1、GB/T 14553-2003 前画本标准是对GB/T14553-1993(粮食和果质量有机磷农药的测定气相色谱法进行下述内容的修订:原标准中2.3制备色谱柱时使用的试剂和材料和3.6色谱柱及5.2.3校准数据表示的内容全部删去;在第5章色谱测定操作步骤中增加了测定条件B.采用氮磷检测器和毛细管柱测定条件及图谱;把6.2.2精密度、6.2.3准确度和6.2.4检测限的数据表格全部放到附录A中，原精密度用标准偏差表示改为采用相对标准偏差表示。本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准的起草单位:农业部环境保护科研监测所。本标准的主要起草人z黄土忠、刘潇威、黄永春、
2、王继军、买光熙、徐应明、李治祥、张克强。1 范围粮食、水果和蔬菜中有机磷农药测定的气相色谱法GB/T 14553-2003 本标准规定了粮食(大米、小麦、玉米)、水果(苹果、梨、桃等人蔬菜(黄瓜、大白菜、西红柿等)中速灭磷(mevinphosl、甲拌磷(phoratel、二嚓磷(diazinonl、异稻瘟净。probenfosl、甲基对硫磷(parathion-methy!)、杀螺硫磷(feni trothio川、澳硫磷(bromophos)、水胶硫磷(isocarbophos)、稻丰散(phent hoatel杀扑磷(methidathion)等多组分残留量的测定。本标准适用于粮食、水果、蔬
3、菜等作物中有机磷农药的残留量的测定.2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使这些文件的最新版本。凡是不注目期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5009.20-1996 食品中有机磷农药残留量的测定方法GB/T 17331-1998 食品中有机磷和氨基甲酸醋类农药多种残留量的测定NY/T 398 农、畜、水产品污染监测技术规范3 原理样品中有机磷农药残留量用有机溶剂提取，再经液液分配和凝结净化等步骤除去干扰物，用气相色谱氮磷检
4、测器(NPDl或火焰光度检测器(FPDl检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。4 试剂与材料4.1 载气和辅助气体4. 1. 1 载气=氮气，纯度:;99.99%。4. 1. 2 燃气z氢气。4. 1. 3 助燃气空气。4.2 配制标准样晶和武样分析的试剂和材料所使用的试剂除另有规定外均系分析纯。4.2.1 农药标准品速灭磷等有机磷农药，纯度为95.0%99. 0%。4.2.2.1 农药标准溶液的制备准确称取一定量的农药标准样品(准确到士0.0001 gl，用丙酣为溶剂，分别配制浓度为0.5mg/mL的速灭磷、甲拌磷、二嚎磷、水胶硫磷、甲基对硫磷、稻丰散g浓度为0.7 mg/mL杀镇硫磷
5、、异稻瘟净、澳硫磷、杀扑磷储备攘，在冰箱中存放。4.2.2.2 农药标准中间溶液的配制2用移液管准确量取一定量的上述10种储备液于50mL容量瓶中用丙翻定容至刻度，则配制成浓度为50问/mL的速灭磷、甲拌磷、二嗦磷、水胶硫磷、甲基对硫磷、稻丰散和100g/mL的杀膜硫磷、异稻瘟净、澳硫磷、杀扑磷标准中间溶液。4.2. 1. 3 农药标准工作溶液的自己制2分别用移液管吸取上述标准中间溶液每种10mL于100mL容量瓶中，用丙固定容至刻度，得混合标准工作溶液。标准工作溶液在冰箱中存放。4.2.2 二氯甲:皖(CH2Cl，):重蒸。GB/T 14553-2003 4.2.3 丙酣CCH，COCH3)
6、:重蒸。4.2.4 石油隧:60C90C沸程，重蒸。4.2.5 乙酸乙酶CCH，COOC2H3)，4.2.6 磷酸(H3PO，):85%。4.2.7 氯化钱CNH，Cl)。4.2.8 氯化销(NaCl)。4.2.9 元水硫酸纳(Na，SO，):在300C下烘4h后放入干燥器备用。4.2.10 助滤剂:Celite545 , 4.2.11 凝结液:20g氯化钱和85%磷酸40mL，溶于400mL蒸馆水中，用蒸馆水定容至2000 mL, 备用。5 仪器5.1 旋转蒸发仪。5.2 振荡器。5.3 万能粉碎机。5.4 组织捣碎机。5.5 真空泵。5.6 水浴锅。5. 7 气相色谱仪(带NPD检测器或F
7、PD检测器)。6 样晶6.1 样品性状6. 1. 1 样品种类z粮食、水果和蔬菜。6. 1. 2 样品状态:固体。6. 1. 3 样品的稳定性在各种样品中的有机磷农药不稳定，易分解。6.2 样品的采集与贮存方法6.2.1 样晶的采集按NY/T398采集。6.2. 1. 1 粮食z采取500g具代表性的(小麦、稻米、王米等)样品粉碎过40目筛，混匀备用(装入样品瓶中，另取20.0g测定含水量)。6.2. 1. 2 水果、蔬菜取具代表性的新鲜水果和蔬菜的可食部位1000g，切碎，装入塑料袋，供试验用。6.2.2 样品的保存粮食、水果和蔬菜样=在18C冷冻箱中保存。7 分析步骤7.1 提取及净化7.
8、 1. 1 水果、蔬菜样品的提取及A法净化准确称取水果、蔬菜样品50g(准确到士0.1g)于组织捣碎缸中，加水，使加入的水量与50g样品中的水分含量之和为50mL，再加100mL丙隅，捣碎2rnin，浆液经铺有两层滤纸及一薄层助滤剂的布式漏斗减压抽滤，取100mL滤液(相当于三分之二样品倒入500mL分液漏斗中，加入用c(KOH)=0.5 mol汀，的氢氧化御(KOm滚液调pH值为4.55. 0的凝结液10mL15 mL和1g助滤剂，振摇20次，静置3min，过滤入另一500mL分液漏斗，按上述步骤再处理2次3次。在滤液中加3g氯化锅，用50rnL、50rnL、30mL二氯甲:皖萃取三次，合并
9、有机相，过一装有1g无水硫酸销和1g助滤剂的GB/T 14553-2003 筒行漏斗干燥，收集于250mL平底烧瓶中，加入0.5mL乙酸乙酶，先用旋转蒸发器浓缩至5mL.在室温下用氮气或空气吹至近干，用丙翻定容5mL.供气相色谱测定。7. 1. 2 B法净化遵照GB/T5009.20一1996中6.2的净化步骤进行。7.1.3 C法净化遵照GB/T17331-1998中6.2的净化步骤进行。7. 1. 4 粮食样的提取及净化准确称取己测含水量粮食样20g(准确到土0.1g).置于300mL具塞锥形瓶中，加水，使加入的水量与20g样品中水分含量之和为20mL.摇匀后静置10mio，加100mL含
10、20%水分的丙酬，浸泡6h 8h后振荡1h.下述步骤除取滤浓80mL外，其余同7.1.1。7.2 气徊色谱测定7.2.1 测定条件A7.2. 1. 1柱a) 玻璃柱1.0mX2 mm(i.d).填充涂有5%OV-17的ChromQ.80目100目的担体。b) 玻璃柱1.0 mX2 mm(i. d).填充涂有5%OV-I01的ChromsorbW-HP.I00目120目的担体。7.2. 1. 2 温度z桂箱200C.汽化室230C.检测器250C。7.2. 1. 3 气体流速E氮气(N，)36mL/min40 mL/min;氢气(H，间.5 mL/min6 mL/min;空气60 mL/min8
11、0 mL/min. 7.2. 1. 4 检测器氮磷检测器(NPO).7.2.2 测定条件B7.2.2.1 桂:有英弹性毛细管柱HP-5.30mXO. 32(i. d)。7.2.2.2 温度z柱温采用程序升温方式。恒温3min;5C/mm 恒温65min 130C .- - -.- -, -140C一一一一一一-140C.进样口Z20C.检定器(NPD)300C。7.2.2.3 气体流速z氮气3.5mL/min;氢气3mL/min;空气60mL/min;尾吹(氮气)10mL/min. 7.2.3 测定条件C7.2.3.1 柱:石英弹性毛细管柱DB-17.30mXO. 53(i. d)。7.2.3
12、.2 温度z恒温3min 8C/mm 恒温10min 150C ,-_ 250C一一一一一一Z50C.进样口Z20C.检定器(FPD)300C。7.2.3.3 气体流速z氮气9.8mL/min;氢气75mL/min;空气100mL/min;尾吹(氮气)10mL/min. 7.2.4 色谱中使用标准样晶的条件标准样品的进样体积与试样进样体积相同，标准样品的响应值接近试样的响应值。当一个标样连续注射两次，其峰高(或峰面积)相对偏差不大于7%.即认为仪器处于稳定状态。在实际测定时标准样品与试样成交叉进样分析。7.2.5 进样试验7.2.5.1 进样方式z注射器进样。7.2.5.2 进样量，JL4L，
13、7.2.3 色谱图考察7.2.3.1 色谱图图I采用填充柱a和NPD检测器;图2采用毛细管柱和NPD检测器g图3采用毛细管柱和FPD检测器。GB/T 14553-2003 10 1一一速灭磷;2 甲拌磷63 二嚓磷s4一一异稻瘟净g5 甲基对硫磷26 杀蟆硫磷$7一一水股硫磷$8 澳硫磷39 稻丰散510 杀扑磷。图1采用填充柱a和NPD检测器pA -m 10 msE Qd 99 50 8.75 8.5 8.25 l 速灭磷32 甲拌磷，3 二嚓磷;4 异稻瘟净$5 甲基对硫磷$6 杀螺硫磷37 水胶硫磷38 澳硫磷s9一稻丰散510 杀扑磷。图2采用毛细管柱和NPD检测器GB/T 14553
14、-2003 150 pA 1 500 dTL凹3 000 2 500 2 000 1 000 500 0 0 1 速灭磷$2 甲拌磷$3 二嚓磷，4 异稻瘟净$5 甲基对硫磷$6一-一杀螺硫磷s7一一水股硫磷$8 澳硫磷59 稻丰散g10 单扑磷。10 图3采用毛细管柱和FPD检测器7.2.3.2 定性分析7.2.3.2.1 组分出峰次序:速灭磷、甲拌磷、二嚓磷、异稻瘟净、甲基对硫磷、关旗硫磷、水胶硫磷、澳硫磷、稻丰散、杀扑磷。7.2.3.2.2 检验可能存在的干扰g用5%OV-17的ChromQ.80目100目色谱柱测定后，再用5%OV-I0l的ChromsorbW-HP.I00目120目色
15、谱柱在相同条件下进行确证检验色谱分析，可确定各有机磷农药的组分及杂质干扰状况。7.2.3.3 定量分析7.2.3.3.1 色谱峰的测量吸收1L混合标准溶液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积)。再吸取1L试样，注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积).根据色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积)采用外标法定性和定量。7.2.3.3.2 计算x = C. _; H , (5.) X V -V , X H(5,) Xm 式中gX一一样本中农药残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)，C.一一标准溶液中z组分农药浓度，单位为微克每毫升(Ig/时.)，V. 标准溶液进样体积，单位
16、为微升(L)，V一一样本溶液最终定容体积，单位为毫升(mL)，V , 样本溶液进样体积，单位为微升(L);H，(5，)一一-标准溶液中z组分农药的峰高(mm或峰面积mm2);H，(5，)一一一样本溶液中z组分农药的峰高(mm或峰面积mm2);m一-称样质量，单位为克(g).(这里只用提取液的2/3.应乘2/3)。GB/T 14553-2003 S 结果的表示8.1 定性结果根据标准样品色谱图中各组分的保留时间来确定被测试样中各有机磷农药的组分名称e8.2 定量结果8.2.1 含量表示方法根据计算出的各组分的含量，结果以mg/kg表示。8.2.2 精密度变异系数c%), 2. 50%12. 24
17、%。参见表A.l、表A.2、表A.3，8.2.3 准确度加标回收率c%), 86. 4%96. 9%。参见表A.4。8.2.4 捡到限最小检出浓度，O.17XlO-mg/kgO.85XlO-2 mg/kg，参见表A.5，GB/T 14553-2003 附录A(资料性附录)方法的精密度、准确度和检测限A.1 方法精密度见表人1、表A.2和表A.3，表A.1方法精密度(稻米样)农药名称添加浓度I(mg/kg)变异系数CV/(%)允许差1(%)室内室闽室内窒间0.280 0 5.42 5.72 20.92 11. 7 速灭磷0.028 0 5.08 7.03 19.6 20.7 0.005 6 4.
18、00 4.00 15.4 6.9 0.460 0 4.90 6.69 18.9 19.5 甲拌磷0.046 0 4.95 9.58 19.1 13.6 0.009 2 3.57 5.95 13.8 19.3 0.460 0 4.74 6.10 18.3 16.9 二嗦磷O. 046 0 4.28 4.28 16.5 7.4 0.009 2 4.76 7.14 18.4 22.1 0.625 0 4.88 5.20 10.0 10.9 异稻瘟净0.062 5 3.92 4.95 15.1 13.5 0.012 5 2.50 7.50 9.6 27.6 0.7100 4. 9t 5.51 19.0
19、 13.2 甲基对硫磷。0710 4.82 6.32 18.6 17.8 0.014 2 4.51 7.52 17.4 24.5 0.830 0 弘756.07 18.3 16.7 杀蟆硫磷0.083 0 6.66 7.83 25.7 19.6 0.016 6 4.54 7.79 17.5 25.7 1.0000 4.11 6.34 15.8 19.9 澳硫磷0.1000 5.72 12.24 22.1 82.9 0.020 0 4.40 6.59 17.0 20.4 l. 430 0 5.36 7.04 20.7 19.9 水胶硫磷0.1430 3.56 6.08 13.7 20.0 0.0
20、28 6 4.83 7.06 18.6 21. 6 1. 4300 5.09 5.81 19.6 13.9 稻丰散0.1430 2.82 5.11 18.9 17.2 0.028 6 5.64 7.89 21. 8 23.4 2.860 0 3.76 4.58 14.5 12.0 杀扑磷0.286 0 4.99 5.66 21. 8 13.4 。0572 4.75 7.03 18.3 21. 6 注:协作实验室为5个g每个实验室对每个添加浓度做重复5次试验。GB/T 14553-2003 表A.2方法精密度(苹果样)变异系数CV/(%)允许差/(%)农药名称添加浓度/(mg/kg)室内室间室内
21、室间0.1120 3.89 3.89 15.00 6.71 速灭磷0.011 2 2.80 3.74 10.82 10.70 0.002 2 5.00 10.00 19.30 34.50 0.1840 2.75 6.47 10.60 23.13 甲拌磷。伞。1844.29 6.75 16.58 2 1. 44 。.0037 5.88 8.82 22.71 27.34 0.1840 4.38 6.30 16.91 19.06 二嚓磷0.0184 4.88 6.09 18.83 16.48 0.003 7 2.94 5.88 11. 35 20.31 0.252 0 4.59 4.85 17.74
22、 9.88 异稻瘟净0.025 2 4.60 5.02 17.76 11. 07 0.005 2 4.00 6.00 15.44 18.59 0.284 0 5.41 6.12 20.07 14.55 甲基对硫磷0.0284 11. 85 11. 11 17.16 12.87 0.005 6 3.85 7.69 14.85 26.56 0.332 0 4.12 5.22 15.89 14.28 杀螺硫磷0.033 2 4.22 6.82 16.29 21. 92 0.006 6 5.00 5.00 19.30 8.63 0.400 0 5.98 5.90 23.10 9.59 澳硫磷0.040
23、 0 3.40 13.03 13.12 48.48 0.008 0 4.05 6.76 15.65 22.01 0.572 0 4.82 6.93 18.59 20.97 *胶硫磷0.057 2 3.96 6.42 15.29 20.64 0.011 4 5.83 6.80 22.48 16.84 0.572 0 3.93 4.14 15.18 8.46 稻丰散0.057 2 2.49 4.60 9.61 11. 11 0.011 4 5.66 7.55 21. 58 21. 60 1. 144 0 4.07 4.62 15.71 11. 072 杀扑磷O. 114 4 2.84 5.39 1
24、0.96 18.36 0.022 8 6.34 7.32 24.48 17.86 注协作实验室为5个，每个实验室对每个添加浓度做重复5次试验。GB/T 14553-2003 表A.3方法精密度黄瓜样)变异系数cv(%)允许差1(%)农药名称添加浓度/(mg/kg)室内室间室内室间O. 112 0 5.00 5.66 19.30 13.99 速灭磷0.011 Z 4.85 6.80 18.74 20.18 0.002 2 5.00 5.00 19.30 13.39 0.1840 3.58 5.15 13.80 15.59 甲拌磷0.0184 3.77 5.03 14.57 14.40 0.003
25、 7 3.03 6.06 11. 70 20.92 0.1840 5.78 6.53 22.29 15.44 二嚓磷0.0184 4.22 5.42 16.28 15.03 0.003 7 3.03 6.06 11. 70 20.92 0.252 0 3.89 4.63 15.03 11. 81 异稻瘟净0.025 2 3.76 4.60 14.54 12.11 0.005 2 4.08 6.12 15.76 0.284 0 4.08 4.50 15.73 10.83 甲基对硫磷0.028 4 4.67 6.61 18.02 0.005 6 4.08 8.16 15.76 0.332 0 4.
26、45 6.43 22.40 杀螺硫磷0.033 2 4.04 7.74 15.60 26.44 。00663.33 6.67 12.27 23.02 0.400 0 4.92 5.98 18.99 21. 00 澳硫磷0.040 0 3.00 6.83 11. 60 24.24 0.008 0 5.41 8.1 20.66 25.12 0.572 0 4.37 5.77 16.86 16.37 水胶硫磷0.057 2 4.41 5.37 17.04 14.08 0.011 4 3.77 6.60 14.57 2 1. 91 0.572 0 4.44 6.26 17.13 18.70 稻丰散0.
27、057 2 4.46 7.17 17.21 13.01 0.011 4 4.00 6.00 15.00 18.5D 1. 144 0 3.79 5.79 14.61 18. 15 杀扑磷O. 114 4 3.55 6.26 13.70 20.81 0.022 8 4.13 7.34 15.93 24.48 注.协作实验室为5个g每个实验室对每个添加浓度做重复5次试验。GB/T 14553-2003 A.2 方法准确度见表A.4o表A.4方法准确度准确度(力目标回收率)/(%)农药名称添加浓度/(mg/kg)稻米样苹果样黄瓜样0.280 0 95.5 94.2 94.6 速灭磷。028091.
28、4 95.5 92.0 0.005 6 88.9 90.9 90.9 0.460 0 91. 3 89.0 89.4 甲拌磷0.046 0 92.3 88.6 86.4 0.009 2 91. 3 91. 9 89.2 0.460 0 93.0 90.5 93.2 二嗦磷。.046091. 4 89.1 90.2 0.009 2 91. 1 91. 9 89.2 0.625 0 94.8 95.0 96.8 异稻瘟净0.062 5 93.8 94.8 94.8 0.012 5 95.1 96.2 94.2 0.7100 96.3 93.1 94.2 甲基对硫磷0.071 0 93.6 95.1
29、 90.5 0.0142 93.5 92.6 87.5 0.830 0 93.9 92.9 93.4 杀螺硫磷0.083 0 92.4 92.8 89.5 0.016 6 93.9 90.9 90.9 1. 0000 90.7 91. 5 92.0 澳硫磷0.1000 87.4 88.3 91. 5 0.020 0 91. 0 92.5 92.5 1. 4300 93.7 92.6 92.5 水胶硫磷。143094.3 92.7 91. 1 0.028 6 94.3 90.4 90.4 1. 4300 91. 8 90.3 91. 0 稻丰散0.143 0 91. 6 91. 3 90.2 0
30、.028 6 93.0 93.0 87.7 2.860 0 96.9 93.5 95.4 杀扑磷O. 286 0 93.8 92.4 93.6 0.057 2 91. 9 89.9 95.6 注协作实验室为5个，每个实验室对每个添加浓度做重复5次试验。10 GBjT 14553-2003 A.3 方法的最小检测量和最小检测浓度见表A.5，方法最小检测浓度见式(A.1)。表A.5方法检测限最小检测浓度(Cmg(kg)农药名称最小检测量(g水果、蔬菜粮食速灭磷3.446 1 X 10- 0.172 3X10- 0.430 8 X 10- 甲拌磷3.873 6 X 10- O. 193 7 X 10
31、- 0.484 3X 10- 二嚓磷5.6615XIO-12 0.283 1 X 10- 。7078X 10- 异稻瘟净1. 008 0 x 10-11 0.504 2 X 10- 。1260 X 10- 甲基对硫磷7.5733X lO-12 0.378 7 X 10- 。9468 X 10- 杀旗硫磷9.4857XI0-12 0.4743X lO- 1. 185 8X 10- 澳硫磷1. 142 8X 10- 0.571 1 X 10- O. 142 8 X 10- 水胶硫磷2.288 0 X 10-u O. 114 4 X 10- 0.286 0 X 10- 稻丰散1. 760 OX lO-u 0.380 2X 10- 0.220 OX 10- 杀扑磷1. 694 8X 1O-u 0.8470X10- O. 211 8 X 10- 方法最小检测浓度=最小检测量(g)X样本溶液定容体积(mL.甸(A.l)样品溶液进样体积(LJx样品质量(g)
