1、中华人民共和国国家标准UDC 837. 127 牛乳检验方法GB 540-85 Analytical methods for milk 本标准适用于生鲜牛乳的检验。1 取样规则1 . 1 每次取样量最少为250ml。取样时要将牛乳混合均匀。取混合样品时，可采取在同一个样品瓶中混匀即可。在贮事L缸取样应开动搅拌器。般取样量为0.21%00 牛乳样品应贮于26，以防变质。1.2检验样品的准备样品应置于1520c11 = T p . ( 5) 式巾符号同式川。2.5 掺水或脱脂的检验与计算对原罪L有怀疑时，应采用“畜舍”乳样进行分析。在无法取得“畜舍”乳样时，亦可从乳样所拥i出的成分计算与规定标准相
2、差之百分率。但在判断掺水时，应以其他方法，如乳清折射率测定或冰点测定来鉴定。加11 健康牛乳中的氯糖数不超过4，患乳房炎的乳中氯糖数则增高。对病牛乳的检查，在牛乳发生疑问时，进行个别牛只的牛乳检查有相当意义。2.6.2血与版的检出用小刀尖取少量的二氨基联苯，将其溶解在盛有2ml96%的乙醇试管内，加人2ml 3 %的过氧化氢溶液，撼匀后再加人34滴冰乙酸。在上述配制的试剂中，加入4-Sml牛乳，如有血与版存在时，在2030S后，液体呈深蓝色。2.7机械杂质的枪出对牛乳中杂质存在的程度有怀疑者，可取500ml或250ml牛乳进行杂质度的测定，测定方法可参剧GB5413-85 2.7条中杂质度的测
3、定，测定结果要换算成lL牛乳中所含杂质的毫克数。2 8碾性物质的检出2. 8. 1 玫瑰红酸定性法2.8.1.1 试邦lj：玫瑰红酸（0.05 %乙醇溶液）。2.8. 1.2 方法z于盛有5ml牛乳的试管中加入5ml玫瑰红酸液，用于指堵住营口，摇匀，手L20000000 A .3 牛乳之界限酸度的测定t:试管内Ju人5ml水、0.25ml附M指示剂（0.5%乙醇溶液），再加5ml碱液。碱校的浓度按所雯洲足的酸度来决寇。此rJ)i.18T 时，用5ml0.018N氢氧化纳溶液。1则应20r H用5mlo.020N氢氧化纳溶液。r i比准备好的碱液巾，加人5ml牛乳，据动混合，如果牛事l必度随过限
4、度时，溶液即行褪色，电吁：lL龄度低f限度时溶液I兰红色。A .4 牛乳酸度的茜素试验Ii, J试iI内）Jll3 5 ml牛乳，再加人专容积的菌素试JfU菌素溶于68的酒精LjJ成为0.2o.4溶液）)Jll以挝tJJ，观察if!it物颜色的变化与形成絮片的特征，牛乳内世乳酸发酵时则颜色变化如r-：见：.A3）。表A3同辈J主r 牛手L与高素混合物的颜色絮片特征17 . 5 走紫红色主；絮片20.0 f是红色二E絮片或1细的草片22.5 ：红色很细或细的絮片2f.O tr棕色细的或通常的絮片:io . o 黄棕色大的或很大的絮片、35.0 在；：黄色式黄色很大的絮片215 GB 5409 8
5、5 牛事L内有凝乳发酵时，牛乳保持红色并形成絮片。A .5 牛乳脂肪快速测定（伊尼霍夫氏喊法）A .5.1 仪器A.5.1.1 盖勃牛乳乳脂计。A.5.1.2 恒温水浴锅。A .5.2 试剂A.5.2.1 碱试齐lj：于第一个烧杯中将30g氢氧化纳用300ml水溶解，于第二个烧杯内将40g无1J碳酸纳溶于300ml水tllI于第三个烧杯内用水将75g氯化纳加热到6570C使其溶解s然后将三种溶液混合到起，注入容积为lOOOml的容量瓶中，用水加至刻度，用脱脂棉滤人试J瓶中，塞紧备用。A .5.2.2 异戊醇乙酣昆合液z将6.5份体积的异戊醇与10.5份体积的96乙醉加以混合。A .5.3 方法
6、用吸管吸取lOml碱试剂，注人事Lil旨计内，再用另一牛乳吸管吸取摇匀的牛乳样品！Oml，注入碱试剂中，然后再加入异rlt醇乙醇混合液1ml，用橡皮案将手L脂计塞紧，将内容物小心混合（振荡，直至出现泡沫使牛乳凝块溶解为止。将牛乳乳脂i十放人7073水浴锅内保挎lOmin，约5min振荡次，水温勿降至70以下。然后将事山旨计倒置，使橡皮塞向下，再置7073c水浴内保持1015min（时间长短取决于泡沫消失速度，至脂肪柱不含泡沫时取出，读数，读数方法同本标准2.3.2.3项规定，所读数字即为脂肪百分率。附加说明：本标准由中华人民共和国轻工收部提出，由黑龙江省军l品工业研究所归口。本标准由黑龙江省现
7、品工业研究所负责起草。本标准主要起草人张保锋、李玉贤、郁蕴华。日本标准实施之日起，原轻工业部部标准QB40-60牛乳检验方法作废。, 216 I GB 5409一1985GB/T 5409一1985牛乳检验后法第1号修改单本修改单业经国家技术监督局于1991年9月10日以技监国标发1991213号文批准，自1991年1 1月1日起实施。增加附录B如下z副主题内容与适用范围附录B牛现冰点下降的测定（补充件）本标准规定了牛乳冰点下降的测定方法，使用的仪器，仪器的校准方法，以及推荐的原乳（畜舍牛乳）冰点下降值的范围及有关解释本标准适用于生鲜牛乳的常规检验。82 引用标准GB 5409-85 牛乳检验
8、方法83 术语定义83. 1 牛乳的冰点下降2牛乳的冰点较纯水的冰点（0.000）为低，原乳（畜舍乳）的冰点下降按国际公认平均值为0.525，其变动范围在o.516o. 533之间，造成原乳冰点下降的原因是由于乳中含有一定浓度的可溶性乳糖及氯化物等盐类浓度能保持平衡，故原乳的冰点下降基本保持一致，只在很小范围内变化B3. 2 牛乳的冰点下降表示方法g用FPO表示，温度用m（摄氏千分之一度）表示，并省略负号，例如冰点下降为一o.525，表示为FPO=525 m c. B3. 3 测温精密度z测温传感器重复多次测定某一恒定温度场时对平均值的正、负偏差83. 4 冰点测定精密度g用冰点仪测定某一标准
9、盐溶液或某一牛乳样品，重复测定多次，对平均值的正、负偏差。B4 原理样品管中放一定量乳样，置于冷阱中，于冰点以下过冷，当乳样过冷至某一固定温度时，进行引晶，结冰后析出热量，使乳样温度回升至最高点，并在短时间内保持恒定，然后温度再继续下降，温度回升所达到的最高点，并在短时间内保持恒定称为冰点温度平台，读取该温度即为乳样的冰点下降值。测定冰点的仪器需要符合本标准要求，并经过已知冰点下降值的标准盐溶液校准。85 仪器时.1 冰点仪主要包括冷阱，搅拌器，引晶装置，温度传感器及温度显示仪表等。B5. 1. 1 冷阱B5.l.l.l 使用33%（体积比）乙二醇水溶液为冷却液，冷阱中要有冷却液液面标志，在使
10、用过程中液面应始终符合标志界限样品管中乳样液面以下部分应全浸在冷却液中。B5.l.l.2 冷阱内冷却液的温度可自动控制在6. 5 8. 5之间的某一恒定温度，要求温度均匀，控制温度值的波动不超过0.5。B5.l.l.3 冷阱应能连续工作不少于8h, B5. 1.2 温度传感器及温度显示B5.l.2.l 可使用热敏电阻，铅电阻，石英晶体等温度传感器。B5.l.2.2 传感器表面应能耐酸、碱、盐的腐蚀。传感器安装在一硬质、绝热、绝缘、直径不大于2. 25 mm的连接杆上，与传感器的连接处应不渗漏溶液，仪器应有国定架，使每次测定传感器能放在样217 GB 5409一1985品管中间固定位置。在样品管
11、的中心轴线上，距管壁保持而定距离。B5.l.2.3 数字温度显示能显示，一号，小数点，一位整数，三位小数。B5.l.2.4 在01之间，温度测量的最大分辨率为lm （。测温精密度士2m ( 传感器时间常数：2S0 B5.l.2.5 冰点测定精密度：土4m。用标准盐溶液或乳样连续10次测定其FPO值，测定值对平均值的偏差应小于土4m C B5.l.2.6 仪器的校准周期：Sh。仪器经校准后，在8h内用同一标准盐溶液反复测定其fPD值测定值之间的偏差不应超过允许精密度，即士4m。B5.l.2.7 仪器应能精确读出最初出现温度平台的温度，温度平台的持续时间应不少于20s 在平台期间温度波动不超过2m
12、。B5. 1. 3 样品管B5.l.3.l 使用玻璃圆柱体试管，底部为半圆形，长度（55.0士。，l)mm，内径（13.0士0.1 )mm。B5.l.3.2 牛乳样晶体积为（3.0士O.l)mL0B5.l.3.3 根据使用的传感器种类及体积的不同，允许采用不同尺寸的样品量。B5. 1. 4 搅拌及引晶装置B5.l.4.l 搅拌使用耐腐蚀，直径为Imm. 5 mm的金属丝在样品管中使用时其末端应与传感器的末端在同一水平面上。B5. 1. 4. 2 金属丝往复振动进行搅拌，振幅约为土1.5 mm，频率约为每分钟120次，需保证在测定时，样品温度均匀，除引晶外，正常搅拌时金属丝不得碰撞传感器或样品管
13、壁。B5.l.4.3 引晶破坏溶液的过冷状态，使样品瞬间结冰，达到冰点温度平台，在引晶时使搅拌金属丝在1 s2 s内加大振帽，使其碰撞样品管壁触发寻晶。BS. 1. 5 仪器内部或外部需有稳压装置，当供电电压波动士10%时，仪器的电压波动不超过1%。B5. 1. 6 在环境温度为oc 35 c时，仪器均能正常工作。B5. 1. 7 仪器在校准及测定前需先通电启动至少Jh0 B5. 1. 8 仪器应具有自动识别冰点平台温度，达到冰点时能自动报警等电脑功能。B5. 2 吸量管或可调连续加液管能量取3ml，允许误差O.I ml, B6 试剂B6. 1. I 蒸馆水使用双蒸馆水，其比电阻大于I.0 M
14、O，总团体量O.1 mg/l，。使用前先煮沸10min 后，在装有二氧化碳吸收管的烧瓶中冷却至（20土2)c 0 B6. 1. 2 氯化销；分析纯试剂。磨细后，在（130土1）灼烧5h，然后置于干燥器中冷却。B6. 2 具有固定FPO值的标准盐榕液。B6. 2. I A标准溶液FPO值408m C于称量瓶中，使用分析天平，称取6.85！）日氯化纳CB6.l.2）溶于少量蒸馆水CB6. l. IJ中，定量转移至1000 mL容量瓶中于（20士2i c用蒸馆水CB6.J.ll稀释至刻度。B6. 2. 2 B标准溶液FPD6QO m。称取10.155 g氯化纳，配法同B6.2.lB6. 2. 3 C
15、标准溶液FPD=531 m。称取8.977 g氯化锅，配法同B6.2.I用于仪器校准状态的常规检查。B6. 3 保存盐标准溶液的规则B6. 3. 1 应保存在聚乙烯或其他塑料制的密闭容器中，容积不超过500mLo B6. 3. 2 保存温度应在5左右，保存期不超过6个月。218 GB 5409一1985B6. 3. 3 当容器中溶液已少于四分之一容积时，该溶液不再使用。取溶液时采用倾倒法，并轻轻摇动混匀，以免混入空气取溶液时不准使用移液管。B6. 4 校准方法仪器应处于良好状态，并经通电启动至少lh0 标准溶液应预冷至与待测样品相同的温度（5（）之间的某一温度，或其他温度）。传感器也应处于同一
16、温度。号晶温度应与测定牛草L样品时相同，可在（I.6土O.I l C时引晶，如引晶温度超出规定范围，或未经引品而自行结冰，则该测定值作废，另取标准溶液重新测定。分别取A、B两标准溶液各3.0 mL，置于样品管中依次测定其FPO值分别调整仪器的校正机构，将读数调整至该溶液的标准FPO值，然后再用新的A、B两标准溶液反复测定，直到仪器不需调整，能正确测得标准溶液的规定FPO值为止。仪器的具体校准方法应参照制造厂的说明书。B7 取样规则B7. I 牛乳的取样方法应按照GB5409 85中“l”取样规则进行。B7. 2 测定FPO值前，样品应先预冷至（5oJc之间，或者使其达到实验室温度，注意务使样品
17、在放入冷阱之前与校准用标准溶液处于相同温度。B8 牛乳样品FPO值的测定方法 B8. I 仪器校准状态的常规检查每天在测定牛乳样品开始以前，应先对冰点仪原来的校准状态进行检查。取C标准盐溶液测定其FPO值，如果测定值与该标准溶液的FPO值相差士4m，则可认为原校准仍然有效，不必再调整仪器，如反复测定仍超过土4m，则需重新校准，调整仪器。B8. 2 测定方法取（3.。士0.I )mL乳样置于清洁干燥的样品管中，传感器、搅拌金属丝也应清洁与干燥，必要时可用清洁与干燥的纱布擦拭。样品应预冷至5oc之间某温度，或达到实验室温度，引晶温度应与校准时相同，即（ . 6士O.I），如引晶超过该温度范围，或未
18、经引品而自行结冰，该测定作废，需重新取样测定。在连续测定的间隔时间内应将温度传感器放入冷阱中的空样品试管内，保持冷却。使用前也应对传感器进行预冷。可先做几个预备测定，当达到重复性良好的测定结果后，再正式测样。每样品应至少进行二次平行测定，偏差士4mC时可取平均值作为结果。平行测定应重新取样不允许试管中样品重复测定。BS. 3 牛乳酸度对FPO值的影响。在测定FPf）值的相近时间内，如果按GB5409 85中2.I. I测得牛乳的滴定酸度超过20。T，则需考虑酸度对FPO值的影响。滴定酸度在20。T33。T之间可按下式估算不同滴定酸度下的FPO值2A=B I. 073 362( T-0. 18)
19、 式中：A为估算FPO值，单位为m。B为测定的FPO值，单位为m。T为以乳酸百分数表示的酸度（每100mL乳中乳酸的克数）。用乳酸百分数oT0.009，将所测。T换算为乳酸百分数。B9 推荐的原乳（畜舍牛乳）冰点下降范围根据对国内原乳取样实测统计，合格生、鲜牛乳冰点下降范围的推荐值如下z508 m C 546 m Co 此项范围已包括早、晚和季节等对牛乳冰点下降的可能影响，与国际公认数据基本相符。原乳中如存在外加水或胶体熔液，会使FPO明显降低，而存在外加可溶性有机、无机物质会使fP219 GB 5409一1985明显升高，都超出原罪L的正常允许FPO范围。如果牛乳的FPO在516m C 546 m之间可作为优质乳，个j品种上限可达557m c 0 牛乳的FPO在507m500 m之间，乳中可能存在少量外来水，可在摸清本地区牛群或单体牛原乳FPO值的基础上对比判断。FPD500 m C或557m，为不合格乳。在上述冰点下降的允许范围内，工厂可制定自己的等级标准。特别是经过对本地区具体牛群或单体牛在畜舍中现场取原乳多次测定其冰点下降值，掌握基础数据后，能够精确制定等级标准。附加说明z本标准由中华人民共和国轻工业部提出。本标准由全国乳品标准化中心归口本标准由东北农学院、全国乳品标准化中心、中国标准技术开发公司负责起草。本标准主要起草人王世平、孙长青、张宝峰220
