1、ICS 71-010 G 17 GB 中华人民共和国国家标准GB/T 28486-2012 防霉剂中富马酸二甲醋含量的测定Determination of dimethyl fumarate in mildew preventives 2012-06-29发布2012-11-01实施r阿飞中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会发布中华人民共和国国家标准防毒剂中富马酸二甲醋含量的测定GB/T 28486-2012 当&中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心
2、:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 开本880X 1230 1/16 印张O.75 字数16千字2012年9月第一版2012年9月第一次印刷祷书号:155066. 1-45461定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107GB/T 28486-2012 目。吕本标准按照GB/T1. 1-2009(标准化工作导则第1部分z标准的结构和编写给出的规则起草。本标准由中国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和
3、国福建出入境检验检疫局。本标准主要起草人:李丹、周明辉、李全忠、刘莹峰、郑建国、瞿翠萍、岳大磊、姜晓黎、王云玉。I 防霉剂中富马酸二甲醋含量的测定1 范围本标准规定了防霉剂中富马酸二甲醋含量的检测方法。本标准适用于防霉剂中富马酸二甲醋含量的测定。GB/T 28486-2012 气相色谱法适用于样品中浓度不低于500mg/kg时的测定，气相色谱-质谱法适用于样品中浓度低于500mg/kg、但不低于0.1mg/kg时的测定。2 富马酸二甲醋基本信息富马酸二甲醋(Dimethylfumarate，CAS登记号:624-49-7) ，其结构式如图1所示。3 方法提要3. 1 气相色谱法。/0丫人。/。
4、图1富马酸二甲醋的结构式用脱水乙酸乙醋提取防霉剂中的富马酸二甲醋，加入丁二酸二甲醋作内标，用气相色谱-氢火焰离子化检测器法测定富马酸二甲醋的含量，内标法定量。3.2 气相色谱质谱法用脱水乙酸乙醋提取防霉剂中的富马酸二甲醋，加入丁二酸二甲醋作内标，提取液经浓缩并定容后，用气相色谱-质谱法测定富马酸二甲醋的含量，内标法定量。4 试剂与材料4. 1 乙酸乙醋:分析纯，纯度注99.5%，经5A分子筛脱水处理。4.2 富马酸二甲醋:标准品，纯度二三99%。4.3 丁二酸二甲醋:内标物，GC级，纯度注99%。4.4 聚四氟乙烯(PTFE)微孔滤膜:孔径0.45m。4.5 标准贮备液z准确称取一定量的富马酸
5、二甲醋(4.2)，用乙酸乙醋(4.1)配制成适当浓度的贮备液。4.5. 1 标准贮备液a.准确称取5.0g富马酸二甲醋(精确至0.1mg)，用乙酸乙醋定容至25mL。此溶液浓度为200g/L，在ooC4 oC下密封保存，有效期2个月。4.5.2 标准贮备液b.准确称取0.10g富马酸二甲醋(精确至0.1mg)，用乙酸乙醋定容至50mL。此溶液浓度为2.00g/L，在ooC4 oC下密封保存，有效期1个月。4.5.3 标准贮备液c.取2.50mL标准贮备液b(4.5. 2)，用乙酸乙醋定容至200mL。此溶液浓度为GB/T 28486-2012 25.0 rng/L，在o.C4 .C下密封保存，
6、有效期1周。4.6 内标贮备液:准确称取一定量的丁二酸二甲醋(4.3)，用乙酸乙醋(4.1)配制成适当浓度的贮备液。4.6.1 内标贮备液a:准确称取2.0g丁二酸二甲醋(精确至0.1rng)，用乙酸乙醋定容至100rnL。此溶液浓度为20.0g/L，在o.C4 c下密封保存，有效期2个月。4.6.2 内标贮备液b:取1.00 rnL内标贮备液a(4.6. 1)，用乙酸乙醋定容至100rnL。此溶液浓度为200 rng/L，在o.C4 .C下密封保存，有效期1个月。4.6.3 内标贮备液c.取25.00rnL内标贮备液b(4.6.2)，用乙酸乙醋定容至200rnL。此溶液浓度为25.0 rng
7、/L，在o.C4 .C下密封保存，有效期1周。4.6.4 内标榕液d.取1.00 rnL内标贮备液c(4.6. 3)，用乙酸乙醋定容至25rnL。此溶液浓度为1. 00 rng/L，必须在使用前配制。5 气相色谱法5. 1 仪器与设备5. 1. 1 气相色谱仪:带氢火焰离子化检测器(FID)。5. 1. 2 电子天平(或分析天平):感量0.1rng。5. 1.3 玻璃容量瓶:25 rnL、50rnL、100rnL。5. 1.4 超声披提取器。5.1.5 带刻度玻璃吸量管(或电子移液器):1 rnL、5rnL。5.1.6 单标钱玻璃移液管:10mL. 5. 1. 7 微量进样器:10L。5.2
8、分析步骤5.2. 1 试样处理做两份试样的平行测定。在25rnL容量瓶中准确称入试样1.0 g(精确至0.1rng)，移入10.00rnL内标贮备液，立即塞好塞子，轻摇使样品分散，将容量瓶放入超声波提取器内超声提取5rnino冷却至室温后，用乙酸乙醋(4.1)定容至刻度并摇匀。静置5min，待大部分不溶物沉淀后，取上清液用PTFE微孔滤膜(4.4)过滤，待气相色谱法测定。注:当防霉剂中富马酸二甲酶含量5%时，用内标贮备液a(4.6.D，防霉剂中富马酸二甲醋含量在0.05.%-5.%之间时，用内标贮备液b(4.6.2)。5.2.2 空白试验除不加试样外，其余步骤同5.2.1进行空白试验。5.2.
9、3 气相色谱条件由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出气相色谱分析的通用参数。设定的参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数已被证明是可行的。a) 色谱柱z固定液为50%苯基-甲基聚硅氧烧，30rn(柱长)x O. 32 rnrn(内径)XO. 25rn(膜厚hb) 进样口温度:220.C; c) 进样量:1L; d) 分流比:100:1(防霉剂中富马酸二甲醋含量二三5%), 2 GB/T 28486-2012 或不分流(防霉剂中富马酸二甲醋含量在o.05%5%之间); e) 载气:氮气(纯度注99.999%)、控制方式:恒流、流量:1. 0 mL/min
10、; f) 柱温:初始温度70C.以6.C/min升至250.C.保持5min; g) 检测器温度:280.C;h) 氢气流量:40mL/min; i) 干燥空气流量:300 mL/ min; j) 尾吹气(氮气)流量:30mL/min. 5.2.4 标准曲线的绘制5.2.4. 1 标准工作溶液配制5.2.4. 1. 1 标准工作溶液系列a(防霉剂中富马酸二甲醋含量注5%时使用):在6个25mL容量瓶中分别准确移入标准贮备液a(4.5. 1) 0.25 mL、0.50mL、1.00 mL、1.50 mL、2.50mL、5.00mL.再准确移入内标贮备液a(4.6. 1)各10.00mL.用乙酸乙
11、醋(4.1)定容至刻度并摇匀。此系列标准工作溶液中富马酸二甲醋浓度分别为2.00g/L、4.00g/L、8.00g/L、12.0g/L、20.0g/L、40.0g/L.且内含丁二酸二甲醋浓度均为8.00g/L. 5.2.4. 1. 2 标准工作溶液系列b(防霉剂中富马酸二甲醋含量在o.05%5%之间时使用):在6个25 mL容量瓶中分别准确移入标准贮备液bC4.5. 2)0. 25 mL、0.50mL、1.00 mL、1.50 mL、2.50mL、5.00 mL.再准确移入内标贮备液b(4.6.2)各10.00mL.用乙酸乙醋(4.1)定容至刻度并摇匀。此系列标准工作陪液中富马酸二甲醋浓度分别
12、为20.0mg/L、40.0mg/L、80.0mg/L、120mg/L、200mg/L、400 mg/L.且内含丁二酸二甲醋放度均为80.0mg/L。5.2.4.2 标准曲线的测定按5.2.3设定好气相色谱仪的条件，待仪器稳定后，将配制好的标准工作溶被系列a或系列b.按浓度由低到高的顺序，依次注入气相色谱仪进行测定。以富马酸二甲醋/丁二酸二甲醋的峰面权比为纵坐标CY轴).以富马酸二甲醋/丁二酸二甲醋的浓度比为横坐标(X轴)，对各个数值点进行最小二乘法线形拟合，得到标准工作曲线:y=ax十b式中:y一一富马酸二甲醋/丁二酸二甲醋的峰面积比;a一一回归曲线的斜率zz一一富马酸二甲醋/丁二酸二甲醋的
13、浓度比zb 回归曲线的截距。回归曲线的线性相关系数通常不小于o.998。标准溶液的典型气相色谱图见附录A中图A.10 5.2.5 试样测定. ( 1 ) 按5.2.3设定好气相色谱仪的条件，待仪器稳定后，将己处理好的样液(5.2. 1)注入气相色谱仪进行测定。当样液的色谱峰面积超过浓度最高的标准溶液色谱峰面积时，应减少取样量，或将样液用乙酸乙醋(4.1)稀释后重新上机测定。5.3 结果计算按式(2)计算试样中富马酸二甲醋的含量:3 G/T 28486-2012 V一 d-nU M-dli e- -m J一SE A-M -A b一一-aE, A一，、-t x . ( 2 ) 式中zXi 一一试样
14、中富马酸二甲醋的质量分数(%); A 一一样液中富马酸二甲醋的峰面积;b 回归曲线的截距;A istd -一一样液中丁二酸二甲醋的峰面积;C;std一一样液中丁二酸二甲醋的浓度，单位为克每升(g/L); V 一一样液体积，单位为毫升(mL);a 一一回归曲线的斜率;m 一一试样质量，单位为克(g)。取两次平行测定结果的算术平均值，结果保留三位有效数字。6 气相色谱-质谱法6. 1 仪器和设备6. 1. 1 气相色谱-质谱仪:带电子轰击电离源(EI源)。6. 1.2 电子天平(或分析天平):感量0.1mg。6.1.3 具塞玻璃锥形瓶:50mLo 6. 1. 4 超声波提取器。6. 1. 5 PT
15、FE微孔滤膜:孔径0.45m。6.1.6 玻璃容量瓶:50mL、100mL、200mL。6.1.7 旋转蒸发仪z带100mL旋转蒸发瓶。6. 1.8 带刻度玻璃吸量管(或电子移液器):1mL、5mLo 6. 1. 9 单标线玻璃移液管:10mL、25mL。6. 1. 10 具塞玻璃量筒:5mLo 6. 1. 11 玻璃注射器。6. 1. 12 微量进样器:10L。6.2 分析步骤6.2.1 试样处理做两份试样的平行测定。在50mL玻璃锥形瓶中准确称入试样5.0g(精确至0.1mg).加入约20mL乙酸乙醋(4.1).再准确移入内标溶液d(4.6. 4)5. 00 mL.立即盖好塞子，轻摇使样品
16、分散，将锥形瓶放人超声波提取器内超声提取5min。将锥形瓶在室温下静置，待冷却至室温且不溶物充分沉淀后，用玻璃注射器抽取上清液，并用PTFE微孔滤膜过滤至旋转蒸发瓶内。再用20mL乙酸乙醋(4.1)分56次洗涤锥形瓶内沉淀，将洗涤液用玻璃注射器吸取、并用PTFE微孔滤膜过滤至旋转蒸发瓶(6.1. 7)内合并。将溶液旋转蒸发浓缩至约1mL后，用玻璃吸管转移至具塞玻璃量筒(6.1.10)内，并用约3mL乙酸乙醋(4.1)分34次洗涤旋转蒸发瓶，将洗涤液全部用玻璃吸管转移至具塞玻璃量筒内合并，并用乙酸乙醋(4.1)定容至5mL.待气相色谱-质谱法测定。6.2.2 空白试验除不加试样外，其余步骤同6.
17、2.1进行空白试验。4 GB/T 28486-2012 6.2.3 测定6.2.3. 1 气相色谱-质谱条件由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出气相色谱分析的通用参数。设定的参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数已被证明是可行的。a) 色谱柱:固定液为50%苯基-甲基聚硅氧烧，30m(柱长)XO. 25 mm(内径)X 0.25m(膜厚); b) 进样口温度:220.C; c) 色谱-质谱接口温度:280.C d) 进样方式:不分流进样，0.75min后开阀;e) 载气:氨气:纯度二三99.999%，控制方式:恒流，流速:1.0 mL/min; f)
18、柱温:初始温度50.C，以5.C/min升至100.C;再以25.C/min升至280.C，保持10min; g) 进样量:1L; h) 离子摞:EI源;i) 电离能量:70eV; j) 离子源温度:230.C; k) 四极杆温度:150.C;D 溶剂延迟时间:6min; m)扫描方式:选择离子监测(SIM模式); n) 监测离子(m/z):富马酸二甲醋:定量离子113u，定性离子59u、85u、144U; 丁二酸二甲醋:定量离子115u，定性离子55U、59U、87U。6.2.3.2 标准曲线绘制标准工作溶液系列c.在7个25mL容量瓶中分别准确移入标准贮备液c(4.5.3)0.10 mL、
19、0.20 mL、0.50mL、1.00 mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL，再分别准确移入内标贮备液c(4.6. 3)各1. 00 mL，用乙酸乙醋(4.1)定容至刻度并摇匀。配制成富马酸二甲醋浓度分别为0.10mg/L、0.20 mg/L、0.50mg/L、1.00 mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、10.00mg/L，且内含丁二酸二甲醋浓度均为1.00 mg/L的标准工作溶液系列。按6.2.3.1设定好相色谱-质谱仪的条件，待仪器稳定后，将标准工作溶液系列c按浓度由低到高的顺序依次注入气相色谱质谱仪进行测定。标准曲线的计算公式同5.2.4.2中式(1)，回归曲线的
20、线性相关系数通常不小于O.996. 典型的气相色谱-质谱总离子流图见附录A中图A.2.6.2.3.3 试样测定按6.2.3.1设定好相色谱-质谱仪的条件，待仪器稳定后，将试样注入气相色谱-质谱仪进行测定。根据总离子流色谱图中色谱峰的保留时间和特征碎片离子及其丰度比进行阳性结果确证。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，则根据选择离子的种类和丰度比对其进行确证。注:富马酸二甲醋的标准质谱图见附录A中图A.3.富马酸二甲醋的特征碎片离子(m/z)为59、85、113、144，其丰度比约为30: 60 : 100 : 5. 当样液的色谱峰面积超过浓度最高的标准溶液色谱
21、峰面积时，应减少取样量，或将样液用乙酸乙醋(4.1)稀释后重新进行测定。5 GB/T 28486-2012 6.3 结果计算按式。)计算试样中富马酸二甲醋的含量:X一(Ai- b X A;std) X Cis世xV-a X Aitd X m 式中zXi 一一试样中富马酸二甲醋的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A 一一样液中富马酸二甲醋的峰面积Fb 一一回归曲线的截距;A;叫一一样液中丁二酸二甲醋的峰面积5c;叫一-样液中丁二酸二甲醋的浓度，单位为毫克每升(mg/L); V 一一样液体积，单位为毫升(mL); a 一一回归曲线的斜率;m 一一试样质量，单位为克(g)。取两次平行测定结果的
22、算术平均值，结果保留三位有效数字。7 精密度( 3 ) 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%，以大于10%的情况不超过5%为前提。6 GB/T 28486-2012 附录A(资料性附录)富马酸二甲醋的谱图pA 250 1 2 200 150 100 50 I! I 。5 10 15 20 25 30 mm 1一一富马酸二甲醋;2一一丁二酸二甲醋(内标)。图A.1富马酸二甲醋的气相色谱法色谱图丰度45000001 2 4000000 3500000 3000000 250000( 2000000 1500000 100000( 500000 8. 00 10.
23、00 12. 00 14.00 16.00 18. 00 20. 00 22.00 24. 00 26.00 mm 保留时间1一一富马酸二甲酶;2一一丁二酸二甲醋(内标)。图A.2富马酸二甲醋的气相色谱-质谱法总离子流图NFON|叮NH因。GB/T 28486-2012 100 113 。/0人0/85 50 15 59 53 13 61 6871 144 。10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 (mainlib) 2-Butenedioic acid (E)-dime由ylester 富马酸二甲醋的标准质谱圄图A.3侵权必究-EA F问A哇严、JVAU-节BA- Fnuw pnu AU MHJv 卢hJVE币A-. . 号一价书一定等版权专有16.00 5t GB/T 28486-2012 打印日期:2012年10月23日F002
