1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布G/ T 14926. 5- 2001 前本标准是对GB/T14926.5-1994(实验动物多杀巴氏杆菌检验方法的修订。本标准增加了乙酸铅纸条法检测硫化氢的产生、血清玻片凝集试验及多杀巴斯德杆菌、嗜肺巴斯德杆菌及支气管鲍特菌的鉴别表，删除了实用性不大的巴氏杆菌属的菌种生化鉴别表。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李红。本标准于1994年1月首次发布。17 中华人民共和国国家标准实验动物多杀巴斯德杆菌检测方法1 范围L
3、aboratory animal-Method for examination of Pasteurella multocida 本标准规定了实验动物多杀巴斯德杆菌的检测方法。本标准适用于豚鼠、地鼠和兔多杀巴斯德杆菌的检测。2 引用标准GB/ T 14926. 5-2001 代替GB/T14926. 5-19 94 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 14926.43二2001实验动物细菌学
4、检测染色法、培养基和试剂3 原理多杀巴斯德杆菌为革兰阴性小杆菌，寄居于豚鼠、地鼠和家兔的上呼吸道，具有特定的生化反应，其菌体可与相应的免疫血清在玻片上产生肉眼可见的凝集反应，据此可对该菌进行分离培养和检测。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4.2 生物显微镜。5 培养基和试剂5.1 血琼脂平皿。5.2 双糖铁或三糖铁琼脂。5. 3 糖发酵培养基。5.4 半固体琼脂。5. 5 DHL琼脂平皿。5. 6 尿素培养基。5. 7 蛋白陈水、肯定基质试剂。5. 8 硝酸盐培养基。5. 9 西蒙氏拘橄酸盐培养基。5.10 营养明胶。5. 11 氨基酸脱竣酶试验培养基。5.12 氧化酶试剂。中华人
5、民共和国国家质量监督检验检疫总局2001一08-29批准18 2002 - 05-01实施GBj T 14926. 5- 2001 5.13 5. 14 过氧化氢酶试剂。多杀巴斯德杆菌诊断血清。检测程序6 (36士1)(;玻片凝集试验各种酶反应生化反应UZH、琼脂平皿生长情况双糖铁琼脂培养基19 操作步骤7. 1 采样采取呼吸道分泌物或病灶分泌物。7.2 分离培养将已接种的血琼脂平皿置(36士l)C培养2448h。7. 3 鉴定7.3. 1 菌落特征多杀巴斯德杆菌在血琼脂平皿上形成mm左右、光滑露滴样或灰白色、不溶血的菌落。7. 3. 2 菌体特征7 . GB/ T 14926. 5-2001
6、 革兰阴性小杆菌，两端钝圆并浓染，新分离菌株可有英膜，经人工培养后很快消失。7. 3. 3 三糖铁或双糖铁培养基(36士l)C培养1824h，斜面及底层产酸不产气，乙酸铅纸条法显示硫化氢阳性。7. 3.4 生化反应葡萄糖、乳糖和麦芽糖阳性。尿素酶、鸟氨酸脱援酶阳性，赖氨酸脱搂酶阴性。硝酸盐还原试验阳性、前基质试验阳性。? 3. 5 西蒙氏拧穰酸盐试验阴性。氧化酶、过氧化氢酶阳性。不液化明胶。? 3. 6 纯培养物转种DHL培养基，(36土l)C普通恒温培养箱培养2448h不生长;半固体培养基动力观察阴性。7. 3. 7 多杀巴斯德杆菌、嗜肺巴斯德杆菌及支气管鲍特杆菌的鉴别见表1。表1多杀巴斯德
7、杆菌、嗜肺巴斯德杆菌及支气管鲍特杆菌的鉴别表支气管鲍特杆菌多杀巴斯德杆菌嗜肺巴斯德杆菌DHL琼脂生长+ 血平皿溶血+ 一/+动力+ 葡萄糖十+ 糖、+ 十能基质+ 十/一尿素+ 十硫化氢(H2S)+ + +:阳性;一:阴性;一/+:大多数菌株阴性;+/一:大多数菌株阳性.7. 3. 8 血清玻片凝集试验阳性。8 结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。20 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.
8、6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
