1、Ics 67050X 04 a雪中华人民共和国国家标准GBT 23372-2009食品中无机砷的测定液相色谱一电感耦合等离子体质谱法Determination of inorganic-arsenic in foodsLiquid chromatography-inductive coupled plasma mass spectrometer2009-03-16发布 2009050 1实施宰瞀鹃鬻瓣警麟瞥霎发布中国国家标准化管理委员会“刖 盖本标准的附录A为资料性附录。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位：国家食品质量安全监督检验中心。本标准主要起草人：林立、陈玉红、陈光、杨彦
2、丽、周诸非、王浩、杨红梅。GBT 233722009食品中无机砷的测定液相色谱-电感耦合等离子体质谱法GBT 23372-20091范围本标准规定了液相色谱和电感耦合等离子体质谱测定食品中无机砷亚砷酸根As(HI)和砷酸根As(V)的方法。本标准适用于食品中无机砷的测定。本标准的方法检出限为As(IlI)O002 mgkg，As(V)O004 mgkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件
3、，其最新版本适用于本标准。GBT 6682 2008分析实验室用水规格和试验方法(IsO 3696：1987，MOD)3原理样品中无机砷经提取、净化后，用液相色谱仪对砷的各种形态进行分离，并直接导人电感耦合等离子体质谱仪测定，与标准样品进行比较，外标法定量。4试剂除非另有说明，在分析中所使用试剂均为优级纯，用水为GBT 6682 2008中规定的一级水。41 3(体积分数)乙酸溶液：取30 mL乙酸置于适量水中，再稀释至100 mL。42 015(体积分数)乙酸溶液：取015mL乙酸置于适量水中，再稀释至100mL。43 30双氧水。44无水乙醇。45流动相(A相)451 2 mmolL磷酸二
4、氢钠：准确称取0312 0 g磷酸二氢钠用水定容至l 000 mL。452 10 mmolL无水乙酸钠：准确称取0820 3 g无水乙酸钠用水定容至1 000 mL。453 02 mmolL乙二胺四乙酸二钠：准确称取0074 6 g乙二胺四乙酸二钠用水定容至1 000 mL。454 3 mmolL硝酸钾：准确称取0303 0 g硝酸钾用水定容至1 000 mL。455 4氢氧化钠水溶液：称取氢氧化钠4 g用水定容至100 mL。46标准储备液：砷酸根、亚砷酸根、砷甜菜碱、一甲基砷、二甲基砷(以下简称五种砷)，每种标准储备液的浓度为5 pgmL，贮存于4冰箱中，有效期3个月。47五种砷标准工作液
5、：吸取五种砷的标准储备液(46)20 mL到10 mL的容量瓶中，配得混合标准工作液浓度为10mgL。分别吸取混合标准工作液0o、01、02、05、10mL于一组100mL的容量瓶中，用015的乙酸溶液(42)定容至刻度，得到单元素浓度分别为0O、0001、0002、0005、0010 pgmL的混合标准溶液。使用时现配。48滤膜：045 pm，水相。49聚二乙烯基苯聚合物反相填料(或等效的脱脂柱)：250 mg，3 mL。该柱使用前采用5 mL甲醇和1GBT 23372-200910 mL水活化，保持萃取柱处于湿润状态。410石墨化炭黑小柱：500 mg，6 mL。该柱使用前采用10 mL甲
6、醇和20 mL水活化，保持萃取柱处于湿润状态。5仪器51 液相色谱仪(LC)：二元梯度泵。52 电感耦合等离子体质谱仪(ICPMS)。53 pH计。54分析天平：感量001 g和0000 1 g。55粉碎机。56涡旋混合器。57恒温水浴锅。58超声波清洗器。59高速冷冻离心机：转速不小于8 000 rmin。6分析步骤61提取和净化611植物性固体样品试样用粉碎机粉碎。准确称取样品1 g4 g(精确至001 g)(海带、紫菜等海产品类植物样品1 g，谷物类样品2 g，蔬菜类样品4 g)，加入38 mL水，涡旋混匀后，超声萃取40 rain，加入3乙酸溶液(41)2 mL混匀沉淀蛋白，于4冰箱中
7、静置5 rain后，取上清液过045 pm过滤膜(48)于15 mL离心管中，以8 000 rmin转速于4离心10 rain，吸取上清液注入液相色谱仪进行分析。蔬菜等色素较深的样品要过石墨化炭黑小柱(410)去除颜色。海带、紫菜等样品萃取后，可在过滤前的溶液中加入02 mL双氧水(43)，将As()氧化为As(V)。同时制备试剂空白溶液。612动物性固体样品试样用粉碎机粉碎。准确称取贝类及虾蟹类等海产品、乳粉、畜禽肉类样品2 g(精确到001 g)，加入38mL水，涡旋混匀后，超声萃取40rain，加入3乙酸溶液(41)2mL混匀沉淀蛋白，于4冰箱中静置5 min后，取上清液过045 pm过
8、滤膜(48)于15 mL离心管中，以8 000 rmin转速于4离心10 rain，吸取上清液注入液相色谱仪进行分析。油脂含量高的样品过聚二乙烯基苯聚合物反相填料的样品前处理柱(49)去除油脂。同时制备试剂空白溶液。613液体样品取50 mL白酒类样品在80下挥干酒精，用水定容至10 mL比色管中，直接上机进行检测。啤酒和乳制品等液体样品称取lo g，加入水称重至38 g(精确到001 g)，涡旋混匀后，超声萃取20 rain，加人20 g(精确到001 g)3乙酸溶液(41)混匀沉淀蛋白，于4冰箱中静置5 rain后，取上清液过045 I*m过滤膜(48)于15 mL离心管中，以8 000
9、rrain转速在4下离心10 min，吸取上清液注入液相色谱仪进行分析。乳制品过聚二乙烯基苯聚合物反相填料的样品前处理柱(49)去除油脂。同时制备试剂空白溶液。62液相色谱分离条件621 色谱柱参数：阴离子保护柱IonPac AG 19(50 rmnX4 mm)或相当者；阴离子分析柱IonPac AS 19(250 mmX4 mm)或相当者。622流动相：A相组成(10 mmoiL无水乙酸钠，3 mmolL硝酸钾，2 mmolL磷酸二氢钠，02 mmolL乙二胺四乙酸铁钠，4氢氧化钠水溶液调pH107)。B相组成(无水乙醇)。GBT 23372-2009A+B(99+1)。623流速：10 m
10、Lrain。624进样量：5 pL50 pL(视样品中无机砷含量而定)。63电感耦合等离子体质谱参考条件积分时间：05 s。功率：I 550W。雾化器：同心雾化器，自动提升。载气流量：060 Lmin120 Lmin。辅助气流量：与载气流量的总和保持在10 Lmin12 Lmin之间。采样深度：95 mm。采集质量数：砷75。灵敏度：中质量数300 Mcps(mgL)。进样管内径：o2 mm。载气：氩气，纯度99999。色谱柱与ICP-MS相联的管线距离不超过05 m。64测定取样品处理液和标准工作液各5 pL(或相同体积)分别注入液相色谱仪进行分离，电感耦合等离子体质谱仪进行检测。以其标准溶
11、液峰的保留时间定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。五种砷标准样品色谱图参见附录A。7结果计算食品中无机砷含量(mgkg)的计算见式(1)：2X一只(A，。一A：。)V1 000m1 000 (1)百式中：x试样中无机元素As(1I)和As(V)的总和的含量，单位为毫克每千克(mgkg)；A。测定用试样液中无机砷As(II)或As(V)的含量，单位为毫克每升(mgL)；A。试剂空白液中无机砷As(111)或As(V)的含量，单位为毫克每升(mgL)；y一试样处理液的总体积，单位为毫升(mL)；m试样质量，单位为克(g)。计算结果保留三位有效数字。8精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。GBT 23372-2009附录A(资料性附录)五种砷标准样品色谱图图A1 砷甜菜碱(AsB)、二甲基砷(DMA)、亚砷酸根(As)、一甲基砷(MMA)、砷酸根(AsV)五种砷标准样品色谱图B00O0000OOO0OOO盎
