腊后取两份试料进行平行测定，以其算术平均值为测定结果。测定结果的相对偏差按GB/T6432中粗蛋白测定的相对偏差允许范围。2,12
