1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926. 17- 2001 前占一一口本标准是对GB/T14926.17-1994(实验动物绿版杆菌检测方法的修订。本标准增加了6.3.5半固体动力试验和6.3.642C生长试验和5检验程序。因血清型鉴别试剂难得，且血清型鉴别只是必要时才采用，故删除原标准5.6血清学试验。氧化酶试验阳性是假单胞菌属的重要生化指标，且假单胞菌属中，产生绿色色素是绿服杆菌的特征。因此，在NAC液体培养中，当有绿色色素和菌膜产生时，通过革兰染色、氧化酶试验可直接判定结果。本标准由中华人
3、民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会负责起草。本标准主要起草人:黄韧。本标准于1994年1月首次发布。62 1 范围中华人民共和国国家标准实验动物绿服杆菌检测方法Laboratory animal- Method for examination of Pseudomonas aeruginos 本标准规定了实验动物绿脐杆菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔绿服杆菌的检测。2 引用标准GB/ T 14926. 17- 2001 代替GB/T14926. 17- 1994 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本
4、均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.42- 2001 实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 14926. 43-2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理绿腋杆菌是革兰阴性杆菌，具有产生绿色色素和氧化酶等生化试验特征，因此，可利用选择性培养基培养、菌体检验和生化试验进行鉴定。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4.2 生物显微镜。5 培养基和试剂5.1 NAC液体培养基。5.2 NAC琼脂平皿。5. 3 普通营养琼脂平皿。5.4 糖发酵培养基。5.5 西蒙氏拧攘酸盐培养基。5. 6 尿素培养基。5. 7
5、 营养明胶。5. 8 氧化酶试剂。5. 9 硝酸盐培养基。中华人民共和国国家质量监督检验检症总局2001-08 -29批准2002- 05 -01实施63 GB/T 14926. 17- 2001 室温下放置至72h有绿色色素和菌膜产生检测程序6 6o生长试验氧化酶试验半固体动力试验生化试验革兰染色镜检氧化酶试验革兰染色镜检告报操作步骤7.1 采样采取回盲部内容物、粪便或病灶组织、分泌物。7.2 分离培养将已接种的NAC液体培养基置(36士l)C培养1824h后观察生长情况，对未产生绿色色素者转种NAC琼脂平皿，(36士l)C培养1824h。7- 3 鉴定7- 3. 1 生长特性及菌落特征绿脏
6、杆菌在NAC液体培养基中均匀混浊生长、有菌膜、大部分菌株可在培养液上半部形成绿色色素;在NAC琼脂平皿上形成扁平，边缘不齐呈锯齿状，23mm的菌落，大部分菌落可产生绿色色素而致使培养基呈绿色，部分菌株需延长培养时间方可产生色素。64 7 G/ T 14926.17- 2001 7. 3.2 菌体特征革兰阴性杆菌，菌体长短不一。7. 3. 3 氧化酶试验阳性被检菌为革兰阴性杆菌，氧化酶阳性及产生绿色色素，可报告检出绿腋杆菌。7. 3. 4 生化试验对不产生绿色色素的菌应做如下鉴定，见表10表l绿服杆菌的主要生化特性葡萄糖麦芽糖木椅乳糖R军糖+ 十+:阳性一:阴性+/-:多数菌株阳性7.3. 5
7、半固体动力试验阳性。7.3. 6 42C生长试验阳性。8 结果报告拘橡酸盐尿素明胶液化院基质+ +/一+ 凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。硫化氢硝酸盐还原产气+ 65 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
