1、ICS 11.120.10 B 42 中华人民共和国农业行业标准NY 5070-2002 代替NY5070-2001 无公害食晶水产品中渔药残留限2002-0725发布2002 - 09-01实施中华人民共和国农业部发布149 , y 5070-2002 前本标准是对NY5070-2001(无公害食品水产品中渔药残留限量的修订。本标准的修订主要参考了国际食品法典委员会(CAC)(食品中兽药残留)(Residueof Veterinary Drugs in Foods )第二版第三卷0995修订和食品中兽药最大残留限量标准)(CodexMaximum Residue Limit For Vete
2、rinary Drugs in Foods勺，同时根据我国水产品贸易情况参考了欧盟法规(EECRegulation 2377/90. )，美国食品与药品管理局(FDA)法规21CFRCh. (4-1-01 Edition)Part 556-Tol 盯ancelor Residue 01 New Animal Drugs in FoodJ以及日本、加拿大、韩国和我国香港地区的动物性食品中兽药最大残留限量标准(MRL)，并结合我国水产品养殖生产过程中渔药的使用情况。本标准保持了原标准的结构形式s在内容上保留了原标准中科学、合理的内容，删除了目前我国水产养殖中没有使用的药物，修订了氯霉意测定方法，增
3、加了附录A、附录B，同时对部分内容作T修改和补充。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位z国家水产品质量监督检验中心、青岛出入境检验检疫局、广东出入境检疫检疫局。本标准主要起草人=周德庆、李晓J11、李兆新、冷凯良、林黎明、宜齐、吴建丽。本标准所代替标准的历次版本发布情况为，NY5070-2001。lSO NY 5070-2002 无公害食品水产品中渔药残留限量1 范围本标准规定了无公害水产品中渔药及通过环境污染造成的药物残留的最高限量。本标准适用于水产养殖品及初级加工水产品、冷冻水产品，其他水产加工品可以参照
4、使用。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注目期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY 5029-2001无公害食品猪肉NY 5071 元公害食品渔用药物使用准则SC/T 3303-1997 冻烤蟆SN/T 0197-1993 出口肉中喳乙醇残留量检验方法SN 0206-1993 出口活鲤鱼中嗯喳酸残留量检验方法SN 0208-1993 出口肉中十种磺胶残留量检验方法SN 0530一1996出口肉品中
5、映嘀略翻残留量的检验方法液相色谱法3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 渔用药物fishery drugs 用以预防、控制和治疗水产动、植物的病、虫、害，促进养殖品种健康生长，增强机体抗病能力以及改善养殖水体质量的一切物质，简称渔药。3. 2 渔药残留residues of fishery drugs 在水产品的任何食用部分中渔药的原型化合物或/和其代谢产物，并包括与药物本体有关杂质的残留。3. 3 最高残留限量maximum residue Limit , MRL 允许存在于水产品表面或内部(主要指肉与皮或/和性腺)的该药(或标志残留物)的最高量/浓度(以鲜重计，表示为:用/k
6、g或mg/kg)。4 要求4. 1 渔药使用水产养殖中禁止使用国家、行业颁布的禁用药物，渔药使用时按NY5071的要求进行。4.2 水产品中渔药残留限量要求水产品中渔药残留限量要求见表L151 NY 5070-2002 表1水产晶申渔药残留限量药物名称药物类别指标(MRL)/(用/kg)中文英文盘霉素chlortetracycline 100 四环章类土霉素Oxytetracycline 100 抗牛章类四环素Tetracycline 100 氯霉素类氯霉素Chloramphenicol 不得检出磺胶啼睫Sulfadiazine 磺胶甲基嘻呢Sulfamerazine 100 磺胶类且增放剂破
7、肢二甲基嘻皖Sulfadimidine (以总量计)磺胶甲唔略sulfamethoxazole 甲氧节呢Trimethoprim 50 喳诺嗣类曙噎酸Oxilinic acid 300 硝基峡喃类峡哺瞠酣Furazolidone 不得检出己烯雌酣Diethylstl bestrol 不得检出其他喳乙醇。laquindox不得检出5 检测方法5. 1 金霉素、土霉素、四环素金霉素测定按NY5029-2001中附录B规定执行，土霉素、四环素按SC/T3303-1997中附录A规定执行。5. 2 氯霉素氯霉素残留量的筛选测定方法按本标准中附录A执行，测定按NY50292001中附录O(气相色谱法)的
8、规定执行。5.3 葡肢类磺胶类中的磺胶甲基略院、磺胶二甲基晴睫的测定按SC/T3303的规定执行，其他磺胶类按SN/T 0208的规定执行。5. 4 唏喳酸日军喳酸的测定按SN/T0206的规定执行。5. 5 肤嘀瞠翻映喃嗖酣的测定按SN/T0530的规定进行。5. 6 己烯雌酣己烯雌盼残留量的筛选测定方法按本标准中附录B规定执行。5. 7唾Z醇喳乙醇的测定按SN/T0197的规定执行。6 检验规则6. 1 检验项目按相应产品标准的规定项目进行。6.2 抽样152 NY 5070-2号026.2. 1 纽批规则同一水产养磁场内，在品种、养殖对阔、养孩方式基本裙爵的养殖水产品为一批(岗一养藏池.
9、或多个养殖池);水产加工品按批号抽样，在原料及生产条件慕本相同下同天或同一班组生产的产品为批。6. 2. 2 擒样方法6.2.2.1 养殖水产品黯极从各养殖池捻取有代表性的挎品，取牵羊道见表20亵2取样.生物数量!100016.2.2.2 水产加工品取样最!C尾h只2 4 10 20 30 每批抽取群本以箱为单位.100箱以内款3辈革，以后每增主n100幸在包括不足100箱)IJltl撼1箱。按所取样本从每箱内各抽取样品不少于3件，每批淑样量不少于10f札6.3 取持和样品的处理采集的样品应分成两等份，英中一份作为留样。从样本中取有代表性的样品，装入适当容器，并保液每份样品都能满足分析的要求z
10、样品的处理按规定的方法进行，通过细切、绞肉机绞碎、缩分，使其混合均匀;鱼珍宝F写爽、藻等各类祥昌在量不少可f200 g。各类样品部处理方法郊下za) :f!类先将鱼体表丽杂质洗净，去掉麟、内脏，取肉包括脊背和腹部肉和皮一起绞隙，特殊要求除外。机龟鳖类z去头、放出血液，取其肌肉包括裙边，按碎后进行测定。d 虾类2洗净后，去头、壳，取其肌肉进行测定。d) 灾类z鲜的、冷冻约较量雷、蛤销等要把肉和体液朔和i均匀后进行分析测定ae) 蟹.取肉和性腺进行测定。t昆匀约样品，如不及时分析，应置于清洁、密闭的玻璃容穗，冰冻保存。6.4 到这烧J!ll按不闵产品的要求所检的渔药残留各指标均应符合本标准的要求，
11、各项指标中的极限俄采用修约值比较法。超过限i!:标准规定时，允许加倍抽样将此项指标复验一次，按策验结果判定本批产品是否合格。经主主检后所徐指标仍不合格的产品1Jl判为不合格品。153 NY 5070 2002 附录A(规范性附录)氯霉素残留的酶联免疫测定法A.l 适用范围本方法适用于测定水产品肌肉组织中氯霉素的残留量。A.2 原理利用抗体抗原反应。微孔板包被有针对兔免疫球蛋白(!gG)(氯霉素抗体)的羊抗体，加入氯霉素抗体、氯霉素标记物、标准和样品溶液。游离氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体，同时氯霉素抗体与羊抗体连接。没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被洗去。将酶基质(过氧化尿素和发色剂(四甲
12、基联苯胶)加入到孔中并孵育s结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色由蓝变为黄，在450nm处测量，吸光度与样品的氯霉素浓度成反比。A.3 检测限筛选方法的检测下限为1附!kg，A.4 仪器A. 4. 1 微孔酶标仪(450nm)。A. 4. 2 离心机。A. 4.3 旋转蒸发仪。A. 4. 4 混合器。A. 4. 5 移液器。A. 4. 6 50L，100L，450L微量加液器等。A.5 药品和试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馆水或去离子水或相当纯度的水。A. 5. 1 乙酸乙醋。A. 5. 2 乙脯。A. 5. 3 正己炕。A. 5. 4磷
13、酸盐缓冲液(PBS)(pH7. 2): O. 55 g磷酸二氢销(NaH2PO. H20) , 2. 85 g磷酸氢二例(Na2HP(), 2H20) , 9 g氯化销(NaCl)加入蒸偏水至1000 mL。A.6 标准溶液分别取标准浓缩液50L用450L缓冲液1(试剂盒提供)稀释并混均匀，制成0、50ng!L、150 ng/L、450ng/L、1350 ng/L、4050 ng/L的标准溶液。A.7 样晶提取和纯化A. 7. 1 取5.0g粉碎的鱼肉样品(样品先去脂肪组织)，与20mL乙脯水溶液(86十16)混合10min , 15 C离心10min(4 000 r/min)。也7.2取3m
14、L上清液与3mL蒸馆水混合，加入4.5mL乙酸乙醋混合10min , 15 C离心10mtn 15.1 NY 5070-2002 (4000 r/min)。A. 7. 3 将乙酸乙醋层转移至另一瓶中继续干燥，用1.5 mL缓冲液1溶解干燥的残留物，加入1.5 mL 正己烧混合。A. 7. 4 完全除去正己烧层(上层).取50L水相进行分析。A.8 样晶测定程序A. 8. 1 将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架，记录下标准和样品的位置，每一样品和标准做两个平行实验。A. 8. 2 加入50L稀释了的酶标记物到微孔底部，再加人50L的标准或处理好的样品液到各自的微孔中。A. 8. 3 加入5
15、0L稀释了的抗体溶液到每一个微孔底部充分混合，在室温孵育2h , A. 8. 4 倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打(每行拍打3次以保证完全除去孔中的液体，然后用250L蒸馆水充入孔中，再次倒掉微孔中的液体，再重复操作两次。A. 8. 5 加入50L基质、50L发色试剂到微孔中，充分混合并在室温、暗处孵育30min , A. 8. 6 加人100L反应停止液到微孔中，混合好，以空气为空白，在450nm处测量吸光度值(注意.必须在加入反应停止液后60min内读取吸光度值)。A.9 结果所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准(0标准的吸光度值再乘以100.得到以百分比给出的吸光度
16、值，以式(A.1)表示:E(%) =去X100 .( A. 1 ) 式中zE 吸光度值，%; A 标准或样品的吸光度值gAo-O标准的吸光度值。以计算的标准值绘成一个对应氯霉素浓度(ng/L)的半对数坐标系统曲线图，校正的曲线在50 ng/Ll 350 ng/L的范围内应成为线性，相对应的每一个样品的浓度，可以从曲线上读出。乘以稀释倍数即可得到样品中氯霉素的实际浓度(ng/kg)。155 NY 5070-2002 附录B(规范性附录)己烯雌酣(DES)残留的酶联免应测定法B.1 适用范围本方法适用于测定水产品肌肉等可食组织中己烯雌酷的残留量。B.2 原理测定的基础是利用抗体抗原反应。微孔板包被
17、有针对兔IgG600nm的参比滤光片)，以空气为主空白，必须在加入停止液后60mn内读浓吸光!l值2B.8结果所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准(0标准的吸光度值再乘以100，得到以百分比给出的吸光度僚，以式(日.1)表示:式中zE一吸光度傻!%; A一标准或样品的吸光度值pA，-Q标准的极光度假。E(%)寸X100 .4. . . .( B. 1 ) 以计算的标准傻绘成一个对应DES浓度(ng/L)的半对数坐标系统曲线霞，校茧的曲线在25 ng/L200 ng/L的范围内应成为线性，相对应的每一个样品的浓度，可以从曲线上读出。乘以稀释倍数部写得到!祥品中DES的实际浓度(ng/kg)。
