1、中华人民共和国国家标准症疾诊断标准及处理原则Diagnostic criteria and principl目。rmanagement of mat aria GB 1 5 9 8 9 1 9 9 5 根据中华人民共和国传染病防治法及中华人民共和国传染病防治法实施办法制订本标准。1 主题内容与适用范围本标准规定了症疾的诊断标准及处理原则。本标准适用于各级各类防疫和医疗卫生机构对在疾的诊断和处理。2诊断原则1页据疤区住宿史，发病时有定期发冷、发热、出汗等临床症状，脾肿大等体征，以及病原学检查、血清免疫学检查等结果，予以诊断。3诊断标准3. 1 曾于疤疾传播季节在症疾流行区住宿，或有输血史。3.2
2、 间歇性定时发作，每天、隔天或隔两天发作一次发作时有发冷、发热、出汗等临床症状。发作多次可出现脾肿大和贫血。重症病例出现昏迷等症状（详见附录。3, 3 用抗芜药作假定性治疗，3天内症状得到控制者。3.4 间接荧光抗体试验或酶联免疫吸附试验抗体阳性（详见附录B).3. 5 血涂片查见疤原虫。其种类有间日在原虫、恶性症原虫，三日症原虫和卵形疤原虫（详见附录A）。疑似病例具备3.1与3.2 0 临床诊断疑似病例加3.3或3.4 0 确诊病例2疑似病例加3.5。按查见的症原虫种类，分为间日症、恶性症、三日症和卵形疤。4处理4. 1 治疗4. 1. 1 间日症、三日症和卵形症治疗成人量氯哇1.2 1.
3、5g 3日分服第1日0.句，第2、3日各0.3或0.45g），加伯氨喳90180mg4 8日分服（每日22.5mg). 4. 1. 2 恶性疤治疗4.1.2.1对氯喳未产生抗性地区恶性症治疗成人量氯噎1.2 1. 5g 3日分服（第1日o.饨，第2、3日备。.3或0.45日），加伯氨喳67.5mg 3日分服（每日22.5mg）。4. 1. 2. 2对氯噎产生抗性地区恶性疙治疗任选以下方案之，赈喳1.5g 3日分服，加伯氨喽45或67. 5mg 2日或3日分服；咯荼院1.2g加磺胶多辛1.Og 2日分服，加伯氨噎45或67.5mg 2日或3日分ijf! ；咯荼呢。.8 1. Og加磺胶多辛1.0
4、 1. 5g加乙胶嘈睫5075mg，均2日分服g青斋唬酶销600mg5国家技术监督局199512-15批准1996-07-01实施322 GB 15989 1995 日分服（第l日lOOmgX2次，第25日每日50mgX2次），加伯氨喳67.5mg3日分服（以上均为成人单）。4. 1. 3 疑似病例假定性治疗成人耸立乱噎0.6g顿服，在氯喳抗性地区用口服喳0.6日顿服。确诊后按4.1. 1或4.1. 2治疗。4. 1. 4 间日疤抗复发治疗流行季节前，对1或2年内有症史者，成人用乙胶暗晚100mg2日分服，加伯氨喳90mg4日分服。4. 1. 5 重症病例治疗（详见附录。4.1.5.1 用青商
5、唬陈纳或咯茶院或商甲酷或二盐酸奎宁注射作抗疤治疗。4.1.5.2输液，补充维生素，并作支持和辅助治疗。4.1.5.3对症治疗和并发症处理。4.2预防m药在高度流行区，对儿童、工地民工、疫点居民和流动人口，在流行季节成人用乙胶喃睫50mg加伯氨喳22.5mg顿服，孕妇改用氯喳或赈喳0.3g顿服，均每10日一次。在氯噎抗性地区用PJK喳0.饨，或磺胶多辛500mg加乙胶略院37.5mg，均每10日一次，首次连H2日。4.3 灭蚊在高度流行区或疫点，用DDT(2g/m2）滞留喷洒住屋和牲畜棚，在普遍使用蚊帐地区用澳氨菊酶(1020mg/m2）或二氯苯磁菊醋（200300mg/m2）浸泡（或喷洒）蚊帐
6、。4.4 防蚊提倡使用蚊帐、蚊香，利用高、艾等野生植物烟熏驱蚁，有条件住户装置纱窗、纱门。改变露宿习惯，减少蚊虫叮咬。4.5 环境治理结合农田水利和新农村建设，填平坑洼，排除积水，平整田地，修整沟渠，加深蓄水。在有条件地区，稻旧养鱼或润湿灌溉。在大劣按蚊为媒介地区，结合生产开发村庄周围的灌木林。323 GB 15989一1995A1 血涂片检查A 1. 1 吉氏液染色光学显微镜（油镜）检查附录A病原学检查（补充件A 1. 1. 1 血片制作在洁净载玻片上涂制薄血膜与厚血膜。一般从耳垂或手指取血（婴儿可在足RI!取血）。先用酒精棉球消毒取血部位，然后用一次性和l血针（或用折断半边的蘸水笔尖代替，
7、但每次使用后经煮沸消毒）迅速刺入，轻压挤出血液。用推片边缘中部取少许（0.5 1. OpL）血液在载玻片上推制成薄血膜再用推片的一角，取血约45pl,（火柴头大小的血滴），在同一载玻片上的适当位置涂制成直径为0. 8 1. Ocm的圆形厚血膜。自然干燥，用铅笔在薄血膜上、或用特种蜡笔在玻片反面编号。A 1. 1. 2血片染色染色液用吉氏染粉lOg、中性甘油SOOmL和纯甲醇SOOmL配制而成。配制时将吉氏染粉段大研钵中逐步加入少量甘池，充分研磨后，量有色玻瓶中，用甲醇分数次洗出研钵中的甘油染液，倒入瓶内摇匀，在室温下放置35天，即可使用。染色前，先用甲醇固定薄血膜，将育氏染液用pH7. 0 7
8、. 2的水配成3%的稀释液，将血片插入染色缸内染色，或用滴管将此稀释液滴在厚、薄血膜上，染色30mino若需快速染色，可在2mL水中加吉氏染液3滴，染色6min。或先在厚血膜上加几滴清水溶去血红蛋白后滴加染液，效果更佳。染色后，用水轻轻冲洗，插在玻片板上晾干。A1. 1.3血片镜检在染色血片上滴少许柏油，用光学显微镜泊镜）检查。应检查厚血膜为主，薄血膜主要用于原虫种类鉴别和原虫密度计数。染色后症原虫核呈红色，胞浆呈蓝色。除环状体外，其他各期疤原虫均可查见褐色的症色素。现症病人至少检查100个厚血膜视野，带虫者应查完整个厚血膜，未发现在原虫判为阴性。以薄血膜中平均每100个红细胞中的原虫数或厚血
9、膜平均每100个自细胞范围内的原虫数，推算每微升血中的原虫密度。A 1. 2 瑞氏液染色光学显微镜（油镜）检查A 1. 2. 1血片制作参见Al.1. 1。A 1. 2. 2血片染色用瑞氏染粉0.泣，置于研钵内，加入中性甘油3mL，充分研磨，然后逐次加入少量甲醇至研钵内洗去染液，倒入有色玻璃瓶内，再在研钵内加甲醇冲洗，至用完lOOmL甲醇为止，摇匀过滤后即可使用。染色时，先在厚、薄血膜间用蜡笔划条横线，在厚血膜上加清水23滴溶去血红蛋白，在薄血膜上直接加约lmL瑞氏染液染色2min，然后在薄血膜上加与染液等量的水稀释，并引到厚血膜上，使厚、薄血膜同时再染色56min，水洗晾干。本法不宜用于大量
10、血片染色，但染色所需时间短，多用于医院门诊检验。A 1. 2. 3血片镜检参见Al.1. 3 A 1. 3 荧光素叮咬橙染色一荧光显微镜检查A 1. 3. 1 血片制作参见Al.1. 1，但厚血膜应比吉氏液染色的厚血膜略薄，即用3pL血涂成直径为. 2 1. Scm的亚厚血膜；薄血膜则不宜过薄，可在涂片时推片以45。角涂成较厚的薄血膜。A 1. 3. 2 血片染色先用甲醇固定薄血膜，厚血膜用清水榕去血红蛋白。用日丫睫橙lg，加pH6. 5 7. 0 磷酸缓冲液lOOmL配制成1%叮咬橙母液。染色时，将自丫睫橙母液。.lmL加生理盐水9.9mL配成万分之一稀释液。用滴管取稀释液23滴于血膜上，染
11、色4060s，加盖玻片。A 1. 3. 3 血片镜检用荧光显微镜或普通光学显微镜加简便荧光光源装置代替暗室检查。疤原虫和白细胞的核呈现黄绿色荧光，胞浆皇桔红色荧光。A2 骨髓穿刺按医院常规进行。本法一般不宜用于疤疾诊断，仅在特殊情况下用于鉴别诊断。32 时间接荧光抗体试验（IFAT)GB 15989-1995 附录B血清免疫学检查（补充件）Bl. 1 抗原片制备常用食蟹猴症原虫为代用抗原。以食蟹猴疤原虫感染恒河猴，待红细胞感染率超过2%，且多数原虫为裂殖体前期时取血，加肝素抗凝，经2000r/min离心15min，弃血浆，加5倍容积pH 7. 2的0.Olmol/J，磷酸盐缓冲盐水（PBS），
12、昆匀后再次离心，弃上清液，重复洗涤34次，将细胞沉淀物加PBS恢复至原血量后混匀成悬液，使厚血膜每个视野有58个裂殖体或大滋养体。取悬液约JOL i吁干净载玻片的一端，推制成6.Ocm 1. 5cm i条形亚厚血膜，置室温中晾干或吹干。用纸包装放在有燥剂的密封器内。在20有效期为1年，在4有效期为3个月。用体外培养的恶性症原虫制备抗原片，应在红细胞感染率为4%以上且以裂殖体为主时收集培养原虫刷l片方法同前。Bl. 2血样的采集、运送和保存血清、滤纸干血滴均可应用。前者由不加抗凝剂的全血分离获得在4C叮作运送及短期保存，20C可保存2年左右，但应减少反复冻融，以免影响抗体活性。后者将滤纸切成lO
13、cmX2cm纸片，在滤纸上压出直径为1.2cm的圆形印迹，从受检者的耳垂或手指取血充满圆圈，其血lid:约为20！，（约相当血清IOL），编号后阴干，放入有干燥剂的密封塑料袋内，在4可保存半年，20 c可保存2年。Bl. 3操作方法受试血清以pH7. 2的0.0 lmol/J, PBS作I IO或1 20稀释，或将滤纸干血滴血样部分剪碎，放在有0.1或o.2mL PBS的井内，在4浸泡过夜，即成相当于1 10或1 20的血清稀释液。对1 10或1 20稀释度反应阳性的血样，继续作倍比稀释（1 40 1 80）进行检测，直至转为阴险。最后的阳性稀释度即为终点滴度。从冰箱中取出的抗原片，立即用电风
14、扇吹干或在回暖后打开塑料袋，用特种蜡笔将每张抗原片划分成者千小格，每小格加一个血样或一个滴度，每批试验均设参考阳性、阴性血清及PBS空白对照。加血清后即移入37c混盒，30min后取出，用PBS缓慢冲洗后放入有PBS的缸内浸5！Omin，用蒸馆水冲洗后再晾T或吹干。然后逐格滴加F因稀释的I 10的抗人lgG荧光抗体（或按产品说明）置湿盒内37温育30min，然后按上述方法清洗、吹干，用荧光显微镜检查反应结果。Bl. 4 反应标准以裂殖体及大滋养体胞浆的荧光强度及形态结构清晰程度区分无荧光为一，荧光微弱、形态结构不清为士，荧光较弱、形态结构尚清楚为，根据荧光明亮度和结构清晰度的增加依次为和十。般
15、以1 20血清稀释度时以上判为阳性。B2 酶联免疫吸附试验（ELISA)B2. 1 呵？容性抗原按！FAT方法收集食蟹猴疤原虫，或在体外培养的恶性疤原虫红细胞感染率为4%8%且以裂殖体为主时收集培养原虫，离心洗涤34次，吸取沉淀上层的褐色部分装入保存管内。如当时不制备抗原，可放液氮内保存。如立即制备则放入20冰箱反复冻融3次，每次lh，离心洗除lfll红蛋内，收集黑褐色沉淀部分，加10倍量的pH7.4的0.Olmol/L PBS，以150mA的电流强度冰浴超声3次，每次！min，间隔5min,I 0 OOOr /min离心30min，上清液即为可溶性抗原。为了测得此抗原的适宜1作稀释Ill，在
16、酶结合物的常用浓度及参考阳性、阴性血清l 100稀释的条件下，将抗原从I 50, I I 00共10个浓度稀释，包被塑料板进行检测选取参考阳性血清光密度（OD）值为. 0的抗原稀释度作抗原适宜浓度。并按常用量用细塑料管分装，需液氮保存。的2操作方法用pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液将抗原按工作浓度稀释包被聚苯乙烯板，每井2001d . :(E 4过夜。次日倾去抗jjj(、液，用pH7.4PBS/P吐温20(PBS/T）灌洗3l次，每次5mino加入PBS/ i GB 1 5 9 8 9 1 9 9 5 T按1 100稀释的待检血清，每一样本加2井，每井200L，于37C放置施。取出后
17、按前述方法用PBS/T洗涤3次，待干。加入以PBS/T稀释的过氧化物酶标记的抗人lgG结合物（一般为1 1000），每井200L，于37c放置2ho按前述方法洗涤3次后待干每井加入过氧化氢（H,0，）底物系统溶液邻苯二胶（）PD)!Omg+pH5. 0拧橡酸磷酸盐缓冲液25mL，用前加33%H,O,lOL，避光存放200L，于37 c放琶30mino每井再加入2mol/L硫酸50L终止反应。B2. 3反应标准用酶标专用比色计读取492nmOD值。取每一样本两孔的OD值的平均值。OD值测定前先以有1/5的2mol/L硫酸底物溶液校正零点。通常以OD值二泣。4为阳性阀值。为了便于比较和减少误差，每
18、板应设参考阳性、阴性血清及PBS/T空白对照，并测OD值。以式（Bl）对各个血样的OD值进行校正附溶液配制方法spH7. 2 0. 01 mol/L PBS KH,PO, Na,HPO, NaCl 蒸馆水加至pH 7. 4 PBS/T NaCl KH,PO, Na,HPC), 12H,O KCI 吐温20蒸馆水加至pH 9. 6碳酸盐缓冲液Na,CO, NaHCCJ, 蒸馆水加至pH 5. o拧橡酸磷酸盐缓冲液D校正值古草主旦旦百恒紊事雨夜奇古宿。.“”（Bl ) 0. 38g 1. 02g（或Na,HPO, 12H,O 2. 58日）8.0g 1 OOOmL 8.0g 0.2g 2. 9g
19、0. 2日0. 5mL 1 OOOmL l.59g 2. 93g 1 OOOmL a. 0. 2mol/L Na,HPO, 12H,O 35. 8g/500mL蒸馆水10. 5g/500mL蒸馆水b. O. lmol/L拧橡酸取a257mL+b243mL蒸馆水500mL混合。:l2 ii Cl 治疗对象GB 15989 1995 附录c重症病例治疗补充件）确诊病例出现昏迷、高热（40c），并有抽搞（24h内发生两次以上、严重贫血（血红蛋白50g/L或5g/dLl、尿闭、呼吸困难、低血压（儿童收缩压6.67kPa或50mmHg，成人收缩压9.33kPa或70mmHg）、低血糖（全血葡萄糖浓度运2
20、.2mmol/J，或40mg/dL）、血尿、黄瘟（血清胆红素浓度注51.3fmol/l，或3.Omg/dl，）、酸中毒C二氧化碳结合力运13mmol/L或30%(VIV门，其中一项或多项症状者。主要为恶性症原虫引起的脑型疤。C2抗症治疗选择以下1或2种针剂c2. 1 青尚琉醋纳成人每次60mg或1.2mg始，儿童可增至1.5mg/kg（每小瓶青篱唬醋60mg，用时加入5%碳酸氢纳注射液0.6mL，摇动至完全溶解），用5%葡萄糖液稀释至6mL缓慢静注首剂注射后，间隔4、24、48h各注射1次。c2. 2 咯茶院成人每次36mg/kg，儿童每次23mg烛，溶于5%或10%葡萄糖液250或500时，
21、内滴泣，成人滴速4060滴min，儿童酌减。Sh后可重复，连续给药23日。c2. 3 尚甲隧成人第1日80mgX2次或160mg分两侧臀肌l次注射，第25日各80mg，儿童每次1. 6mg/kg c2. 4 二盐酸奎宁酋剂20mg峙，溶于5%或10%葡萄糖液或葡萄糖生理盐水500mL于4h内缓慢滴注，间隔8h以lOmg/kg重复给药，24h内不超过3次。C3支持和辅助治疗C3. 1 输液成人每日输液1500 2 OOOmL，总量不宜超过3500mL0儿童每日输液4050ml,/kg，总量不宜超过70mL/kg。输液以5%或10%葡萄糖液为主，生理盐水应占l/5oC3. 2 补ft:维生素成人维
22、生素c2g日静注，维生素B,lOOmg日肌注。C4 对症治疗和并发症处理根据症状作以下处理：C4. 1 夫水估计出汗量，收集尿液，计算补液量。成人每日l500 2 OOOmL，儿童每日4050mL峙。尿多抒适当补御。曰：酸碱平衡失调以5%葡萄糖液将碳酸氢销稀释3倍，成人每次静注60mL,O.5lh后可重复；或5%葡萄糖液将乳酸销稀释5倍，成人每次100200mL静注。C4.3呼吸、心力衰竭呼吸衰竭者增加氧气吸入浓度，同时用可拉明、洛贝林交替注射。心力衰竭者成人用毒毛旋花F吠K每次0.25mg,5%葡萄糖液2040ml，稀释后缓慢静注，或西地兰0.4 0. 8mg, 稀释后缓慢静注。C4. 4
23、肾功能衰竭早期使用甘露醇，严格限制输液量必要时可用腹膜透析。C4. 5肺水肿取半卧位，速增氧气吸入浓度，氨茶碱肌注或宵5%葡萄糖液内滴注，成人每次0.25 0. 5艇，或精注速尿等利尿剂。C4. 6脑水肿成人每次山梨醇或甘露醇100200ml，于20min内静注，必要时隔68h重复。:l7 GB 1 5 9 8 9 1 9 9 5 C4. 7低血压去甲肾上腺素lmg加5%葡萄糖液滴注，或使用其他升压药。C4. 8 循环衰竭6%低分子右旋糖所滴注，成人每次500mL，儿童每次1015mL/kg，有出血倾向者慎用。C4. 9 溶血黑尿热多见于缺乏葡萄糖6，磷酸脱氢酶（G6 P凹的特异体质者。应即停
24、服伯氨喳、奎宁和枫类药物。用肾上腺皮质激素可迅速缓解，必要时输血。C4. 10重度贫血红细胞数在200万mm以下者，应立即输血。C4. 11 低血糖如滴注5%或10%葡萄糖液仍不能缓解，可静注50%葡萄糖（1.Omg/kg），但不宜经常使用。C4. 12 抽搞氯丙嚓或异丙嚓每次13mg/kg肌注，亦可用安定0.2mg/kg缓慢曹雪注。C4. 13细菌感染用抗生素防止感染。附录D正确使用标准的说明（参考件D1 寄生虫学诊断应检查厚血膜，以减少遗漏。D2 凡血涂片查见疤原虫的确诊病例，不论是现症病例还是带虫者均按本标准进行治疗。D3 除重症和呕吐、严重腹泻病例外，其他病例尽可能采用抗症药口服治疗。附加说明本标准由中华人民共和国丑生部提出。本标准由中国预防医学科学院寄生虫病研究所负责起草。本标准主要起草人钱会霖、张家坝、王捷本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。:JcK
