1、I65.020.30 B 44 道童3中华人民共和国国家标准GB/ T 14926.18 14926. 32- 2001 GB/ T 14926. 5614926. 64- 2001 实验动物微生物学检测方法(4)Laboratory animal- Microbiological examination methods 2001- 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局GB/ T 14926. 31- 2001 前本标准是对GB/T14926.31-1994实验动物大鼠细小病毒(KRV和H-1株)检验方法的修订。增加了检测抗体的酶联免疫吸附试
2、验。40 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:贺争鸣。本标准于1994年1月首次发布。中华人民共和国国家标准实验动物大鼠细小病毒(KRV和H-1株)检测方法1 范围Laboratory animal- Method for examination of rat parvovirus (KRV and H-1 strain) 本标准规定了大鼠细小病毒(KRV和H-1株)的检测方法、试剂等。本标准适用于大鼠细小病毒(KRV和H-1株)的检测。2 引用标准GB / T 14926. 31一2001代替GB/T14926. 31- 1994
3、下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/ T 14926. 51- 2001 实验动物免疫酶试验GB/ T 14926. 52- 2001 实验动物免疫荧光试验GB/ T 14926.54-2001 实验动物血凝抑制试验3 原理根据免疫学原理，采用大鼠细小病毒(KRV和H-1株)抗原检测大鼠血清中细小病毒(KRV和H-l株抗体;或根据大鼠细小病毒(KRV和H-l株)在一定的条件下，能凝集豚鼠红细胞，这种
4、凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测大鼠血清中细小病毒(KRV和H-l株)抗体。4 主要试剂和器材4.1 试剂4. 1. 1 ELISA抗原4. 1. 1. 1 特异性抗原用大鼠细小病毒(KRV和H-1株)感染大鼠胚细胞，培养712d，当病变达十+时，收获培养物。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4. ,. ,. 2 正常抗原大鼠胚细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。4. ,. 2 血凝素大鼠细小病毒(KRV和H-l株)分别接种大鼠胚细胞，培养712d，当病变达+时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细
5、胞碎片，上清液分装后低温保存。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08 -29批准2002 - 05 -01实施41 GB/T 14926. 31-2001 4. .3 抗原片大鼠细小病毒(KRV和H-1株感染大鼠胚细胞，接种后712d，病变达+时用膜酶悄化分散，PBS洗涤，涂片。室温干燥后，冷丙酣固定10min，一20C保存。4. .4 阳性血清大鼠细小病毒(KRV和H-1株抗原免疫SPF大鼠所获得的抗血清。4. 1. 5 阴性血清无大鼠细小病毒感染的SPF大鼠血清。4. ,. 6 酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗大鼠IgG抗体。4. ,. 7 异硫氨酸荧光素标记羊或兔抗大鼠I
6、gG抗体。4. 1. 8 豚鼠红细胞。4. 2 器材4. 2.1 酶标仪。4. 2. 2 荧光显微镜。4. 2. 3 普通显微镜。4. 2. 4 3TC培养箱或水洛箱。5 检测方法5. 1 采用ELISA方法(见GB/T14926.50-2001)进行血清学检测。5.2 采用IFA方法(见GB/T14926. 52一2001)进行血清学检测。5. 3 采用lEA方法(见GB/T14926.51-2001)进行血清学检测。5.4 采用HAl方法(见GB/T14926.54-2001)进行血清学检测。6 结果判定对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为阳性则判为阳性。7 结果报告根据
7、判定结果，作出报告。42 CON-3.N叮lg.Nm叮CON-s.N叮Fj.N叮H阁。H国。华人民共国家标准实验动物微生物学检测方法(4)GB/ T 14926. 18- 14926. 3-2001 GBj T 14926.56- 14926.64- 2001 国和中 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰印张4字数102千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/ 16 2002年2月第一版印数1-2000定价35.00元* 书号:155066 .1-18099 网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533* 595- 548 科目 GB/ T 14926.18-2001
