1、ICS 65. 140 B 47 中华人民共和国农业行业标准NY 5136-2002 无公害食品蜂胶2002-07一25发布2002- 09-01实施中华人民共和国农业部发布267 NY 5136 2002 本标准由中华人民共和国农业部提出a唱企FR 本标准起草单位z中E疆农业科学院蜜蜂研究所，北京蜂珍科技开发有限公司，农业部蜂产品质蠢监督检验测试中心(北京)。，非标准主要起草人zi午iE巍、玉凤J忠、滋二惹事富、磁岩、.:E小艺。2自8NY 5136-2002 无公害食品蜂胶1 范围本标准规定了无公害蜂胶的定义、质量要求、检验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存要求。本标准适用于蜂胶的生产
2、、加工和销售。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容或修订版不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 4789. 2 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3 食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB 4789. 10 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.11 食品卫生微生物学检验溶血性
3、链球菌检验GB 4789. 15 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数GB/T 5009.11 食品中总碑的测定方法GB/T 5009. 12 食品中铅的测定方法GB/T 5009.17 食品中总柔的测定方法GB/T 5009. 19 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法GB 15204 食品容器、包装材料用偏氯乙烯E氯乙烯共聚树脂卫生标准GB 16331 食品包装材料用尼龙6树脂卫生标准GB 16332 食品包装材料用尼龙成型品卫生标准GB/T 17332 食品中有机氯和拟除虫菊醋类农药多种残留的测定3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 蜻胶propolis 蜜蜂将采自植物的枝条
4、、叶芽及愈伤组织等的分泌物与上膊腺、蜡腺等的分泌物同少量花粉混合后所形成的粘性物质。3. 2 总黄嗣lolal f1 avonoids 蜂胶中黄嗣及类黄隅类物质的含量总和。本标准是以蜂胶中常见的高良姜素(galangin)、懈皮素( qUErcetin)、芦丁(rutin )、杨梅酣(myriceti川、主亮菲醇(kaempferol)、芹菜素(apigenin)、松属素(pinocembrin)、柯因(chrysine)等8种黄酣含量之和表示。3. 3 氟化时间oxidation time 蜂胶的综合抗氧化能力(即综合还原能力).通常指一定量的蜂胶使一定体积的浓度为0.01moL 269 N
5、Y 5136-2002 的高锺酸梆液的紫红色完全消退所需时间，用秒来计量。4 质量要求4. 1 感宫指标无公害蜂胶的感官指标应符合表1的规定。褒1感官指标状态不透明的团块或碎片，在35C以上逐渐变软，有粘性和可塑性气味有明显的芳香味色泽褐色、灰褐、暗绿、灰黑色等，有光泽滋味有明显的辛辣感4.2 理化指标无公害蜂胶的理化指标应符合表2的规定。褒2理化指标项目指标总黄嗣含量/(%)二主8氧化时间/s豆豆2275%乙醇提取物啻量/(%) 注55蜂蜡和75%乙醇不糟物吉量/(%) 运454.3 微生物指标无公害蜂胶原料的微生物指标应符合表3的规定。囊3蝇胶的徽生物指标项目指标菌落总数/(cfu/g)1
6、000 大肠菌群/(MPN/100g) 30 霉菌及障母菌数/(cfu/g)200 致病菌不得撞出4.4 有毒有事物质限量无公害蜂胶原料的有毒有害物质限量应符合表4规定.襄4有毒有事物质限量项目指标铅(以Pb计l/(mg/kgr运l碑(以As计)/(mg/kg)O.3 采/(mg/kg)0.3 六六六/(mg/kg)0.05 滴滴沸/(mg/kg)0.05 氟胶辄菊脂/(mg/kgl0.05 270 5 检验方法5. 1 抽样与取梓5. 1. 1 抽样方法NY 51362002 每批20件以下者，抽样件数不少于50%，20件以上者，每增加10件，增抽样品一件。5.1.2 取样方法随机从包装中取
7、出蜂胶若干，对于块状蜂跤，用工具从不同的胶块的不同部位上采取5g10 g样品，每批的取样总量不超过300g。将块状的样品放入3C10C的冰箱中1h后，取出样品，用电动粉碎机将其粉碎成粉状。5.2 感官检验5. 2. 1 色泽将蜂胶块冷冻后，用锤砸开，在自然光的环境中观察外表及断面的的光泽度。5.2.2 黯性将蜂胶块(沫加热至35C60C以上，用手揉搓成条，再慢慢向两端拉伸。含胶量越大，秸性越大，拉伸长度亦越大。5. 2. 3气昧、滋昧取2g试样置于一的玻璃板上，先口尝蜂胶的滋味，再点燃，噢其气味是否异常。5.3 理化检验5. 3. 1 蜂胶总黄嗣含量的测定(见附录A)。5.3.2 蜂胶抗氧化时
8、间的测定(见附录A)。5.3.3 蜂胶中乙醇可溶物的含量测定(见附录A)。5.3.4 蜂蜡和不溶物的含量测定(见附录A)。5.4 微生物检验5.4.1 菌落总数按GB4789.2规定的方法测定。5. 4. 2 大肠菌群按GB4789. 3规定的方法测定。5.4.3 霉菌及酵母计敏按GB4789. 15规定的方法测定5.4.4 致病菌按GB4789.4、GB4789.5、GB4789. 10、GB4789. 11规定的方法测定。5.5 有毒有害物质检验5.5.1 六六六、滴滴涕按GB/T5009. 19规定的方法测定。5.5.2 氟胶佩葡萄按GB/T17331规定的方法测定。5. 6铅、呻、宗分
9、别按GB!T5009.12、GB/T5009. 11、GB/T5009. 17规定的方法测定。6 检验规则6. 1 组批规则6. 1. 1 产品均应以批为单位，同批产品的品质、规格、包装应整齐一致。6.1.2 同一班次，用同一原料、按同一过程所生产的间规格产品为一个货批。271 NY 5136-2002 6.2 检验类型6. 2. 1 型式检验型式检验是对产品质量进行全面考核，即对本标准规定的全部要求(指标)进行检验。有下列情形之一者应对产品质量进行型式检验.的产品出口、评优或国家质量监督机构、行业主管部门提出型式检验要求sM前后两次抽样检验结果差异较大;c)因人为或自然因素使生产环挠发生较大
10、变化。6.2.2 交收检验每批产品交收(出厂)前，生产单位都要进行感宫、标志和包装等的检验，检验合格后并附合格证的产品方可交收(1Jj厂)。6.2.3 包装检验应按本标准第8章的规定进行。6. 3 抽样方法抽样成按本标准5.1. 1的规定，从每一批货中随机抽取样品。6.4 判定规则6. 4. 1 检验结果全部符合本标准规定的产品为合格。6.4.2 产品中某一项指标不符合要求的，允许对不合格项目进行加密取样复测，复测仍不合格的，则判定该批产品为不合格。6.4.3 该批次样本标志、包装、净含量不合格者，允许生产单位进行整改后申请复检一次。若检验结果中出现不符合本标准卫生安全、有毒有害规定的指标，允
11、许复检一次，复检应取同一批产品中副样进行，以复检结果为准。感宫和卫生指标淦测不合格不得复枪。7 标志7.1 食品标签庇符合GB7718的要求，且标明产品的食用量。运输包装上的标志应与食品标签一致。7.2 图示标志!但符合GB191的要求。8 包装，运输、贮存8. 1 包装8. 1. 1 包装材料应符合食品卫生安全标准要求。8.1.2 包装应牢固、防潮、整沽，便于装卸、仓储和运输。8.1.3 产品应按产地、规格分别包装。8.2 运输8.2.1 运输时应做到运输工具清洁卫生、干燥、无异昧、无污染，严禁与有毒、有害、有异昧、易污染的物品混装混远。8.2.2 运输途中严防日晒、雨淋，装卸时应轻放轻卸。
12、8. 3 贮存8. 3. 1 临时或短期贮存，应以阴凉干燥、清洁卫生的场所为宜，严禁日晒、雨淋及有毒有害物质的污染。8.3.2 长时间存放，应按产品等级、规格分别堆放，保持贮存场所阴凉干燥。8. 3. 3 产品不得与有毒、有害、有异味的物品同处贮存。272 A. , 蜂胶总黄面含量的测定A. ,. , 原理附录A(规范性附录)蜂胶的理化指标检测方法NY 5362002 母核上资基、甲氧慕、糖试元的个数不同，而形成一系列黄嗣和黄嗣戒。蜂胶中常见的黄酣是以下8种:高良姜素、懈皮素、芦丁、杨梅嗣、歧菲醇、芹菜素、松属素、柯因。在紫外波长270nm处均有吸收。这8种黄酬的分子中因含有瓷基的数量不同因而
13、极性不同，在反向C柱上的保留时间不同，随着经基个数的减少其保留时间增加。因此8种黄闹出峰的顺序应是芦丁杨梅翻懈皮素+茨菲薛芹菜素松属素柯因高良姜素。用反向高效液相色谱法测定蜂胶中的黄酣含量，快速、准确、精密度高。A. ,. 2 试剂a)高良姜素，榈皮素.芦丁，杨梅酬，鼓菲醇，芹菜素，松属素，柯因色谱纯.Sigma公司)。b )甲醇(优级纯，并经0.5m滤膜过滤)、乙醇、磷酸(优析纯)、蒸恼水(重蒸，并经0.45m滤膜过滤)。A. ,. 3 设备和仪器a)超声波水浴;b)振荡器;c)高压液相色谱仪(紫外检测器), d)天平。A. 1.4 色i曾条件色消柱，Kromasil-C,(0.4 cmX
14、25 cm) , 流动相，65%甲醇-35%水(用磷酸调pH至3), 流速，0.7 mL/min , 检测器UV270 nm X O.IAUFS, 定量方法:外标法(峰面积)。A. ,. 5 步骤A.5. 配制标准溶液精密称取高良姜素、懈皮素、芦丁、杨梅剧、孩菲醇、芹菜素、松属素、柯因标样各2.0mg于50时，的容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀备用。A.5.2 样晶溶液的制备称取蜂胶样品。.Ig (精确到O.OOlg)，放人50mL的容量瓶中，加入40mL甲醇，在超声波水浴中加热至60c ，振荡30min，待样品溶解后，用甲醇定容，用0.5m的滤膜过滤，滤液用做上机分析。A.5.3 测定在上述
15、色谱条件下，取10L标准溶液进行分析，得到色谱图，重复进样6次，计算峰丽积的平均值;在同一色谱条件下，取10L样品溶液进行分析，外标法计算样品中各种黄酬的含量。A. 1.5.4 计算. ( A. 1 ) 式中.C 每100g样品中各种黄酣的含量，单位为毫克(mg), M -10L标准样品中各种黄翻的含量，单位为微克(g)，儿101，L样品溶液中各种相应黄酬的峰面积平均值;273 NY 5136 2002 V，-样品定容的体积.单位为徽升(L;w一一样品的称取量，单位为克(g);A，一10L标准溶液中各种冀酶的雄商夜平均值gV，._-草草忌伪造样体积，单位为徽升年L).A.2 串串破氯化曹营阔的
16、西睡定A. 2.1 测定原稳离运重量鲁事是一种强氧化剂，在强酸枝条件下草草氧化维能最缀，MnO一离子在溶液中呈紫红色，被还原后因获得5个电子生成Mn酌，溶液的色泽消失，其反应式如下zMnO十8H+十5e.Mn+十4日，0紫红色)()1;色缝呈交的化学经成极为复杂，珑已从中成功地分离并鉴定出三三百多种物质，其中具有还戴维能的不饱和理事、自室、黯、酸、黄盲目、蒋烯类等化合物就有一百多种，这些化合物与高键酸梆发生氧化还原反股后，离链酸梆被还原，从而使溶液的颜色由紫红色变成元色。利用这一特性，每次测定同等质量的蜂Jll使浓度和体积吉普面定前紫红色高锺酸僻液的颜色完全消退所需时间用秒计).我们将其称为该
17、样品的氧化时间。氧化时间短约蜂疲具有较强的抗氧化能力，比较研测定前蜂胶东1抗氧化时即可对它们的质最品质做出相应的判断。A. 2. 2试剂a)乙醇(95%) 1分析纯。bl离镀酸铮z分析纯。曹搭成0.01moL凡的离锺酸何液，R精确称取3.160 嚣的离键酸镑，烧水稀粹至1L , c)硫酸(95%98%)，分析纯。配制成20%的硫酸液。心蒸烧水。A. 2. 3设备极仪器a)天平(感:1:O. 001剧。b)电动粉碎视。c)振荡器bd)秒衰。的250mL具塞磨口镰形瓶若干。f) 50 mL、100mL、1000mL容量瓶若干，在)50 mL镀形题若干ah) 0.2 mL、1.0 mL、2.0mL、
18、5.0mL、10.0mL移液管若干。)漏斗、定量滤纸若干。A.2.4 古董事酷a)在室温下，称取1g(精确到0.001g)新鳞鳞品，放入250mL的具塞锥形耀中，泌人25mL乙酶，盖好瓶草草，置于振荡器上低速振毒草1h.然后加入100mL蒸馈水，充分摇匀后，过滤，收集滤液。b)移液管吸取0.5mL上述滤液，放入50mL的容量瓶中，用蒸缩水稀稀至勤i磨:.。用移液管吸取10mL事替罪事液，放入50mL的锥形瓶中，加入2.mL20%的硫锻液，振荡1mn , 然后，用0.2mL的吸量管如入0.05mL 0.01 moL/L舵离锤酸御液.在加入高锺蓝蓝何液的同时，开动秒表，当辫液的紫红色完全消退时，停
19、止秒衰，记录溶液的紫红色完全消退所耗阔的时间(以秒t)，P是该祥品的抗氧化时间。每一个祥品同时平行测定两次，取算术平均值作为该样品的测定倍。A.3 鳞胶巾za事可溶糟的含量E测定A. 3. 1 测定原爆274 NY 5136-2002 蜂胶原料中含有的主要生物活性和药理作用成分能溶于75%的乙醇液，以此作为评定蜂胶原料质量的一个指标。测定时称量试样中不溶于75%乙醇部分的质量，用减量法可得到溶于75%乙醇液的质量，即是75%的乙醇提取物的质量，计算其在试样中的百分含量。A. 3. 2 试剂的乙醇(95%):分析纯gb)蒸馆水$c)定量滤纸。A. 3. 3 仪栅与设备a)天平(感量O.OOlg)
20、;b)电动粉碎机sc)鼓风干燥箱;d)自动振荡器;e)具塞磨口锥形瓶(250mL); f)容量瓶(100mL、500mL); g)烧杯(100mL、500mL); h)瓷研钵3i )波纹漏斗(骨12cm)。A. 3. 4 方法和步骤a)配制75%乙醇液;b)称取10g(精确到0.001g)蜂胶试样放人研钵内，加人50时，75%的乙醇液，研磨成糊状，将糊状物移入锥形瓶内，用少量乙醇液分三次冲洗研钵，冲洗液合并于锥形瓶内，使乙醇液的体积达到150mL，盖好瓶塞，将此瓶置于振荡器上，室温条件下每隔1h振荡30min，浸提时间不得少于24h; c)取一张预先称重的滤纸置于漏斗内，将上述提取液过滤于另一
21、个锥形瓶中，再用少量乙醇分三次冲洗原锥形瓶及滤纸，不溶物及滤纸室温晾干后，放人鼓风干燥稿内50C干燥至恒重，称重，计算乙醇提取物的质量。在相同条件下做三次平行试验。A. 3. 5 计算公式X OV 阴气)X 100 ,- w ( A. 2 ) 式中zX, 样品中乙醇提取物的含量，%; W 样品质量，g;W, 不溶物质量.g，平行试验允许的误差不超过1.5%.取三次测定的平均值。A.4 蜂蜡和不溶物的含量测定从本标准A.3中测得蜂胶的乙醇提取物含量，再运用减量法，求得蜂蜡和不溶物的含量，具体计算公式如下:X, = 100% - x , . ( A. 3 ) 式中-X, 蜂蜡和不溶物含量，%; X，-一乙喜事提取物含量，%。275
