1、ICS 65120B 46 a亘中华人民共和国国家标准GBT 243 1 82009杜马斯燃烧法测定饲料原料中总氮含量及粗蛋白质的计算Determination of total nitrogen content in animal feeding stuffs bycombustion according to the Dumas principle and calculation ofthe crude protein content2009-09-30发布 2009-12-01实施丰瞀鳃鬻瓣訾矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会履111目 次GBT 243182009前言1范围-12规范性
2、引用文件13术语和定义131总氮含量132粗蛋白质含量14原理-一15试剂-151载气一152燃烧气”153氧化剂154还原剂一l55 吸附剂一156标准物一26仪器-一261分析天平262样品粉碎机或研钵一263样本筛一264锡箔方片、无氮纸或锡囊265杜马斯定氮仪-266稳压电源-27采样和样品制备27i采样-272样品制备”28分析步骤一281校准-282测试样品一283测定”z9结果计算391总氮含量3911直接进样分析样品的总氮含量39I2经浓缩和干燥处理后分析样品的总氮含量392粗蛋白质含量-393结果表示310重复性31i重现性3附录A(资料性附录)本标准章条编号与ISOFDIS
3、 16634：2005(E)章条编号对照4GBT 243182009附录B(资料性附录)附录C(资料性附录)附录D(资料性附录)附录E(资料性附录)附录F(资料性附录)本标准与ISOFDIs 16634：2005(E)技术性差异及原因5杜马斯仪器工作基本流程6蛋白质因子7重复性限和重现性限一8绘制标准曲线11刖 置GBT 243 182009本标准修改采用国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)Cereals，pulses，milled cereal products，oilseeds and animal feeding stuffsDetermination of the tot
4、al nitrogen content by combustion accordingtO the Dumas principle and calculation of the crude protein content(英文版)。本标准根据ISOFDIS 16634：2005(E)起草。在附录A中列出了本标准的章条编号与ISOFDIS 16634：2005(E)的章条编号修改部分的对照一览表。考虑到我国国情，在采用ISOFDIS 16634：2005(E)时，本标准做了一些修改。有关技术性差异已编入正文中并在他们所涉及的条款的页边空白处用垂直单线标识。在附录B中给出了这些技术性差异及其原因的
5、一览表以供参考。为便于使用，本标准根据GBT l_1的要求，对标准的内容做了下列编辑性及结构性修改：“本国际标准”一词改为“本标准”；用小数点“”替换原文中的小数点“，”；用中文标点“。”替换原文中的“”；将国际标准中的前言替换为我国标准的前言。本标准的附录A、附录B、附录c、附录D、附录E、附录F均为资料性附录。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：中国农业大学动物科技学院、北京中科华星科贸有限公司。本标准主要起草人：盂庆翔、任丽萍、郭望山、丁健、戴辉、杨云、周振明、郭凯军。杜马斯燃烧法测定饲料原料中总氮含量及粗蛋白质的计算GBT 2431820091范围本标准规定
6、了饲料原料中总氮含量的杜马斯燃烧测定方法。本标准适用于单一饲料原料中总氮含量的测定和粗蛋白质含量计算，方法的检测限为01 mg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 146991饲料采样(GBT 146991 2005，ISO 6497：2002，IDT)3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31总氮含量total nitrogen content样品中氮
7、的质量百分含量。32粗蛋白质含量crude protein content总氮含量乘以一个换算系数(参见附录D)，以质量百分数表示。4原理在有氧环境下，样品在燃烧管中燃烧加热(约900)，所生成的干扰成分被一系列适当的吸收剂去除，样品中含氮物质被定量转化成分子氮后被热导检测器检测。5试剂本标准所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯。不同分析仪器所用试剂有所不同。51载气氦气(9999)或二氧化碳(9999)。52燃烧气氧气(9999)。53氧化剂根据仪器类型进行选择(氧化铜、氧化铝、氧化镁)。54还原剂根据仪器类型进行选择(铜、钨)。55吸附剂根据仪器类型进行选择(五氧化二磷、固体高氯酸镁、固体碳
8、酸钠)。1GBT 24318200956标准物L-天冬氨酸、EDTA、乙酰苯胺，纯度不低于99。6仪器61分析天平感量为0000 1 g。62样品粉碎机或研钵根据样品的特性选择。63样本筛孔径08 mm1 ram(不含铁材料制成)。64锡箔方片、无氮纸或锡囊锡箔方片、无氮纸，部分仪器采用手工包样，部分仪器采用固体压样器制粒。采用适用杜马斯仪器的锡囊时，可根据样品量不同选择相应规格和结构的锡囊。65杜马斯定氮仪配有热导检测器。66稳压电源200V250V。7采样和样品制备71采样按GBT 146991采样中规定的方法采样。72样品制备选取有代表性的饲料样品至少1 000 g，四分法缩减至100
9、g，磨碎过样本筛(63)，装入密闭容器中，避光保存。8分析步骤81校准开机，根据各自仪器性能和样品特点设置适当的条件，燃烧温度一般为8001 200。待仪器稳定后用天冬氨酸(ctHtNOt)或谷氨酸(csH。NOt)标样做四次重复测定得到日校正因子。杜马斯仪器都带有氮的积分面积绝对氮含量校准曲线。但是，如果日校正因子的偏差大于10，或是更换了热导检测器，应重新绘制校准曲线(参见附录F)。用所得到的日校正因子对所测得的数据进行校正。82测试样品根据样品含氮量，精密称量固体饲料样品01 go3 g，包在杜马斯仪器专用的锡箔方片(或无氮纸)中，待测。液体样品或水分高于17的样品，取10 mL或10
10、g样品于干燥并恒重的瓷坩埚中，准确称量总质量后，于105110干燥1 h以上。直至样品呈固体或半固体状时，再次准确称量总质量并记录。均匀搅拌样品后，取02 go5 g包在各自杜马斯仪器适用的锡箔(或无氮纸)中，精密称量，待测。对于含氮量大于1的液体样品也可直接准确量取03 mLo5 mL(准确至001 mL)测定。将液体样品注入到称量(去皮重)后的锡囊(内装无氮吸附剂)中，精密称量，待测。83测定仪器在测定条件下，按照说明书放人待测物质进行测定。根据仪器及待测物的不同，待测样品将在8001 200的标准化条件下进行定量燃烧。仪器自动将检测信号放大、转换，并将数据传输到外接的微处理器进行处理。2
11、9结果计算91总氮含量911 直接进样分析样品的总氮含量仪器自行计算给出结果，以质量百分数表示。912 经浓缩和干燥处理后分析样品的总氮含量结果按式(1)计算：w(N)一堡L二竺 m1m式中：(N)样品中总氮含量，；u一仪器显示测试样品的总氮含量，；mz坩埚+样品干燥后的质量，单位为克(g)；m坩埚的质量，单位为克(g)；m。坩埚+样品的质量，单位为克(g)。92粗蛋白质含量结果按式(2)计算：w(P)一Fw(N)式中：w(P)样品中粗蛋白质含量，；F蛋白质因子，氮换算为蛋白质的系数(参见附录D)GBT 243182009(N)样品中总氮含量，。93结果表示计算结果表示为三位有效数字。10重复
12、性同一实验室、同一操作者使用同样的仪器、同样的方法、同样的测量物质在较短的时间内所进行的两个独立测量的结果之间的绝对差，5案例不能大于附录E给出的重复性限r值。11重现性不同的实验室、不同的操作者使用不同的仪器、同样的方法、同样的测量物质进行的两个独立测量的结果之间的绝对差，5案例不能大于附录E给出的重现性限R值。GBT 243182009附录A(资料性附录)本标准章条编号与ISOH)IS 16634：2005(E)章条编号对照表A1本标准章条编号与ISOFDtS 16634：2005(E)章条编号对照本标准章条编号 对应ISOFDIS 16634：200S(E)的章条编号511、512535
13、3 5455、5654 5755 585951156 5125136671 772 88 9919381 9483 95、969 1091 101911、912 101192 101293 10211、11110 11211 113124附录B(资料性附录)本标准与ISOFDIS 16634：2005(E)技术性差异及原因表B1 本标准与IsoFDIS 16634：2005(E)技术性差异及原因GBT 243182009本标准的章条编号 技术性差异 原 因1 增加了“方法的检测限为01 mg。” 符合我国标准规定删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中列2 出的一系列ISO国际
14、参考标准，替换为我国现行 与我国现行的标准接轨国家标准删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)32 此内容在附录D中有规定“注一邶注二”删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中我国已不再使用此类吸附剂53删除国际标准IsOFDIS 16634：2005(E)中 此两种材料使用很少，不必在标准中555、56 描述删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中 此为仪器配备耗材，不必安排在标59511 准中删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中的 符合我国现有的杜马斯仪器使用64“注l删注2”，并修改了64的内容 需要简化国际标准ISOFD
15、IS 16634：2005(E)中“杜 此条属于仪器介绍性内容，而非关键65马斯仪器”的内容 性参数或要求，不宜安排在标准中此为维护仪器安全使用的重要参数，强66 增加了“稳压电源”范围调需配置稳压电源将国际标准IsOFDIS 16634：2005(E)中的71 与我国现行的标准接轨ISO国际标准替换为我国现行国家标准将两项内容进行了整合，增加了固体和液体样 符合我国标准的语言逻辑习惯，同时893品的不同测定方法和结果计算方法 增加使用范围删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中的1l 111；删除国际标准IsOFDISl6634：2005(E)中 符合我国标准规定和版式第12
16、章删除国际标准ISOFDIS 16634：2005(E)中附符合我国标准规定采用国际标准附录A 录A，替换为“本标准章条编号与ISO(G13T200002)要求FDIS 16634：2005(E)章条编号对照”删除国际标准ISOFDlS 16634：2005(E)中附符合我国标准规定采用国际标准附录B 录B，替换为“本标准与ISOFDIS16634：2005(E)(GBT 200002)要求技术性差异及原因”删除国际标准ISOFDIS 16634：2006(E)中附附录C 适合我国标准版式录C，替换为“杜马斯仪器工作基本流程”附录F 增加了附录F“绘制校准曲线” 符合我国标准规定GBT 243
17、 1 820096附录C(资料性附录)杜马斯仪器工作基本流程l样品、氧气、二氧化碳c氨气，进样l 氧化后氧化干燥吸附还原再干燥TcD检测器图C1 杜马斯仪器工作基本流程附录D(资料性附录)蛋白质因子表D1蛋白质因子GBIT 243 182009品 种 蛋白质因子大麦 568 583养麦 553椰子肉(未加工) 53 53玉米粉 625棉籽粉(焙炒) 53亚麻粉 541粟(未加工) 583 568芥末粉 54燕麦 55燕麦(燕麦粉，干碾压燕麦) 583花生粉(干制) 546油菜籽粉 553褐米(长颗粒) 595碎米(人工粉碎、机器碾碎、半熟化) 595糙米或褐米(仅去壳的) 5 95稻米粉 59
18、5黑麦粉 564 5 83红花粉 53红花种子(干制) 53 53芝麻(干制) 53 53大豆粉(焙炒) 57l大豆种子粉及其副产品 571向日葵粉 53向日葵耔(干制) 53 53黑小麦 576硬质红小麦 583 561小麦麸皮 526 631小麦糠 545小麦粉或碾碎的干小麦 5838动物饲料原料蛋白质因子，通常为625。7(：BT 243182009附录E(资料性附录)重复性限和重现性限E1下列表E1表E8列出了从多个实验室进行实验测定得出的重复性限和重现性限数据。E2缩写词Mean 样品总氮含量的平均值(，质量)s， 重复性的标准偏差(，质量)RsD(r) 重复性的变化系数()r 重复
19、性限(28S，)Sx 重现性标准偏差(，质量)RsD(R)重现性变化系数()R 重现性限(28SR)表E1动物饲料原料育肥猪 生长猪 雏鸡 玉米大剧火鸡 蛋白 全价 家禽 高NPN育项目 猪日粮牛饲料 猪饲料 狗料饲料 饲料 饲料 混合饲料|饲料 浓缩料 日粮 日粮 肥牛饲料实验室数 9 10 9 10 9 g 9 10 10 10 30 9 9实验结果数 9 20 9 20 9 18 9 20 20 20 150 9 9Meall 174 187 215 243 25l 322 326 418 464 673 905 98 131S。 0023 0021 0022 0023 0029 002
20、7 0041 0035 003 0022 0073 0043 0037RSD(r) 1296 1103 1025 0927 1139 083 1256 0846 O638 0333 807 439 2820063 0058 0062 0064 008 0076 0115 01 0084 0063 207 122 105SR 0058 0039 0051 004 0066 0022 0057 0043 0036 0049 0097 09 015RSD(R) 3311 2083 2257 1652 2628 0694 1734 1019 0765 0732 1072 918 115R 0161 0
21、11l 0142 0114 0184 0063 0158 012 01 014 257 255 043表E2动物饲料粉状饲料项目 肉骨粉 鱼粉 麸质粉 肉粉 羽毛粉 血粉实验室数 9 30 10 10 9 9实验结果数 9 150 20 20 9 9Mean 86 92 1038 1355 1367 1407Sf 038 0088 0046 005 0047 0026RSD(r) 442 0914 0444 037 034 0186108 0246 013 0142 013 0073SR 075 0332 01 0116 008 0112RSD(R) 872 3609 0958 0856 05
22、83 0798R 213 093 0282 0328 0223 0314表E3油籽GBT 243182009项目 芥花籽 芥花籽 大豆 大豆 大豆 大豆粉 大豆粉 大豆粉 大豆粉 大豆粉 大豆粉 大豆粉 向日葵实验室数 9 9 9 9 9 12 13 13 13 14 14 13 9实验结果数 18 18 18 18 18 24 26 26 26 28 28 26 18Mean 334 373 558 656 791 795 797 801 804 804 804 809 296S。 0032 0034 0087 0041 0063 0024 0018 0038 0026 0024 0035
23、0024 0113RSD(r) 0945 0922 1567 0726 0956 031 023 047 031 029 O44 029 3810088 0096 0245 0115 0176 0069 0051 0106 007 0066 0099 0067 0315SR 0046 008 0092 0076 0094 004 0066 004 0074 0058 0072 0058 011RSD(R) 1367 2147 1655 1346 1427 051 083 O5 093 072 09 07 3704R 0128 0224 0258 0213 0262 0112 O186 0112
24、 02 0162 0202 016 0307表E4油籽粉项目 向日葵粉 向日葵粉 油菜粉 棉籽粉 大豆粉 芥花籽粉 大豆粉 大豆粉 大豆粉 花生粉实验室数 23 24 10 24 24 23 9 10 24 24实验结果数 45 47 20 92 47 45 9 20 91 91Mean 332 334 541 662 713 721 73 742 786 825S， 005 004 052 006 004 003 0039 0071 005 003RSD(r) 1506 1198 0961 0906 0561 0416 054 0953 0635 0364014 0112 0147 0168
25、 0112 0084 011 02 014 0084SR 006 011 007 007 008 004 0075 0088 006 007RSD(R) 1807 3923 1297 1057 1122 0555 1031 1182 0761 0848R 0168 0308 0199 0196 0224 0112 0211 0248 0168 0196表E5谷物及小麦粉项目 高粱 玉米 玉米 小麦 小麦粉 小麦粉 小麦粉 小麦 小麦 小麦粉 小麦实验室数 9 9 9 10 17 17 17 9 9 17 9实验结果数 18 18 18 20 85 85 85 18 18 85 18Mean 1
26、42 143 146 178 195 214 223 233 237 276 305S。 0037 0016 0051 0024 0007 0011 0011 0037 003 0016 0025RSD(f) 2586 1117 3513 1324 0368 049 0485 1581 1257 0584 08060104 0045 0143 0067 002 0031 0031 0104 0084 0045 007SR 004 0042 0053 0033 004 0037 0036 0047 0039 0035 0054RSD(R) 2811 2905 3622 1838 203 1743
27、 1621 2035 1629 1272 1785R 0112 0118 0148 0092 0112 0104 0101 0132 0109 O096 01519GBT 243 1 82009表E6大麦项目 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦 大麦实验室数 21 21 21 15 21 21 15 2l 21 21 15 15 9实验结果数 42 4Z 42 30 42 42 30 42 42 42 30 30 18Mea1 1_71 124 128 13 134 151 152 157 161 171 1_77 185 205S， 0008 0013 0
28、012 0016 0006 001 0018 0013 0013 0011 0022 0024 0043RSD(r) 0681 1045 0094 1231 0447 0664 1184 0829 0808 0644 1Z46 1297 20150022 0036 0034 0045 0017 0028 005 0036 0036 0031 0062 0067 0116SR 0024 0025 0023 0037 003 0029 0033 0025 0024 0021 0049 0049 0063RSD(R) 2044 201l 1801 2846 2235 1926 2171 1594 1
29、493 123 2776 2649 3068R 0067 007 0064 0104 0084 O081 0092 007 0067 0059 0137 0137 O176表E7麦芽项目 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽 麦芽实验室效 16 17 21 21 ZO 21 21 16 17 21 21 21实验结果数 32 34 42 42 40 42 42 32 34 42 42 42Mean 123 143 146 146 163 163 17l 177 i86 19 195 203S。 0012 0026 0008 0012 001 0015 0012 00
30、27 0035 0012 0021 0013RSD(r) 0975 1825 055 0823 0614 092 0703 152 1882 0623 1075 06420034 0073 0022 0034 O028 0042 0034 0076 0098 0034 0059 0036SR O033 0048 0024 0025 002 0021 0019 0039 0044 0022 O03 0024RSD(R) 2681 3368 1649 1715 1228 1268 1113 221 2366 1159 1536 1185R 0092 0134 0067 007 0056 0059
31、0053 0109 0123 0062 0084 0067表E8豆类项目 蚕豆 干豆 干豆 干豆实验室数 10 9 10 9实验结果数 20 18 20 18Mean 441 327 348 436S， 0064 0007 0025 0039RSD(f) 1t 445 021 0714 0883O178 O019 O07 0108SR 0089 0065 004 0083RSD(R) 202 1994 1158 1897R 0249 0183 0114 023210附录F(资料性附录)绘制标准曲线GBT 243182009当仪器需要更换热导检测器或发生其他重大变化时，应重新做仪器校准曲线。在仪器适当的条件下，以天冬氨酸为标样，称取23个样品为一个系列，分别为1，2，3，4，7，10，15，20，25，30，50，75，100，125，150，175，200，250，300，350，450，550和650 mg，分别测定总氮量。以峰面积(Y轴)和对应的总氨量(x轴)作图(n一23)。结果表明，在1 mg650 mg绝对氮范围内，有很好的线性关系，见图F1。140 ooo120 ooo蓬80 00060 ooo40 ooo，一1 744 4x一17029 R2120 30 40 50 60 70总氮台量mg图F1标准曲线
