1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2285-2009 化妆品体外替代试验实验室规范Good laboratory practice for cosmetics alternative testing in vitro 2009-02-20发布2009-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局SN/T 2285-2009 目Ij1=1 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出井归口。本标准起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人:焦红、程树军、林莉、阳静、马贵平、董益阳。本标准系首次发布的
2、出入境检验检疫行业标准。标准分享网免费下载I SN/T 2285-2009 化妆品体外替代试验实验室规范1 范围本标准规定了从事化妆品体外毒理学安全评价试验时，实验室应遵守的良好规范。本标准适用于从事化妆品原料及产品的安全性评价毒理学动物替代检测实验室。本标准也适用于从事食品及其添加剂、接触材料、化工原料及其产品的安全性评价毒理学动物替代研究与检测实验室。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用
3、文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求(ISO17025: 2005 , IDT) GB 19489 实验室生物安全通用要求ISO 15190:2003 医学实验室安全要求3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 体内试验in vivo testing 利用活体动物或生物进行的试验。3.2 体外试验in vitro testing 用体外培养的细胞或组织进行的试验。3.3 替代aIternatives 改善试验设计和提高试验效率以减少动物的应激(优化替代)，减少某一试验所需动物的数量(减少替代)，以及完全停止某一试验的动物使用(代替
4、替代)，以及为实现上述目的进行的研究。3.4 替代试验aIternatives testing 利用低等动物或利用离体器官、培养的细胞或细胞器、生物模拟系统以优化、减少或代替传统的动物实验，进行毒理学评价、功效性评价和其他生命科学研究。3.5 3R原则3R principle 生命科学研究中应用动物试验普遍应当遵循的原则，指减少实验动物数量、优化现有的动物试验方法和开发新的代替动物试验的技术，以及为实现上述目的所做的努力和措施。3.6 良好实验室规范good laboratory practice, GLP 有关实验室进行试验的计划、执行、监测、记录、报告及档案的组织过程和条件的质量管理系统。
5、1 SN/T 2285-2009 3. 7 3.8 3.9 3. 10 3.11 3.12 3.13 3.14 试验机构负责人testing facility management 管理该试验机构整体作业的负责人。研究负责人study director 某个专题项目负责人。主要研究者principal inv臼tigator执行某项试验的人。在多项试验的研究中作为研究负责人的代表，负责某部分试验的执行。试验点test site 在多地点试验中的某一试验地点。试验点负责人test site management 负责实施在全部研究中某个试验点工作负责人。委托人/方sponsor 委托实验室开展某
6、项试验的机构、组织或个人。主计划表master schedule 试验机构内帮助评估工作量和跟踪研究进程的信息汇编。质量保证计划quality assurance programme 为确保体外试验结果的准确和有效，在研究的全过程中，建立确保研究工作符合良好实验室规范要求的、独立于研究之外的一系列质量措施。3.15 3.16 3.17 3. 18 3.19 2 标准操作规程standard operating procedures , SOPs 描述试验具体规范性操作过程的程序文件。实验计划study plan 确定试验目的和试验设计的文件。试验开始时间experimental startin
7、g date 收集到首批具体试验数据的日期。试验完成时间experimental completion date 收集到最后一项试验数据的日期。计划修正study plan amendment 研究计划签署以后对计划的有意更改。标准分享网免费下载3.20 3.21 研究计划偏离study plan deviation 试验执行中对研究计划元意地偏离。原始数据raw data SN/T 2285-2009 在试验过程中的任何结果观察、实验条件记录、文件或其经确认的复印件等。原始数据可包括相片、微缩影片、计算机打印报表、酷性媒体及自动装置等所得到的观察数据或其记录。3.22 研究报告study r
8、eport 试验项目完成后，报告试验目的、过程、结果和结论的文件。3.23 试验系统test system 用于试验的动物、微生物、细胞和亚细胞以及其他与实验有关的生物、化学、物理设施设备系统的组合。3.24 受试物/供试晶test substance/test material 用于试验的化妆品原料、半成品或产品，以及其他用于体外试验的化学物质、生物材料和物理因子等。3.25 样本specimen 来源于试验系统中用于检验、分析或贮存的任何物质。3.26 1tt batch 在一个规定的生产周期生产出的一定批量的受试物或参照物，被认为有一致的特性，并应标示。3.27 载体/赋形荆vehicl
9、e 用来混合、分散、榕解受试物或对照物，作为携带体有利其应用于试验系统的任何试剂。3.28 对照物或参考物control/reference material 试验系统中用于鉴定测试样本的生物学特性、试验系统的敏感性和特异性的物质，在结果判定时同受试物进行比对的物质。3.29 给样/染毒administration/ application 以一定的方式给试验系统受试物的操作。3.30 剂量dose 试验中给予试验系统受试物的量。3.31 剂量-效应关系dose -effect relationship 表示所给受试物的剂量使试验系统个体或群体发生毒作用强度的关系。3 SN/T 2285-20
10、09 3.32 剂量-反应关系dose -response relationship 表示所给受试物的剂量使试验系统群体中某种毒性作用发生率之间的关系。3.33 组合试验battery 在一个特定的组织或系统内测试不同水平毒性的一组试验。3.34 细胞毒性cytotoxicity 受试物引起细胞损害或死亡的能力。3.35 终点endpoint 毒理学中，由毒性过程引起可定量的生物学改变或效应;也可以指动物试验中不再有信息获得或试验停止的时间点。3.36 光毒性phototoxicity 光线激活或增强一种物质损伤皮肤细胞的能力。3.37 3T3中性红摄取光毒性试验3 T3 NR U testi
11、ng 一项被OECD(世界经济合作与发展组织)认可的替代皮肤光毒性动物试验的细胞学试验。通过比较暴露于受试物的小鼠3T3成纤维细胞在光照条件下细胞活性相对降低的植(中性红摄取能力)，来评价受试物的光毒性。3.38 组织切片tissue slices 一项体外技术。组织被切成统一的薄片，保留固有的细胞类型和立体结构。在多数情况下，组织片可体外保存几小时到几天。3.39 组织培养tissue cuIture 细胞培养cell cuIture 具有相似功能的一群细胞(通常来自动物或人)在特殊制备的试验条件下(营养培养基)生存和增殖的过程。3.40 高通量筛选high-throughput scree
12、ning 基于自动化技术，利用受试物对离体生物系统(基因、蛋白、细胞、组织等)的影响而进行的一种多样本、快捷、自动化的体外试验，以筛选进步研究所用的活性物质。3.41 组织培养histotypic cuIture 器官培养organotypic cuIture 指细胞重新聚集，并重建三维组织样结构的培养，通常是将高密度的细胞培养于滤孔中、饲养层上、支持物(琼脂、胶原等)上、基质(凝胶、蛋白、胶原等)中或悬滴培养的过程。3.42 预验证prevalidation 试验方法开发后，在正式验证前进行的研究，预验证通常包括编码化学品的盲样试验。4 标准分享网免费下载SN/T 2285-2009 3.4
13、3 验证validation 为特定的目的，依据科学的程序对一种试验方法的相关性(relevance)和可信性(reliability)进行评价的过程。3.44 单点研究single-site studies 试验机构、研究负责人和全部的研究过程在一个场所进行。研究负责人是全部研究过程中的唯一责任人。每个专题研究只有一个负责人，一份研究计划和一份研究报告(见图1)。| 委托人| 图1单点研究的组织3.45 多点研究muIti-site studies 一个研究负责人主持并参与的一个试验项目，可以分布在几个不同的独立机构内完成称多点研究。每项多点研究只有一个研究负责人，一份研究计划和一份研究报告
14、(见图2)。多学科参与的安全性评价研究，特别是外源化学物质的毒性研究，通常是多点研究。E亘E二3.46 多研究校验muIti-study trial | 委托人| /才管理者|图2多点研究的组织通常指在预验证或验证研究中，用于对试验方法的可靠性进行以比较为目的的一系列研究。每个研究可能是单点研究，也可能是多点研究的校验过程称多研究校验。如采用盲法试验的实验室间预验证/验证研究，由2个或更多的相关研究点独立完成，每个研究点都有独立的研究负责人、研究计划和研究报告(见图3)。5 SN/T 2285-2009 图3多研究校验组织(包括预验证和验证研究)4 概述4.1 替代方法研究与试验既有器官和组织
15、水平的研究，也有细胞和分子水平的研究;既有法定的检测要求，也有专业的技术研发。作为新兴的学科和专业化程度很高的实验室，在良好操作规范原则下从事体外研究和检测的实验室，其机构、设施和实验系统的设置和管理体系的运行，是提高实验室结果可信度的基本保证。4.2 在国家有关强制性标准颁布之前，从事体外研究和检测实验室的质量监督可以依从或不依从本标准。如果不需依从本标准，试验出具的项目和实验报告必须清楚地描述不依从本标准可能对项目或实验整体性带来的影响。4.3 本标准是体外研究和检测实验室所遵从的质量管理原则，不包括具体的细胞和组织培养检测要求，具体的细胞和组织培养规范将另外建立。体外实验需要遵从的有关生
16、物安全规定参照GB19489 和ISO15190:2003执行。5 组织机构和人员5.1 组织机构从事体外替代研究和检测实验室或其所在的检测机构应有明确的法律地位，应获得检测和校准实验室能力认证和计量认证等相关实验室资质认定。其内部和外部活动应符合GB/T27025-2008的质量规定要求，应有独立的或在组织中有独立的质量管理文件。5.2 组织结构图试验机构要有组织结构图描述组织同试验机构的关系和机构内工作信息传递流向。组织结构图应该明确最高管理者在机构中的位置，明确在实验室良好操作规范构架内每个岗位的主要工作领域和职责。5.3 人员5.3.1 总体要求要按照检验技术层次设机构负责人、研究负责
17、人、研究人员等岗位。应直接任命独立于体外替代检测工作以外的质量保证人员，兼职或者全职执行体外试验实验室质量保证计划，保证实验室的质量体系运行。标准分享网免费下载SN/T 2285-2009 5.3.2 试验机构负责人及其职责试验机构负责人应具备医学、药学或其他相关专业本科以上学历、高级以上专业技术资格、从事专业技术工作的资历和实验室管理工作经验。机构负责人职责为:a) 全面负责试验机构的建设和组织管理;b) 建立工作人员学历、专业培训|及专业工作经历的档案材料;c) 确保各种设施、设备和实验条件符合试验要求;d) 确保有足够数量的工作人员，并按规定履行其职责;e) 建立质量保证部门，直接聘任质
18、量保证人员，并确保其履行职责;f) 每项研究工作开始前，聘任研究负责人，有必要更换时，应记录更换的原因和时间;g) 制定试验机构主计划，掌握各项研究工作的进展;h) 组织制定和修改标准操作规程，并确保工作人员掌握相关的标准操作规程;i) 审查批准实验方案和总结报告;j) 及时处理质量保证部门的报告，详细记录采取的措施;k) 确保供试品、对照品的质量和稳定性符合试验要求;1) 与协作或委托单位签订书面合同。5.3.3 研究负责人及其职责试验机构根据需要聘任某项研究负责人。研究负责人职责为:a) 全面负责该项研究工作的运行管理;b) 制定实验方案，严格执行实验方案，分析研究结果，撰写总结报告;c)
19、 执行标准操作规程的规定，及时提出修订或补充建议;d) 确保参与研究的工作人员明确所承担的工作，并掌握相应的标准操作规程;e) 掌握研究工作的进展，检查各种实验记录，确保其及时、直接、准确和清楚;f) 详细记录实验中出现的意外情况和采取的措施;g) 实验结束后，将实验方案、原始资料、应保存的标本、有关记录文件和研究报告等归档保存;h) 及时处理质量保证部门提出的问题，确保研究工作各环节符合要求。5.3.4 主要研究和一般工作人员及其职责试验机构主要研究人员和一般工作人员应具备严谨的科学作风，良好的职业道德以及相应的学历，具备所承担研究工作需要的知识结构、工作经验和业务能力。应符合下列要求:a)
20、 熟悉本规范的基本内容，严格履行各自职责，熟练掌握所承担工作的标准操作规程，严格按照研究负责人下发的研究计划和SOPs进行操作;b) 及时、准确和清楚地记录试验原始数据，并且对数据的质量负责。对实验中发生的可能影响实验结果的任何情况应及时向研究负责人书面报告;c) 当处理已知或未知甚至危险的试验材料时，应该采取充分的个人健康安全预防措施。根据工作岗位的需要进行安全防护着装，确保供试品、对照品和实验系统不受污染;d) 应遵守定期健康检查制度，长期患有影响研究结果疾病的，不得参加研究工作;健康状况临时对试验有影响的，应暂时离岗，以排除任何影响研究的因素;e) 应经过相应的专业技术培训，考核合格并取
21、得上岗资格。6 质量保证6.1 质量保证计划和人员试验机构应有一个书面的质量保证计划，以确保实施的研究遵循GLP原则。试验机构应制定独立于实验研究之外的质量保证计划和质量保证人员，确保遵从体外试验良好操作规范的要求。质量保证人员的责任如下:7 SN/T 2285-2009 a) 质量保证人员应有试验机构所有批准的最新研究计划和标准操作程序的副本、最新的计划表;b) 应检查确保研究计划和标准操作程序为研究人员适用;检查研究报告中的试验方法、规程和观察是否已被准确和完整地描述，结果是否可以准确而完整地反映原始数据;c) 应在试验过程中对细胞培养设施、仪器设备、材料、环境和人员能力进行定期符合性检查
22、。对信息流程、样品监护、数据交叉点的衔接进行符合性检查。在多点研究时，必须对所有阶段和接口进行监视检查;d) 检查时要保留原始记录，检查结果必须形成书面质量报告;e) 质量报告要及时报告给试验机构负责人和研究负责人，必要时给相关研究人员。接收报告者在规定时间内应对质量报告给以回应;f) 质量保证人员应在研究报告里独立签署质量声明。声明包括研究中的阶段性检查项目、指定检查类型、检查的结果和日期等，以反应原始数据的真实性。声明随研究报告一井上报机构负责人，研究负责人或主要研究者(多点实验时)。6.2 人员培训和记录6.2.1 试验机构应建立人员经常性培训|制度，以达到知识更新可持续发展。6.2.2
23、 应建立每个工作人员的教育背景、资格、经验和现任工作岗位记录以及所受各类培训的档案。培训|档案应连续性记录所有专业人员的培训|情况。包括具体的训练项目、独立操作的能力、培训是否合格、培训|地点等。应明确培训|记录的维护方式和培训|记录归档的地点。7 实验设施7.1 试验系统设施7.1.1 试验机构应提供足够的场地从事体外试验，其建筑和地点的选择应确保研究的有效性，确保研究过程中外界的环境干扰(诸如噪音、光照和生物安全等)减到最小;室内环境以及隔离环境应维持在一定水平。7.1.2 试验机构应有充足的房间或明确的功能区域，测试系统内应有明确的生物安全隔离和防护区，试验系统应与其他工作系统隔离，不同
24、测试项目间应有隔离。7.1.3 应给样品和设备提供贮藏室。贮藏室及其位置或设备必需与试验系统的房间、区域或设备分开，采取充分的保护措施以免被污染和(或)破坏。7.2 受试物、对照物和受控物的设施7.2.1 防止污染或交叉污染，应有独立的房间、区域或贮藏柜用于接收和贮存测试物、对照物和受控物。受试物、对照和受控的混合物的运输应严格操作以阻止污染和交叉污染。7.2.2 应有充足的独立的受试物和对照物的配制和贮存设施，确保贮藏区与测试区分开设置;有害物质应有专门的区域安全存贮，防止试验系统受污染和(或)破坏。7.3 档案设施具备保管实验方案、研究计划、各类标本、原始记录、总结报告及有关文件档案的设施
25、。档案设施应该提供保存和检索功能，档案设计和档案情况必须能保护内容免受破坏。7.4 废物处置应有独立的、清洁的、集中和稳定的清洁处理区域。8 仪器设备和实验材料8. 1 体外研究(如细胞和组织培养)应在垂直层流生物安全柜内进行，应有适应研究工作量的生物安全柜和通风柜设备，以保护研究人员，测试环境和测试系统的安全元污染。8.2 构成体外研究的样品、材料和设备等应保证元交叉污染，应有充足的样品和试剂的储存转移设备标准分享网免费下载SN/T 2285-2009 和器材，例如冰箱，冷冻机，低温冰箱，液氮罐，保温瓶等。8.3 要确保所用仪器设备的准确度和精确度，应按照国家有关标准实施计量标定，定标精密度
26、的最低限度必须满足制造商的要求。8.4 实验设备应定期检查、清洗、维护、监测和校准，应建立阶段性评估和维护记录。设备的温度、温度、二氧化碳含量等参数应每天记录、调整和归档保存。8.5 为防止污染或交叉污染，测试物、对照物和受控物质应有独立的贮藏柜用于接收和贮存。如体外试验同微生物检验在一起，要与培养物如烧瓶、试管和平板培养等隔离。8.6 用于研究的化学制品、试剂和榕液，直接购买的介质、组织和细胞等应及时加贴标签，标签要标明浓度，有效期限和具体存贮要求(如适用，需简略标示使用指导)。为便于结果溯源，应建立介质，组织和细胞的来源、准备日期和稳定性等信息附表，归档保存。8. 7 实验器皿等载体上的测
27、试、对照和受控的混合物质应进行安全有效地处理，确保清洁后再用，防止污染和交叉污染。8.8 确保有适当的废弃物存贮和处置设施和设备，对用过的用具和废弃物要及时处理并记录。9 标准操作程序9.1 试验机构负责人必须保证同研究和检测质量有关的各操作环节都有特定的标准操作程序(SOPs) ，在SOPs中每个人都有自己的职责，在多项目研究中，SOPs可以被分配到每个人。9.2 研究负责人应定期对SOPs进行检查，及时批准和发布新增加的和修改过的内容，被更换的SOPs文件应该以历史文件的形式进行维护。9.3 SOPs的编辑和管理应规范化。9.4 在多点研究中，试验机构可给其他试验点提供参考SOPs，以减少
28、工作量和保证每个试验点操作的统一。9.5 试验机构根据需要必须或不限于建立下列标准操作规程(SOPs): 标准操作规程的编辑和管理;质量保证程序;实验室的准备及环境因素的调控和记录;实验设施和仪器设备的维护、保养、校正、使用和管理;良好细胞培养程序;f共试品和对照品的接收、标识、保存、处理、配制、领用及取样分析;各种实验样品的采集、编号和各种指标的检查和测定等操作技术;清洁去污和废弃物处置规程;各种实验数据的管理和处理;计算机系统的操作和管理;实验报告的管理;人员培训|管理标准操作程序;工作人员的健康检查制度;留样保管以及留样处理管理程序;需要制定标准操作规程的其他工作。10 研究工作的实施1
29、0. 1 一般要求10. 1. 1 每项研究都应制定一个书面的实施方案。研究方案由研究负责人制定，质量保证人员核实，经委托方同意，试验机构负责人批准签名后方能实施。9 SN/T 2285-2009 10. 1.2 如实验过程中需要修改实施方案，则应对原方案的偏离进行描述、解释，经研究负责人批准签名，以维护研究方案原始数据的真实性。10.2 实施方案的内容10.2. 1 一般情况说明，包括:研究项目名称、研究目的、受试物代码或名称(如:IUPAC、CAS码)，理化特征等，使用的阴性对照和阳性对照物。10.2.2 委托方和试验机构信息，包括:委托方名称和地址，联系人和电活，试验机构和(或)试验点名
30、称和地址，研究负责人姓名和电话，质量保证人员姓名电话以及机构负责人姓名电话等。10.2.3 研究日期的记录，包括:研究方案被研究负责人批准签名日期，研究方案被试验机构负责人和委托方批准和签名日期，提出实验开始和实验完成日期。10.2.4 测试方法的描述:方案中应描述研究所使用的方法来源，如:参照OECD试验指南或者其他试验指南和方法、国家标准、行业标准或者经验证和认可的实验室方法等。10.2.5 测试系统选择的原因及合理性，如:生物系统的种属来源、组织起源，供应商信息，细胞传代、培养情况和其他信息;生物系统染毒次数和间隔、染毒剂量大小和(或)浓度、处理总次数和每一处理的重复次数等。10.2.6
31、 实验设计的详细信息，包括:具体研究的技术路线，使用的阳性对照和阴性对照，分析方法类型和频率，需要测量、观察和检查的内容，研究结果验收分析的标准，需要统计的数据等。10.2.7 实验方案中应有所有实验记录的清单以及存放地点。10.2.8 受试物或样本以及试验参照物的留样应妥善标记，按不同样品保管规定和要求保管。阳性结果样品保存不少于半年，阴性样品保存3个月，留样到期后按样品处理要求处理留样，有生物安全要求的按生物安全要求处理。10.3 实验报告10.3. 1 研究工作结束后，研究负责人应及时写出总结报告，签名或盖章后交质量保证部门负责人审查和签署意见，机构负责人批准。批准日期作为研究结束日期。
32、10.3.2 实验报告经机构负责人签字后，需要修改或补充时，有关人员应详细说明修改或补充的内容、理由和日期，经研究负责人认可，并经质量保证部门负责人审查和机构负责人批准。10.3.3 实验报告及其记录格式应该服从GLP原则，如有偏离应清楚地描述偏离GLP的情况。GLP服从声明必须由研究负责人签字和注明日期，任何不属于GLP计划范围内的试验点要特别注明。10.3.4 实验报告主要内容如下:10 研究专题的名称或代号及研究目的;受试物/供试品和参照物信息:名称、缩写名、代号、批号、稳定性、含量、浓度、纯度、组分及其他特性;与委托方和试验机构有关的信息;试验起止日期;受试物和对照品的染毒途径、剂量、
33、方法、频率和染毒期限;影响研究可靠性和造成研究工作偏离实验方案的异常情况;各种指标检测方法和频率;研究负责人与所有参加工作的人员姓名和承担的工作内容;分析数据所采用的统计方法;实验结果和结论;声明:质量保证人员的独立质量保证声明;原始资料和标本的保存地点。标准分享网免费下载SN/T 2285-2009 11 档案存储与保管11.1 研究工作结束后，研究负责人应将所有与实验有关的资料整理汇总交资料档案室保管。以下资料应依照实验机构规定的保存期限，保存于档案中:每项研究的实验方案，原始数据，各种书面文件以及进度表，总结报告的原件和最终报告;质量保证部门的检查报告，所有检查的文字记录，独立质量保证声
34、明;人员资质、培训|、健康体检、工作经历和从事研究岗位的记录;仪器维护和校准的记录和报告;计算机化的系统确认文件;关于所有标准操作程序的历史档案;环境监控记录;研究项目被取消或中止时，研究负责人应书面说明取消或中止原因，并将上述实验资料整理归档。11.2 资料档案室应有专人负责，按标准操作规程的要求进行管理。11.3 实验方案、标本、原始资料、文字记录，总结报告以及其他资料的保存期，应至少3年。质量容易变化的标本，如组织器官、电镜标本、血液涂片等的保存期，应以能够进行质量评价为时限。11.4 保留的档案内材料应编制索引，以便存储和查阅。11.5 任何人查阅和使用档案应有机构负责人授权批准，查阅和使用时间应完整记录。白CON-mNNH军中华人民共和国出入境检验检疫行业标准化妆品体外替代试验实验室规范SN/T 2285-2009 兴中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷兴印张1字数22千字2009年5月第一次印刷开本880X12301/16 2009年5月第一版印数1-2000定价18.00元兴书号:155066.2-19668 SN/T 2285-2009 标准分享网免费下载
