1、ICS 67.040 X 04 中华人民主t/飞、GB 和国国家标准GB/T 23496-2009 食品中禁用物质的检测碱性橙染料高效液相色谱法Determination of forbidden materials in foods-Dyes of basic orange High performance liquid chromatography method 2009-04-27发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2009-08-01实施发布G/ T 23496-2009 目q昌本标准的附录A为资料性附录。本标准由中国标准化研究院提出井归口。本标准起草单位
2、:湖北省产品质量监督检验研究院(国家饮料及粮油制品质量监督检验中心。本标准主要起草人:文红、朱宽正、张莉、王红、吕晓华、陈有武、范志勇、李诗。I 1 范围2 规范性引用文件食品中禁用物质的检测碱性橙染料高效液相色谱法下列文件中的条款的修改单不包括勘、口GB/T 6682 1 3 原理4. 1 4. 2 4.3 4. 4 4. 5 4.6 4.7 4. 8 4. 9 G / T 23496-2009 碱性橙22.置于100mL容量瓶匀，该溶液在4.C条件下避光保存，有效期为1个月。4. 11 础性橙染料标准工作溶液使用时配制4.1 1. 1 0.1 mg/mL碱性橙染料标准溶液A.准确移取10m
3、L碱性橙染料标准储备溶液(4.10)于100 mL容量瓶中.JM定容液定容至刻度，混匀。4. 11 .2 分别移取碱性橙染料标准溶液A(4o.11. 1) 1. 00 mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL、20.00mL 于100mL容量瓶中，用定容液定容至刻度，混匀。分别相当于1.00g/mL、2.00g/mL、5.00g/mL、10.00g/mL、20.00，g/mL浓度标准溶液。5 仪器与设备5. 高效液相色谱仪，附有紫外检测器.GB/T 23496-2009 5. 2 天平.感量0.0001 g和O.01 g 0 5.3 超声披清洗仪。5. 4 旋转蒸发仪。5.5 离心机:
4、3 000 r/mino 5.6 氮吹仪。5. 7 旋涡振荡器。5. 8 电热板。6 分析步骤6. 1 样品处理6. 1. 1 固体样品(如萧椒粉、豆制品等)将样品粉碎混匀，称取20g(准确至0.01g)样品，置于50mL离心管中?加5g无水硫酸铀，25mL 无水乙醇超声提取30min , 3 000 r/min，离心10min，将上层提取清液倾出置于离心管中，再次加入10 mL无水L醇，重复提取3次，合并提取液，3000 r/min，离心10min，将上层提取清液倾倒于圆底烧瓶中，于40.C减压浓缩至近干，用无水乙醇溶解并转移到刻度试管中，在50.C条件下氮气吹干，用定容液洛解并定容至2mL
5、;经0.45m滤膜过滤后待进样。6.1.2 渍体样品将样品?昆匀，称取20gC准确至0.01g)样品，置于100mL烧杯中，电热板上加热挥发至近干，用元水乙障溶解并转移到刻度试管中，在50.C条件下氮气吹干，用定容液溶解并定容主2mL;经0.45m滤膜过滤后待进样。6. 1. 3 含油样品将样品?昆匀，称取20g(准确至0.01g)样品，置于50mL离心管中，加5g无7./(硫酸铀，25mL元水乙醇超声提取30min , 3 000 r/min，离心10min，将上层提取清液倾出置于离心管中，再次加入10mL 元7c_z:.，醇，重复提取3次，合并提取液，3000 r/min，离心10min，
6、将上层提取清液倾倒于圆底烧瓶中，于40.C减压浓缩至近干，用15mL乙腊溶解并转移到25mL刻度试管中，加入2mL正己皖，涡旋振荡萃取，弃去正己;皖层，重复3次，将乙睛层倒入圆底烧瓶中，于50.C减压浓缩至近干，用元水乙醇溶解并转移到刻度试管中，在50.C条件下氯气吹干，用定容液禧解并定窑至2mL。经O.45m滤膜过滤后待进样。6.2 高效液相色i营测定6.2.1 色谱条件a) 色谱柱:C，s(4.6mmX250 mm ,5 ,um) (或相当型号色谱柱); b) 流动相:甲醇+20mmol!L乙酸镀=65+35;c) 流速:1. 0 mL/min; d) 桂温:室温;e) 检测波长:碱性橙2
7、，449nm;碱性橙21、碱性橙22，485nmj f) 进样量:20Lo6.2.2 标准曲线绘制用配制的碱性橙染料标准工作溶被(4.11.2)绘制以峰面积为纵坐标、工作溶液浓度为横坐标的标准工作曲线。6.2.3 定量分析待测样液中应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后在进样分析。7 结果计算试样中每种碱性橙染料的含量按式(1)分别计算:2 GB/T 23496一2009x = c X V X 1 000 -m X 1 000 、，、BAr飞. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8、 . . 式中:X一试样中每种碱性橙染料的含量，单位为毫克每千克Cmg/kg)j c一由标准曲线查出的试样液中每种碱性橙染料的浓度，单位为微克每毫升g/mL)j V一一样品最终定容体积，单位为毫升CmL); m一-1式样的质量，单位为克(g)。计算结果保留小数点后一位数字。8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。-, GB/ T 23496-2009 附录A(资料性附录碱性橙染料标准色谱图2 0. 10 二0.05 。.005.00 10.00 15. 00 -审查性橙2l;2 -惊险俊2; 3 -碱性橙22.图A.1耐性橙染料标准色i曾图(波长:449 nm) 3 O. JO 二0.05 0. 00 5.00 10.00 15.00 -碱悖橙2l;2 性橙2;3 . -碱性橙22.图A.2破性橙标准色i营图波长:485 nm) GB/T 23496-2009 唱-11m川!1m; 版权专有侵权必究怜书号:155066 1- 37625 定价:14.00元
