1、画圈圈圈画圄. 监画中华人民共和国机械行业标准JB 5226-91 j夜相色谱仪测试用标准色谱桂1991-07一10发布1992-07一01实施机械电子工业部发布中华人民共和国机械行业标准液相色谱仪测试用标准色谱柱JB 5226-91 1 主题内窑与适用范围本标准规定了液相色谱仪测试用标准色谱柱的分类、技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存和保证期等。本标准适用于液相色谱仪测试用标准色谱柱以下简称标准柱)，不适用于离子色谱仪，制备色谱仪及凝胶色谱仪等专用型仪器。2 引用标准GB 9003 液捆色谱法术语一一柱液相色谱法和平面色谱法。ZBY 002 仪器仪表运输、运输贮存基木环境条
2、件及试验方法。3 术语3.1 色谱峰对称性(peaksynmetry) 色谱峰符合正态分布的程度。3.2 不对称因子(asymmetryfaotor) 色谱峰对称性的物理量。3.3 渗透性(permeabi1ity)色谱柱对流动相的阻滞程度。4 标准桂分类4.1 分类a. 反相标准柱(简称反相柱)。b. 正丰目标准柱(简称正相柱。4.2 参数4.2.1 标准柱管内径4.5mm，4.2.2 标准柱管长度150mm。4.2.3 标准柱管内壁粗糙度。-4/，不得有轴向划痪。7 4.2.4 标准柱接头(两端相同死体积不大于0.41，柱接头与仪器连接螺纹尺寸为M5(或公称直径4.64mm，牙距0.78m
3、m)。5 技术要求5.1 正常工作条件a. 环境温度10一350C;b. 环境温度不大于80%;c. 电源rt!.压:220士22V。频率:50土0.5Hz;d.室内通风良好，无腐蚀性气体，无强制气体对流及无强烈机械振动。5.2 标准柱耐压不小于40MPa。凯械电子工业部1991-07-10批准1992-07-01实施1 JD 5226-91 5.3 标准柱渗透性柱温设定25士5CC。a. 反向柱z流动相为甲醇，柱压力r;辛小于6MPa;b. 正相柱z流动相为正乙炕，柱压力降小于3MPa。5.4 标准柱效能a. 反相柱z每米理论板数在3-4X 104范围内Fb. 正相柱z每米理论板数在4-5X
4、 104范围内。5.5 色谱峰对称性被测峰(惠)不对称因子As在0.8-1.6/;围内。5.6 标准柱外观及标记柱体外观光亮，无毛剌及划痕。标准柱应附有柱尺寸、填充剂型号、规格、流动相流动方向及填充日期标记。5.7 运输、运输贮存标准柱在包装状态下，应符合ZBY002要求，其中高温+550C，低温-40oC，跌落高度250mm、6 试验方法6.1 材料和要求6.1.1 反相柱填充剂为无定型十八炕基键合硅胶。a. 经过封尾处理Fb. 键合量为12一14%;c. 硅胶比表而为300-350m2jg，平均孔径6-8nm，d. 颗1世直径为10士2m6.1.2 正相柱填充剂为无定型1i主胶。a. 比丧
5、雨为300-350m2jg，平均孔径6-8nm;b. 颗粒直径为5土l肌6.1.3 过洁、片90%孔不大于2m，厚度小于2mm，6.1.4 标准柱所用金属件材质为耐腐蚀不锈钢(1Cr18Ni9Ti或SS316)。6.1.5 试剂a. 正己炕;液相色谱纯，经分子筛干燥脱水后再超声脱气处理。b. 四氧化碳5分析纯pc. 二氧六环F分析纯Fd. 无水乙醇p分析纯;6.2 标准柱制备6.2.1 装填设备z见图1，其中高压泵使用压力不小子60MPa，压力表为1.5级，压力范围O一100MPa。6.2.2 柱管检查及清洗6.2.2.1 柱管检查a. 用直尺，卡凡检查柱管长度，内径;b. 用放大镜及粗糙度比
6、较块!金查内壁粗糙度。6.2.3 空柱装配在柱接头中，装入过j虑片，在柱营上装上螺帽，压环，将两端柱接头拧在柱管上，并拧紧密封，其结柏见附录C(参考件)。2 6.2.4 标准柱装填JB 522691 图1标准柱装填装置囱1-高压泵2一压力表3一匀浆罐4一匀浆罐连接在t接头5-色谱柱6一废液瓶7-贮液ffittl按图1所示，卸下装配好的空色谱柱入口接头，接到匀浆罐连柱接头上，拧紧密封，配制四氯化碳和二氧六环比例为2:1(体积比的匀浆液。依据所用填充剂及匀浆罐体积配制填充剂和匀浆液比例约1:10 (g/mD的匀浆，倒入100m!锥形瓶巾，置于超声波清洗器槽中，超，声分散5-10min将匀柴倒入匀浆
7、罐中，加盖密封，启动高泵，压力升至60MPao当流出液体积超过200m!后，慢慢降至常压，30min后，取下色谱柱，用刮刀小心修平柱填充剂床层，装上柱入口接头拧紧密封，待测柱性能。T:l: : (1)反扪柱z顶fjf液用无水乙醉。( 2 )正相中1:顶桥液用正己:境。顶替r)及匀浆液需用分子筛干燥处理-6.3 试验条件6.3.1 试验室条件同正常工作条件。6.3.2 试验仪器，设备及工具6.3.2.1 高压泵使用压力不小于60MPa，并装有0-100MPa压力表(1.5级)。6.3.2.2 液相色谱仪需经计量部门检定合格)流量范围0.1-5.0ml!min(或0.1一10ml/min)。并装有
8、UV-254n盯波长紫外检测器。检测池体积8l。6.3.2.3 其它设备，工具及试剂a. 数据处理系统或记录仪pb. 秒表，C. 卡只z精确度0.05mm，d. 直只t最小刻度1mm，长度300mm，e. 放大镜，x 10倍;f. 粗糙度比较块zg. i卖数显微镜，x 20倍;h. 微量进样器，101; i. 二次蒸馆水，经超声脱气处理sj. 甲醇，分析纯，经超声脱气处理Pk.正已挠，液相色谱纯，经分子筛干燥脱水后再超声脱气处理z. 无水已醇，分析纯。3 JB 5226-91 6.3.2.4 试样a. 反相柱试样腮唔吭5 x 10-6g/ml, (分析纯)1 x 10-4g/ml, ?巳巧飞蓝
9、(分析纯)1 x 10-5g/ml, b. 正相柱试样四氯乙烯(分析纯)1 x 10+6 g/ ml; 荼(分析纯)1 x 10-4g/ml; 惠(分析纯)1 x 10-5g/ ml 6.4 标准柱性能试验程序6.4.1 耐压密封性甲醇溶液正己炕溶液。按图2所示，将色谱柱入口接到高压泵出口处，并拧紧密封，色谱柱出口处接一开关间，启动高压泵，当系统压力升至40MPa时，亘压15min，用谑、纸检查色谱柱的进出口接头处，应无润湿现象。注:(1)反相柱加压介质为无水醇。( 2 )正徊住:加压介质为经分子筛干处理的正已皖。图2高压密封试验图1-贮液JIl2一高压泵3一压力表4一色谱柱5一开关阀6.4.
10、2 渗透性依照标准柱上标记的流动相流动方向，:1守其接入液相色谱仪上，并拧紧柱的进出口接头，确保密封，柱温设定25:.1:50C。a. 反相柱z流动相用甲醇，设定流速为1土O.lml/min，启动仪器，待流速稳定后，从色谱仪上读出色谱柱的压力降，反复进行三次，取三次读数的算术平均值。b. 正相柱E流动相用经分子筛干燥处理的正己;院，其它试验同反相柱。6.4.3 柱效能a. 反相柱流动相z甲醇和水，比例为85:15(体积比)。线速:lmm/s。检测波长:UV-254nm，量程:0.16吸光度。阀进样方式z进样量101，试样为反相柱试样。启动仪器，当仪器稳定后，开始进样，由数据处理系统或记录仪(纸
11、速为50-80mm/min)给出色谱图及柱效能数据，取三次惠峰的理论根数的算术平均值为柱效能(相对误差不大于5%)。计算方法见附录A(补充件。b. 正相柱流动相用经分子筛干燥处理的正巳院及正相柱试样，其它同反相柱。4 JB 5226-91 6.4.4 色谱峰对称性试验条件同6.4.3，在测试柱效能同时分别算出三p次藤峰的不对称因子As，取算术平均值相对误差不大于10%)。计算方法见附录A(补充件)。6.4.5 外观及标记目测。6.4.6 运输、运输贮存按ZBY002方法进行。6.5 试验报告试验报告应包括标准柱编号，柱参数，柱填充剂型号规格，仪器操作条件，及测试结果等内容。见附录B(参考件)。
12、7 检验规则每根标准柱需经检验合格后方能出厂，并;啊合格证书，试验报告及色谱图。7.1 检验分类a. 出厂检验pb. 型式险验。7.2 出厂检验出广检验项目按本标准5.2-5.6条要求进行。7.3 型式检验7.3.1 在下列情况之一时，进行型式检验a. 新产品试制定型鉴定Fb. 正式生产时或积累一定生产量后，应进行周期检验FC. 产品长期停产后，恢复生产时zd. 出厂检验结果与上次型式检验有较大差异时ze. 国家质量监督机柏提出进行型式检验要求时。7.3.2 型式检验的试样应从检验合格的成批产品中随机抽取，至少三根。7.3.3 型式检验项目按本标准5.2-5.7条要求进行。7.4 判定规则凡有
13、一项不合格者，步IJ为不合格产品。8 标志，包装，运输，贮存8.1 标志、8.1.1 每根标准柱应有标牌，并应标出以下内容。a. 标准柱名称，编号Fb. 柱尺寸zC. 填充剂型号，粒度;d. 装填日期Fe. 流动相方向。8.1.2 外包装标志外包装盒应采用不易退色的颜料或墨汁标注。5 JB 5226-91 a. 商品各称b. 精密仪器，小心轻放F，防潮的文字或图标pc. 净重，址，d. 制造单位。8.2 包装标准柱内包装用聚胶脂泡沫塑料，保证防震，外包装用木盒或塑料盒。8.3 运输，贮存标准柱在运输过程中，须防止剧烈震动，贮存时，环境温度。-400C，相对湿度不大于85%。 保证期在用户遵守保
14、管和使用规则的条件下，从制造厂发货给用户三个月内，产品因制造不良而发生损坏或低于出厂规定指标时，制造厂应无偿为用户修理或更换(色谱柱已被污染者除外。6 3D 5226-$1 附录A标准桂效能及峰不对称国子计算方法补充件Al 色谱幢幢效能n计算方法接公式II:./J; W t:rniJ)-l/J !rIJ U月WJ长沙)li r. t;i: .L:.iI:i.j;i发ijjli发n(;iJJ lrj L二i少I)j!_;_JJ& II) * ;)-F本880X12:1O1/16 EjJ张0.875字数1800 (1 1992年3月出一版1992年3月第一次印刷印，机1-2000* 一兀) ( -lh叫-I Fl j i 、il/
