1、ICS 67.040 X 04 中华人民主t/、和国GB 国家标准GB/T 23495-2009 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精纳的测定高效液相色谱法Determination of benzoic acid, sorbic acid and saccharin sodium in foods一High performance liquid chromatography method 2009-04-27发布中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会2009-08-01实施发布d . GB/ T 23495-2009 目U吕本标准的附录A为资料性附录。本标准由中国标准化研究院提
2、出并归口。本标准起草单位;f(庆市计量质量检测研究院、LU西省食品质量监督检验中心。本标准主要起草人:陈世奇、巩强、赵博、冯晓斌、李根容、吴锐、何军、龚迎昆、弓耀忠、屠大伟。1 范围3 原理不同样品定量。4. 1 4.2 4.3 4.6 正己烧。食品中苯甲酸、山梨酸和糖精铀的测定高效液相色谱法GB/T 23495-2009 4. 10)过洁、。入30mL冰乙酸，加水20) ，用水溶解后定容至1000 mL。b) 乙酸溶液:取4.3mL冰乙酸，用水稀释至1000 mL。将上述两种潜液按体积比37: 63混合，即得pH4.4乙酸盐缓冲溶液。4.8 pH7.2磷酸盐缓冲溶液:a) 称取23.88g磷
3、酸氢二饷(NazHPO. 12HzO)，用水溶解后定容至1000 mL。b) 称取9.07g磷酸二氢梆(KH2P04)，用水溶解后定容至1000 mL. 将上述两种磷酸盐溶液按体积比7: 3混合，即得pH7.2磷酸盐缓冲溶液。4. 9 标准洛液的配制:a) 苯甲酸标准储备液:准确称取0.2360 g苯甲酸锅，加7).溶解井定容至200mL。此溶液每毫升相当于含苯甲酸1.00 mg。l GB/T 23495-2009 b) 山梨酸标准储备液:准确称取O.268 0 g山梨酸饵，加水溶解并定容至200ml.。此溶液每毫升相当于含山梨酸1.00mg. c) 糖精铀标准储备液:准确称取0.1702 g
4、糖精制(CH.CONNaSOz)(120 .C烘干4h)，加水溶解并定容至200mL。此溶液中糖精铀的含量为1.00mg/mL. d) 混合标准使用液:分别准确吸取不同体积苯甲酸、山梨酸和糖精铀标准储备溶液，将其稀释成苯甲酸、山梨酸和糖精制含量分别为0.0mg/mL，0.020吨/mL，0.010mg/mL、0.080mg/mL、0. 160 mg/mL、0.320mg/mL的混合标准使用液。4. 10 微孔滤膜:0.45m.7c相。5 仪器与设备5. 1 高效液相色谱仪t配有紫外检测器。5.2 离心机:转速不低于4000r/ min. 5. 3 超声波水浴振荡器。5.4 食品粉碎机。5.5
5、旋涡混合器。5.6 pH i十。5. 7 天平:分度值为0.01g和0.1mg。6 分析步骤6. 1 样品处理6. 1. 1 液体样品6. 1. 1. 1 碳酸饮料、果酒、葡萄酒等液体样品:称取10g样品(精确至0.001g) (如含有，醇需水浴加热除去乙醇后再用水定容至原体积)于25mL容量瓶中，用氨水0+1)(4.5)调节pH至近中性，用水定容至刻度，泡匀，经微孔波、膜(4.10)过滤，滤液待上机分析。6. 1. 1.2 乳饮料、植物蛋白饮料等含蛋白质较多的样品:称取10g样品(精确至O.001 g)子25mL容量瓶中，加入2mL亚铁氧化饵溶液(4.3)，摇匀，再加入2mL z.酸辞溶液(
6、4.4)摇匀，以沉淀蛋白质，加水定容至刻度.4000 r/min离心10min.取上清液，经微孔滤膜过滤，洁、液待上机分析。6. 1. 2 半固体样品6. 1.2. 1 含有肢基的果冻样品:称取O.5 gl g样品(精确至0.001g) ，加水适量，转移至25mL容量瓶中，再加水至约20mL，置60.C 70 .C水浴中加热片刻，加塞，剧烈振摇使其分散均匀后，加氨水0+1)(4.5)调节pH至近中性，加塞，剧烈振摇，使样品在水中分散均匀，置60.C 70 .C水浴锅中加热30mill.取出后麓热超声5min，冷却后用水定容至刻度，用微孔谑膜(4.10)过滤，滤液待上机分析。6.1.2.2 油脂
7、、奶油类样品:称取2g3 g样品精确至0.001g)于50mL具塞离心管中，加入10mL 正己皖(4.的，用旋涡混合器使其充分溶解，4000r/min离心3min，吸出正己烧提取液转移至250mL 分液漏斗中，再向50mL具塞离心管中加入10mL正己屁重复上述步骤，合并正己烧提取液于250mL 分液漏斗中。于分液漏斗中加入20mL pH1. 4乙酸盐缓冲溶液(4.7)加塞后剧烈振摇分液漏斗约30 s，静置分层后，将水层转移至50mL容量瓶中，再加入20mL pH4. 4乙酸盐缓冲溶液，重复上述步骤，合并水层并用乙酸盐缓冲溶液定容至刻度，经微孔滤膜(4.10)过滤，滤破待上机分析。6. 1. 3
8、 固体样品6. 1. 3. 1 肉制品、饼干、糕点1称取粉碎均匀样品2g3 g(精确至0.001g)于小烧杯中，用20mL;Jj(分数次清洗小烧杯将样品移入25mL容量瓶中，超声振荡提取5mlll，取出后加2mL亚铁缸化悍溶液(4.3) ，摇匀，再加入2mL乙酸辞溶液(4.的，摇匀，用水定容至刻度。移入离心管中，4000 r/min离心5 min，吸出上清液，用微孔滤膜(4.10)过滤，洁、液待上机分析。GB/T 23495-2009 6. 1. 3.2 油脂含量高的火锅底料、调料等样品:称取样品2g3 g(精确至0.001g)子50mL具塞离心管中，加入10mL磷酸盐缓冲液(4.的，用旋涡混
9、合器充分混合，然后于4000r/min离心5min，小心吸出7.1.层转移到25mL容量瓶中，再加入10mL磷酸盐缓冲液于具塞离心管中，重复上述步骤，合并两次水层液，用磷酸盐缓冲液定容至刻度，r昆匀，用微孔滤膜(4.10)过滤，滤液待上机分析。6. 1. 3. 3 凝胶糖果、胶基糖果:按半固体样品6.1. 2. 1含有胶萃的果冻样品处理。6.2 色i普条件a) 色谱柱:C18柱，250mm X 4. 6 mm，5m，或性能相当者Eb) 流动相:甲晖(4.1)+乙酸佳溶液(4.2)( 5+95); c) 流速，1mL/ min; d) 检测波长:230nm; e) 进样量:10L。6.3 测定取
10、处理液和混合标准使用液各10L注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样被中被测物质含量，供计算苯甲酸、山梨酸和糖精铀同时测定的谱图参见附录A)。7 结果计算样品中苯甲酸、山梨酸和糖精铀的含量按式(1)计算:式中:x = c X V X 1000 -m X 1 000 X一一样品中待测组分含量，单位为克每千克(g/kg);一一由标准曲线得出的样液中待测物的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL); V一一样品定容体积，单位为毫升(mL); m一一样品质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。. ( 1 ) goN|m寸问NH筒。GB/T 23495-2009 附录(资料性附录)苯甲酸、山梨酸和精精铀的高效液相色i普圄A Delector A:230 nm mV 500 250 。0.0 I/min 22.5 20.0 17.5 15.0 12. 5 10. 0 7.5 5.0 2.5 侵权必究 版权专有苯甲酸、山梨酸和糖精铀的高效液相色谱图固A.l书号:155066 1- 37624 定价:14.00元88/T 23495- 2009
