1、I65.020.30 B 44 道童3中华人民共和国国家标准GB/ T 14926.18 14926. 32- 2001 GB/ T 14926. 5614926. 64- 2001 实验动物微生物学检测方法(4)Laboratory animal- Microbiological examination methods 2001- 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局GB/T 14926. 61 - 2001 前本标准规定了猴逆转D型病毒的检测方法。猴逆转D型病毒主要侵害猴的免疫系统，引起免疫器官的病变和免疫机能紊乱，从而干扰实验研究，是普
2、通级猴和SPF猴的必检项目。因此增加该病毒的检测方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。61 1 范围中华人民共和国国家标准实验动物猴逆转D型病毒检测方法Laboratory animal- Method for examination of simian retrovirus D (SR V) 本标准规定了猴逆转D型病毒(SRV)的检测方法、试剂等。本标准造用于猴SRV的检测。2 引用标准GB/ T 14926. 61 - 2001 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有
3、效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926. 50- 2001 实验动物酶联免疫吸附试验GB/ T 14926. 52- 2001 实验动物免疫荧光试验3 原理根据免疫学原理，采用SRV抗原检测猴血清中SRV抗体。4 主要试剂和器材4. 1 试剂4. 1.1 ELlSA抗原4. 1. 1. 1 特异性抗原:用SRV感染Raji细胞，接种1014天，细胞融合明显时，收获培养液。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELlSA抗原。4.1 . 1. 2 正常抗原:Raji细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎
4、片而获得的上清液。4. ,. 2 抗原片SRV感染Raji细胞，接种后1014d，病变达十十+十时，800r/min离心510min，PBS洗涤，涂片。室温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷丙酣固定10min o -20.C保存。4. 1. 3 阳性血清SRV抗原免疫或自然感染的猴血清。4. 1.4 阴性血清无SRV感染的猴血清。4.1 . 5 酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗猴IgG抗体。4.1 . 6 异硫氧酸荧光素标记羊或兔抗猴IgG抗体。中华人民共和国国家质量监督检验检瘦总局2001-08-29批准2002- 05-01实施62 G/ T 14926.61- 2001
5、 4.2 器材4.2.1 酶标仪。4.2.2 荧光显微镜。4.2.3 37.C培养箱或水洛箱。5 检测方法5.1 采用ELISA方法(见GB/T14926. 50-2001)进行血清学检测。5.2 采用IFA方法(见GB/T14926.52-2001)进行血清学检测。6 结果判定对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为阳性则判为阳性。7 结果报告根据判定结果，作出报告。63 CON-3.N叮lg.Nm叮CON-s.N叮Fj.N叮H阁。H国。华人民共国家标准实验动物微生物学检测方法(4)GB/ T 14926. 18- 14926. 3-2001 GBj T 14926.56- 14926.64- 2001 国和中 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰印张4字数102千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/ 16 2002年2月第一版印数1-2000定价35.00元* 书号:155066 .1-18099 网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533* 595- 548 科目 GB/ T 14926.18-2001
