1、ICS 6708020X 26 a吕中华人民共和国国家标准GBT 243 1 620092009-09-30发布致命鹅膏的物种鉴定Identification of Amanita exitialis2009-12-01实施宰瞀鹃紫瓣警麟瞥鐾发布中国国家标准化管理委员会仪1”刖 胃本标准的附录A、附录c为资料性附录,附录B为规范性附录。本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。本标准起草单位:广东省微生物分析检测中心。本标准主要起草人:李泰辉、邓旺秋、宋斌、沈亚恒。CBlr 243162009GBT 243162009引 言致命鹅膏Amanita exitialis Zhu LYang&THLi
2、是华南地区特有的野生剧毒蘑菇种类,不可食用。制定本标准,旨在帮助人们正确识别致命鹅膏,以减少误食中毒事件的发生。致命鹅膏的物种鉴定GBT 2431620091范围本标准规定了致命鹅膏Amanita exitialis Zhu LYang&THLi(-fi实体)的形态学鉴定方法和操作规程。本标准适用于致命鹅膏Amanita exitialis(子实体)的物种鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。21菌环annulus某些伞菌菌柄上呈环状的内菌幕残余物。I-GBT 12728 2006,定义2245322菌托vulva位于菌柄基部的外茵幕残留物。也称脚苞。GBT 12728-2006,定义
3、224623菌髓trama一些担子菌组成菌盖或产生子实层组织的中心部分。GBT 12728-2006,定义224924担孢子basidiospore在担子上产生的有性孢子。如香菇的担孢子。GBT 12728-2006,定义2225125外菌幕universal veil包裹在整个原基或菌蕾外面的膜状物。I-GBT 12728 2006,定义2244326菇蕾(菌蕾)button由原基分化的有菌盖和菌柄的幼小子实体。I-GBT 12728-2006,定义2214327淀粉质amyloid与梅氏试剂反应变蓝色的性质。3原理31分类地位致命鹅膏Amanita exitialis属真菌界(Fungi)
4、、担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomyce一1GBT 243162009tes)、伞菌目(Agaricales)、鹅膏科(Amanitaceae)、鹅膏属(Amanita)。32共生植物致命鹅膏Aexitialis的共生植物为壳斗科Fagaceae植物,目前发现其与黧蒴栲Castanopsis5sa(又称黧蒴、大叶锥、大叶栎)共生(参见附录A)。黧蒴栲在我国贵州南部、广西、广东、湖南、福建、江西等省区均有分布。33鉴定原理根据样品的宏观形态和微观形态特征进行分类鉴定。4试剂41氢氧化钾:分析纯(AR)。42氢氧化钾溶液(50 gL):准确称取氢氧化钾50 g,加蒸
5、馏水溶解并定容至1 000 mL。43碘:分析纯(AR)。44碘化钾:分析纯(AR)。45水合三氯乙醛:分析纯(AR)。46梅氏试剂:准确称取碘05 g、碘化钾15 g以及水合三氯乙醛22 g,混合溶于22 mL蒸馏水中。47刚果红:分析纯(AR)。48刚果红溶液(10 gL):准确称取刚果红10 g,溶于100mL蒸馏水中。49浸镜油。5仪器和设备51光学显微镜。52 目镜测微尺。53放大镜。54盖玻片。55载玻片。56刀片。57镊子。58刻度尺。6致命鹅膏Amanita exltlalis的形态特征(见附录B)宏观特征:菌蕾早期是由白色1A1外菌幕包被的卵圆形个体。成熟担子果小型至中等,偶
6、大型。菌盖直径4 cm9(lS)cm,扁平至平展,有时中央稍下陷,白色IAI,但中央常米黄色-2A2,2A3,光滑,常无菌幕残余,湿时稍沾;菌盖边缘平滑无沟纹。菌肉白色,不变色。菌褶离生,白色1A1,1A2,稠密;短菌褶近菌柄端渐窄。茵柄长7 emil3(20)cm,直径05 cm15(35)cm,近圆柱形或向上稍变细,白色I-1A13,光滑或被白色纤毛状鳞片;内部实心至松软,白色,不变色;基部近球形,直径1 cm2(3)cm。菌柄基部菌幕残余(菌托)浅杯状,游离托檐高达1(2)cm,薄,两面白色1AI;菌环顶生,白色IAI,膜质,宿存,有时在菌盖展开时被撕破消失。显微特征:菌褶两侧型:中央菌
7、髓宽30 pm40 pm,由菌丝(直径2”m6 pm)和椭圆形至梭形的膨大细胞(60$tm90tmX 12 pm20 pm)构成,稀见油质菌丝;侧生菌髓中膨大细胞较多至丰富,棒状至近梭形(40 pm70 pm10 pm20 pm),其间夹杂有丰富的菌丝(直径2 pm6 pm)。担子27 pm55 pm10 pm15 pm,棒状,具2小梗,偶具1小梗;小梗长5 pm7(9)p“;担子基部横隔上无锁状联合。担孢子(90)95 pm120(145)pm(85)90 pm115(130)pm(Qi0i15,Q一108),球形至近球形,稀宽椭圆形,淀粉质,无色,光滑,薄壁;侧生小尖细小。褶缘不育,有大量
8、膨2GBT 243 162009大细胞,近球形至球头短柄状(14 btm25zm13 pm20 pm)或宽棒状(20 pm25 pmX 12 pm15 pm),薄壁,无色,项生,单个或2个3个连成念珠状。菌盖表皮厚30 pm50 pm,其中上层厚15 btm30 hem,由近辐射状排列的菌丝组成,菌丝直径2zm5 pm,胶化,无色透明;下层厚15 pm30 bcm,由近辐射状排列紧密的菌丝组成,菌丝直径3zm8zm,不胶化,无色透明。菌柄基部托檐内部主要由不规则、紧密排列的菌丝组成,其直径2zm7Lm,无色透明,壁薄或稍厚(厚达05Lm),其间夹杂的膨大细胞稀少至少量,居间膨大时近梭形(60
9、pm120 pm15 pm20 pm),偶尔顶生则为卵形(50 pm100 btmX 35 btm80 Fm),无色透明,壁薄;托檐外表面的结构与托檐内部的相同,托檐内表面由胶化的菌丝组成,其直径1 btm5 btm。菌柄菌髓主要由纵向排列的棒状膨大细胞(200 pm400zm20 Fm35 pm)构成,常单个顶生,其间夹杂的菌丝稀少(在菌髓内部)至较多(在菌柄表面),直径2 pm8 pm。茵环由膨大细胞及稀疏排列的菌丝组成:菌丝丰富至大量,直径2 pm7 pm,无色透明,壁薄;其间夹杂的膨大细胞丰富,棒状至宽棒状(30 btm70 pm10 btm25 pm),无色透明,壁薄,常单个顶生。担
10、子果各部位皆无锁状联合。7鉴定71样品选取在检验的样品中选取个体成熟、外观比较完整的进行鉴定。72宏观特征观察用肉眼或放大镜观察样品的各宏观结构,包括菌盖(大小、形状、颜色、边缘有无絮状物、表面附属物、是否粘或干)、菌肉(用刀片切开观察其颜色、是否有伤变色、厚度等)、菌褶(颜色、密度、宽度、形状、生长方式等)、菌环(颜色、着生位置、质地、脱落难易等)、菌柄(大小、形状、颜色、柄基、表面附属物等)和菌托(颜色、形状)等特征,并做详细记录。颜色采用国际真菌学家通用的“Methuen Handbook ofColour”(即Methuen色谱手册)进行描述。73显微特征观察731制片:用锋利的刀片将
11、样品组织块切成薄片,其中对菌褶进行横向切片,菌托进行纵向切片,茵环和菌盖表皮则进行径向切片。将薄片置于氢氧化钾溶液(或梅氏液)中复水。然后小心轻按组织块,除去组织块中的空气,盖上盖玻片。732显微观察:在显微镜的明视野下,观察在氢氧化钾溶液中样品的颜色、菌丝和膨大细胞的排列方向。然后,用镊子圆钝的后端轻轻敲击盖玻片,使菌丝和膨大细胞适度分散,进一步观察研究。最后,用刚果红试剂染色,在明视野或相差下观察、记录。从样品的菌褶上切取细小组织块,用梅氏试剂检测其担孢子壁是否为淀粉质。担孢子的大小在梅氏试剂或氢氧化钾溶液中测量,量其侧面观的长度和宽度,担孢子的侧生小尖不记人长度。根据微观结构的大小,可在
12、不同放大倍数的显微镜物镜下观察,在100倍物镜观察时需在盖玻片上滴浸镜油。733特征描述:担孢子的长或宽以(a)bc(d)表示,90的测量数值落在bc之间,a、d分别为测量数据中的最小值和最大值;担孢子的长宽比用Q表示,而Q(黑体)为多个担孢子长宽比的算术平均值。担孢子的形状术语(如球形、近球形等)严格按Bas(1969)界定的概念。74判定根据样品的宏观特征和显微特征的观察结果,参照致命鹅膏的形态描述,确定样品是否为致命鹅膏Arnanita exitialis。GBT 2431 62009附录A(资料性附录)致命鹅膏的共生植物共生植物:壳斗科Fagaceae植物,目前已知可与黧蒴栲Casta
13、nopslsflss(Champ)RehdWils(又称黧蒴、大叶锥、大叶栎)共生,见图A 1。图A 1 黧蒴栲Castanopsisjsd形态圈附录B(规范性附录)致命鹅膏子实体、担于、担孢于囤致命鹅膏子实体、担子、担孢子见图B 1。1,23f实体4担子;5一一目孢图B 1致命鹅膏子实体、担子、担孢子圄GBT 243162009附录c(资料性附录)致命鹅膏近似种的分类检索致命鹅膏Aexitialis主要特点是担子果小型至中等,白色,菌环顶生至近顶生,菌托牢固,担子具2小梗,担孢子球形至近球形,较大,淀粉质,锁状联合缺乏。在我国,致命鹅膏外表酷似欧氏鹅膏Aoberzoinklerana Zhu
14、 LYang&YoshimDoi和黄盖鹅膏白色变种A5U巧unquillea varalba ZhuLYang。它们均为白色有毒的鹅膏菌种类。它们之间的区别在于:后二者的绝大多数担子具4小梗。此外,欧氏鹅膏菌环较低,菌托易破、含有大量膨大细胞,担孢子较小、椭圆形;而黄盖鹅膏白色变种的菌环着生位置较低,孢子明显较小。参考文献GBT 243 T620091卯晓岚毒蘑菇识别M北京:北京科学普及出版社,1987:I-2162BAS CMorphology and subdivision of Amanita and a monograph of its section LepidellaJPersoo
15、nia,1969,5:2855793 KORNERUP A,WANSCHER J HMethuen Handbook of ColourMLondon:EyreMethuen Press,1978E4胡劲松,陈作红,张志光,等我国鹅膏菌新发现种致命鹅膏(Amanita ezitialis)的肽类毒素分析J微生物学报,2003,43(5):642646E5龚庆芳,魏宝阳,肖桂林,等RP-HPLC法测定鹅膏菌中毒患者体液中的”amanitinJ湖南师范大学自然科学学报,2005(28)2:67696杨祝良中国真菌志第二十七卷鹅膏科M北京:科学出版社,2005:1771807GBT 12728 2006食用菌术语