1、GB/T 19178-2003 前言桑蚕原种的生产和销售一直都实行国家和省区统一管理，但是对于桑蚕原种的质量检验全国至今尚无一个统一的标准。随着市场经济的发展，桑蚕品种的不断更新，桑蚕原种的省际间、国际间的流通日益频繁。由于各省区质量标准不同、检验方法各异，没有统一的标准，给桑蚕原种质量的管理带来诸多不便。因此，有必要制定一个统一的桑蚕原种质量检验标准来规范桑蚕原种质量的检验。本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位z农业iiil种植业管理司、中国农业科学院蚕业研究所、农业部蚕桑产业产品质量监督检验测试中心(镇iT) ，lIlr江大学动物科学学院、浙江
2、省蚕种公司、江苏省蚕种管理所、四川省蚕种管理总站、山东省丝绸总公司、广东省丝绸(集团)公司。本标准主要起斗人手奕仁、沈兴家、叶夏裕、徐安英、徐孟奎、潘恒谦、汪萍。本标准委托农业部种植业管理司负责解释。I 桑蚕原种检验规程1 范围本标准规定了桑蚕原种质量检验的项目、检验方法。本标准适用于商品桑蚕原种的检验。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1 苗蚁GB/T 19178-2003 在相同条件下同时催青的同一品种同一批次的蚕卵群体中，最初孵化的少数蚁蚕。3 检验项目3. 1 外观包装a) 单峨良卵数，b) 折净率，。标签gd) 合格证.3.2 卵质a) 每张良卵数，b) 良卵率sc)
3、实用孵化率gd) 病卵率，e) 纯度。4 撞验规则以制种批为单位，抽样检验.5 检验方法分为抽样检验与常规检验两种类别.5. 1 抽样检验5. 1. 1 抽样时间越年种在冬季浴消、整理后抽样，浸酸种在浸酸整理后抽样。5. 1. 2抽样方法、敏量以制种批为单位按表1随机抽取外观检验用原种，并进行外观包装检验g然后随机抽取其中两张，将每张原种各卵圈纵向分割成二等份，按卵圈序号将来自不同张的卵圈重新拼接成两张，其中一张为正样，另一张为剧样。1 GB/T 19178-2003 表1原种成晶质量检验抽样表单位为张批原种数量外观包装检验卵质检验500 10 2 501-1000 20 2 二三1001 3
4、0 2 5. 1. 3 样晶保存样品保存条件与原制种批相同。5. 1. 4 检验流程检验工作流程见图1。制种批民卵数检验1-7号卵圈抽样且卵率检验1-7号卵圈外观撞瞌正样检验实用孵化率撞撞1 -7号卵圈二次抽样拼接两张蝇度检验8-14号鼻圈副梓(备用病卵率检验15 28号卵圈图1抽样检验流程固5. 1. 4. 1 外观包装检验按表1规定的数量抽取外观包装检验样品，进行检验。a) 标签、合格证s检查样品标签、合格证的有无及是否符合要求。制种批母峨应有检疫单位检疫合格证。桑蚕原种母峨检疫方法鬼附录A(资料性附录)。b) 折净率s调查桑蚕原种样品底板上贴补的卵圈数，按式(1)计算折净率。折净率(%)
5、二塑窒旦旦垦盈亏导主盟堕笠X100 . . . ( 1 ) 调查卵圈总数c) 单峨良卵数观察每张样品的卵圈情况，选择其中良卵数最少的三个卵圈进行调查，取最低值作为单峨良卵数。5. 1. 4. 2 卵质检验2 a) 每张良卵数、良卵率z取拼接样品的第1-7号卵圈，用透明纸覆盖，调查每峨良卵数、不良卵数，计算每峨良卵率;取每峨良卵数及良卵率的算术平均数为该样品的平均每峨良卵数及平均良卵率。每张良卵数(粒)平均每峨良卵数X28 . . . . .( 2 ) b) 实用孵化率z越年种在胚胎完全解除滞育后、浸酸种在浸酸后进行催青检验。取良卵数和良卵率检验后的七个卵圃，按简化催青标准催青。从见苗蚁日开始连
6、续3日-5日，每日上午调查各卵圈的孵化头数，取其中连续2日最多孵化头数GB/T 19178-2003 按式(3)计算实用孵化率。连续2日最多孵化头数实用孵化率(%)= 100 . . . . .( 3 ) 调查良卵数c) 纯度s取拼接样品的第814号卵圈，分成14个半圈，再将每个半圈分割成三等份，各取其中的一份合并进行简化催青，收集全部蚁蚕饲养。饲养过程中要注意消毒防病，禁止淘汰弱小蚕，防止遗失。根据幼虫或茧(蜗)等的形态性状，判断混杂蚕或茧个体数，按式(4)计算品种纯度。调查总头数混杂蚕或茧个体数纯度(%)= 100 ( 4 ) 调查总头数d) 病卵率g取拼接样品的第1528号卵圈，每圈分别
7、装入小纸袋，在温度(29土0.5)C、相对湿度二三85%的条件下催青，盛孵化后第5日开始检验。将每个卵圈孵化的蚁蚕及死卵置于乳钵孔中，作为一个检验集团。加少量1.0%2.0%氢氧化御溶液充分研磨，再加O.5 mLl. 0 mL研磨液研磨。然后点祥制两套标本，分别由两名检验员检验，每个样点观察五个以上视野。对发现有微粒子抱子的样品，再点样复检、确认。5.2 常规检验5.2. 1 送样时间送样时间同5.1. 1。5.2.2 样晶保存条件同5.1. 3。5.2.3 检验流程检验工作流程见图20制种批良卵量检验送样随机选定纵向1列7良鼻率检瞌个卵匿施行检验催青外观撞验宰用孵化率捡盹卵死青罹的囹卵个8
8、2 饲葬纯度检验固2常规检验流程图5.2.3.1 外观包装检验逐张检验，检验方法同5.1. 4. 10 5.2.3.2 卵质检验3 GB/T 19178-2003 a) 每张良卵数、良卵率检验2在每张28个卵圈中，随机选定纵向1列7个卵圈，依5.1. 4. 2 a)迸行检验。b) 实用孵化率检验z整张样品催青，至转青时将上述选定的7个卵圃单圈包种，进行检验。检验时间、检验方法同5.1. 4. 2 b)。c) 病卵率检验z样品催青孵化后，收集该张原种的催青死卵，置于乳钵孔中，依5.1. 4. 2 d)进行病卵率检验。用户需要在催青收蚁前对微粒子抱子进行预知检查时，可在每个卵固的内侧随机挑取五粒良
9、卵计140粒，依5.1. 4. 2 d)进行检验。d) 纯度检验s用户在饲养过程中调查。需要预知检查时，可以从实用孵化率检验的7个卵圈中各收集三分之一的蚁蚕，按5.1. 4. 2 c)进行检验。6 数值修约卵粒数取整数，其余按数值修约规则保留两位小数。7 签发检验报告检验完成后，检验单位应给受检单位出具检验报告，内容包括z受检原种的品种名称、批次、生产季节、生产单位、各参数检验结果、判定结果、检验单位、检验日期等，并经复核、审核后盖章.4 GB/T 19178-2003 A. 1 母娘处理A. 1. 1 袋峨附录A(资料性附录)桑蚕原种母峨微粒子病检疫原种母峨应用标明序号的28娥(格)纸质峨盒
10、对号袋峨。峨盒上应标明生产单位、品种名称、批次、娥盒号。娥盒号应与蚕种编号一致。A. 1. 2 干燥袋娥后将娥盒按制种批顺序排列，摊放于通风干燥的室内。5日后烘娥，不得提前鲜烘。烘娥温度68. 0C土3.0 C .干燥程度以母峨头胸干燥、腹部稍软为宜。A.2 母峨盒验收母娥烘干后要及时清理捆扎，连同送检母娥盒清单，送检验单位检疫。检验单位要对送到的娥盒进行查验。凡峨盒填写不清，批号、盒号错乱，或母峨发霉、虫蛙、鼠咬、腐烂、烘焦及鲜烘等影响检验正确性的母娥，检验单位应拒收。验收合格后，检验单位要妥善保管好母娥，并及时按规定进行检验。A.3 检疫方法采用集团磨娥检验，以每盒母峨为一个检验集团。A.
11、 3. 1 检疫程序按序编号拆盒投峨注液磨碎静置过滤离心沉淀振荡取样镜检观察记载结果A. 3. 2 操作步骤A. 3. 2. 1 按序编号按送俭单位进行编号，批次和娥盒号不变。A. 3. 2. 2 拆盒役峨拆开娥盒，检查袋峨情况，若该盒母峨装满或空峨数少于三个，则登记空峨号后(对应卵圈应淘汰) 将母峨投入磨峨杯内，撕下娥盒上写有批号的盖纸，连同编号随磨峨液传递。若空峨数满三个，则该盒母娥不予检验，也不计入母峨总数，其对应的原种应陶汰。A. 3. 2. 3 注液磨碎在磨峨杯中加注0.5%碳酸销或碳酸饵溶液80mL90 mL.转速(8000土400)r/min磨娥20s 以上。A. 3. 2. 4
12、 静置过滤将峨液静置2min，倒入放有过滤材料的漏斗内过滤至峨液基本滤尽。A.3.2.5 离心沉淀用清水校准各离心管的质量。转速(3000士150)r/min离心3min，倒去上清液，在沉淀物中加人1%2%氢氧化御溶液约1mL。A. 3. 2. 6 振荡取样将离心管置振荡器上振荡，每支管中取四滴样液，点于两块载玻片上制成临时标本。A.3.2.7 镜栓观察用光学显微镜在高于600倍下由两名检验员分别检验，每人检两滴样液，每滴样液观察不少于五个视野。若两人检验结果不一致，或有微粒子抱子，则应重新取样，复检确认。5 GB/T 19178-2003 A. 3. 2. 8 记载结果将显微镜观察结果准确填
13、入原种母娘检疫单(见表A.1)，有微粒子于包子者用十、元微粒子抱子者用一表示。表A.1 原种母峨检瘦单年月日峨盒号生产场名批次品种名空峨号检验结果复核检验员A.4 卫生消毒A. 4. 1 若检验时有微粒子于包子，则用盐酸或1%有效氯漂白粉液对容易造成交叉污染的检验用具浸渍30 min.再用清水冲洗干净。A. 4. 2 检验室工作人员应更衣、换鞋入室，防止交叉污染和微粒子病原扩散。A. 4. 3 检验室每日工作结束后，用含有效氯1%的漂白粉液进行用具和地面消毒。A.5 病峨率计算病峨率按式(A.ll进行计算。A.6 签发捡瘟证书病娥率(%)=带微粒子袍子集团数X100 制种批母娥总数.( A.l ) 检验完成后，由检验单位向受检单位出具母峨检疫(验报告，对检验合格的批次应发给相应数量的原种母娥检疫合格证或签发合格证书。6
