1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布G/T 14926. 3- 2001 前本标准是对GB/T14926.3-1994实验动物假结核耶氏菌检验方法和GB/T14926.7- 1994 实验动物小肠结肠炎耶氏菌的修订。本标准删除了原标准GB/T14926.3-1994中3.1磷酸盐-胆盐-鼠李糖蛋白陈增菌液，3.3DHL 琼脂，3.4麦康凯琼脂和GB/T14926.7-1994中3.1SS琼脂，3.2DHL琼脂，3.40. 5% NaCl溶液、0.5% KOH溶液(NK)，3.9苯丙氨酸培养基的有关内容。增加了几种培
3、养基以及耶尔森菌属的鉴别特征等相关内容。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:范薇。本标准于1994年1月首次发布。9 中华人民共和国国家标准实验动物耶尔森菌检测方法Laboratory animal- Method for examination of Yersinia sp. 1 范围本标准规定了实验动物耶尔森菌的检测方法。GB/ T 14926.3- 2001 代替GB/T14926.3一一1994GB/ T 14926. 7一1994本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌的检测。2 引用
4、标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.42-2001实验动物细菌学检测标本来集GB/T 14926.43-2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理耶尔森菌在培养基上有特定的生长、形态和生理生化特征:菌体抗原与相应抗体结合，产生凝集反应。4 主要设备和材料4.1 25C恒温培养箱。4.2 37C普通恒温培养箱。4. 3 生物显微镜。5 培养基及试剂5. 1 改良磷酸盐缓冲液CPBS)。5. 2 Cary-Blair运送培养基。
5、5. 3 CIN-I琼脂。5. 4 改良Y琼脂。5. 5 克氏双糖铁CKD琼脂。5. 6 糖发酵培养基。5. 7 氨基酸脱梭酶培养基。5.8 尿素琼脂。5.9 半固体琼脂。5.10 耶氏菌多价诊断血清。中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局2001-08-29批准10 2002 - 05 -01实施GB!T 14926. 3- 2001 48 h 本标检测程序6 挑选可疑菌落35个接种克氏双糖24 48 h 25C 斜面产酸或不产酸，底层产酸不产气血清玻片凝集试验自AU生化试验染色镜检半固体动力试验操作步骤7. 1 采样采取回盲部内容物、粪便或脏拭子。7.2 分离培养7.2.1 直接分离培养将
6、已接种的CIN-l琼脂、改良Y琼脂置250C培养48h。7.2.2 增菌分离培养将己接种的改良磷酸盐缓冲液置4.C培养三周，每周转种CIN-I琼脂和改良Y琼脂平皿一次，共三次，平皿置25C培养48h。7.3 鉴定7. 3- 1 菌落特征本菌在CIN-I琼脂、改良Y琼脂上形成边缘半透明或透明，中心呈深红色，表面湿润凸起的牛眼11 7 G/ T 14926.3- 2001 状菌落。7. 3. 2 菌体特征耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，(0.86. 0)mXO.8m大小。7.3.3 本菌接种于克氏双糖铁琼脂，25C培养48h，斜面产酸或不产酸，底层产酸，硫化氢阴性。7.3.4 将本菌接种两支半固体，其中
7、一支放250C，另外一支放37C培养2448h后观察结果，25C培养动力阳性，37C动力阴性。7.3.5 生化试验所有的生化反应均在25-C培养。本菌的主要生化特性以及与其他菌的鉴别见表1。表1耶尔森菌属的鉴别特性项自鼠疫耶尔森菌假结核耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌运动性(25C) 十十赖氨酸脱竣酶鸟氨酸脱竣酶十尿素+ + 一木糖昔酶十十西蒙氏拧橡酸盐(25C)院基质产生d 鼠李糖十llf.糖+ 纤维二糖十密二糖d + 山梨糖十山梨E事十棉子糖d +:阳性j-:阴性;d:不定;7. 3. 6 血清玻片凝集试验阳性。8 结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。12 FCO
8、N-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
