1、ICS 67050C 53 囝雷中华人民共和国国家标准GBT 23383-2009食品中双乙酸钠的测定-_】 口同 效液相色谱法Determination of sodium hydrogen diacetate in foodsHigh performance liquid chromatography method2009-04-08发布 2009-05-01实施丰瞀髁鬻瓣警矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会促19刖 置GBT 23383-2009本标准的附录A为资料性附录。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准由国家农副加工产品及白酒质量监督检验中心(山西省食品质量监督检验中心)负责
2、起草。本标准主要起草人：梁宝爱、冯晓斌、王正喜、张素娟、武强、武向勇、孙丽萍、赵娅鸿、赵海霞。1范围食品中双乙酸钠的测定高效液相色谱法GBT 23383-2009本标准规定了食品中双乙酸钠的高效液相色谱测定方法。本标准适用于豆干类、豆干再制品、糕点、预制肉制品、熟肉制品、调味品、复合调味料、油炸小食品(仅限油炸薯片)等食品中双乙酸钠的测定；不适用于食醋的测定。本标准的方法检出限为0015 gkg，方法定量限为o05 gkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标
3、准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法(ISO 3696：1987，MOD)3原理样品中双乙酸钠酸化后转化为乙酸，经超声波水浴提取或水蒸气蒸馏，收集后调pH值，经商效液相色谱测定，外标法定量。4试剂与材料除另有规定外，试剂均为分析纯。41 色谱用水应符合GBT 6682-2008规定的一级水，其他用水符合GBT 6682 2008规定的三级水。42磷酸。43磷酸氢二铵。44硅油。45磷酸溶液(1 molL)：在500 mL水中加入535 mL磷酸，混匀后加水定容至1 000 mL。
4、46磷酸氢二铵溶液(15 gL)：称取磷酸氢二铵15 g，加水溶解定容至1 000 mL。47双乙酸钠标准品：纯度99。48双乙酸钠标准储备液：准确称取双乙酸钠标准品1 g(精确至0000 l g)，用水定容至100 mL，配制成含量为10 mgmL的标准储备液。于4冰箱内保存，有效期3个月。49微孔滤膜：045 pm，水相。410 pH试纸。5仪器和设备51高效液相色谱(HPLC)仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。52天平：感量0000 1 g和001 g。53离心机：转速不低于4 000 rmin。54超声波水浴。GBT 23383-200955组织捣碎机。56具塞塑料离心管：50 m
5、L。57水蒸气蒸馏装置：500 mL。58 pH计。6分析步骤61样品制备固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用；液体样品摇匀后备用。62试样处理621蒸馏法：准确称取25 g(精确至001 g)试样(61)，置于500 mL蒸馏瓶中，加入100 mL水，再用50mL水冲洗容器，转移到蒸馏瓶中，加1molL磷酸溶液(45)20mL，2滴3滴硅油，进行水蒸气蒸馏，将250 mL容量瓶置于冰浴中作为吸收液装置，待蒸馏约240 mL时取出，在室温下放置30 rain，用1 molL磷酸溶液(45)调pH值至3左右，加水定容，摇匀，经045 pm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。622直接浸提法(适用于面包
6、、糕点)：准确称取5 g(精确至001 g)试样(61)至100mL烧杯中，加水20 mL，加入1 molL磷酸溶液(45)05 mL，混匀，经超声浸提10 rain后，用1 molL磷酸溶液(45)调pH值至3左右，转移试样至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。将试样全部转移至50mL具塞塑料离一fl,管中，以不低于4 000 rmin离心10rain，取上清液，经045 pm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。63测定631高效液相色谱条件a)色谱柱：C18柱，46mmX 250mm，5 pm或等效色谱柱。b)流动相：I5 gL磷酸氢二铵溶液(46)，用1molL磷酸溶液(45)调pH值至
7、2735(使用时配制)；经045 pm微孔滤膜过滤。c)流速：10 mLmin。d)柱温：25。e)进样量：20 pL。f)波长：214 nm。g)色谱柱清洗参考条件：实验结束后，用10甲醇清洗1 h，再用100甲醇清洗1 h。632标准曲线绘制6321蒸馏法：准确吸取双乙酸钠标准储备液(48)10、25、50、75、100、125 mL置于500 mL蒸馏瓶中，其他操作同621样品前处理，其双乙酸钠标准溶液最终浓度分别为004、01、02、03、04、05mgmL，经045 pm微孔滤膜过滤后，浓度由低到高进样，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。6322直接浸提法：准确吸取50
8、mL标准储备液(48)于50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，配制成浓度为1_0 mgmL标准工作液。再准确吸取标准工作液05、10、20、30、40、50 mL至10 mL容量瓶中，分别加入1 molL磷酸溶液02 mL，用水定容至10 mL，摇匀。其双乙酸钠标准溶液最终浓度分别为005、01、02、03、04、05mgmL，经045 pm微孔滤膜过滤后，浓度由低到高进样，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。在上述色谱条件下，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。高效液相色谱图参见图A1。633定量测定待测样液中双乙酸钠响应值应在标准曲线线性范围内，超出浓度线性范围则应稀释后再进样分析
9、。264结果计算样品中双乙酸钠含量按式(1)进行计算。x一等等擗，式中：x样品中双乙酸钠含量，单位为克每千克(gkg)；f由标准曲线求出样液中乙酸的浓度，单位为毫克每毫升(mgmL)V样液最后定容体积，单位为毫升(mL)；m样品质量，单位为克(g)；，稀释倍数。计算结果保留三位有效数字。GBT 23383-20097允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。8回收率蒸馏法：在添加浓度05 gkg50 gkg范围内，回收率在90o1100之间，相对标准偏差小于5。直接浸提法：在添加浓度05 gkg5o gkg范围内，回收率在80o110o之间，相对标准偏差小于5。GBT 23383-2009波长=214 nm附录A(资料性附录)双乙酸钠标准物质的液相色谱图图A1 双乙酸钠标准物质的液相色谱图
