1、ICS 65020B 04中华人民 ，-H、-禾I口，、n 国国家标准农业部953号公告一1242007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫棉花第4部分：生物多样性影响Evaluation of enviromnental impact of genetically modifiedplants and itS derived productsInsect-resistant cottonPart 4：Impacts on biodiversity200712一侣发布 20080301实施中华人民共和国农业部发布刖 茜农业部953号公告一1242007本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全
2、国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。本标准附录A为资料性附录。本标准起草单位：农业部科技发展中心、中国农业科学院棉花研究所、中国农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：崔金杰、沈平、吴孔明、雒瑁瑜、张永军、厉建萌、马艳、陈海燕、王春义。本标准为首次发布。农业部953号公告一1242007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫棉花第4部分：生物多样性影响1范围本标准规定了转基因抗虫棉花对棉田生物多样性的检测方法。本标准适用于转基因抗虫棉花对棉田主要害虫及优势天敌种群数量、节肢动物群落结构、主要棉花病害影响的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注
3、日期的引用文件，其随后所有的修改单(但不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 44071经济作物种子棉花农业部953号公告121 2007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫棉花第1部分：对靶标害虫的抗虫性3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3 1靶标生物target organism转基因抗虫棉花中目的基因所针对的目标生物。32非靶标生物non-target organism转基因抗虫棉花中目的基因所针对的目标生物以外的其他生物。4要求41试验品种转基因抗虫棉品种、
4、对应的菲转基因棉花品种和当地常规棉花品种。种子质量应达到GB 44071中对棉花种子的要求。4 2其他要求按农业部953号公告一1212()07中“4要求”执行。5试验方法5 1试验设计随机区组设计，小区面积不小于300 m2，三次重复，常规耕作管理，全生育期不应喷施杀虫剂。5 2播种按当地春棉或夏棉(短季棉)常规播种时间、播种方式、播种量进行播种。1农业部953号公告一12420075 3调查记录531对棉田节肢动物多样性的影响5 3 1 1调查方法直接调查观察法：从棉花出苗至吐絮，每7 d调查一次。每小区采用棋盘式取样方法调查10个样点，每点调查5株棉花。记载整株棉花(伏蚜只调查上部倒数第
5、三片展开叶)及其地面各种昆虫和蜘蛛的数量、种类和发育阶段。开始调查时，首先要快速观察活泼易动的昆虫和(或)蜘蛛的数量。对田间不易识别的种类进行编号，带回室内鉴定。吸虫器调查法：在棉花生长的苗期(46片真叶)、蕾期、花期、铃期、吐絮期各调查一次，共计五次，每小区采用对角线五点取样。每点用吸虫器吸取5株棉花(全株)及其地面1 1T12范围内的所有节肢动物种类。将抽取的样品带回室内清理和初步分类后，放人75乙醇溶液保存，供进一步鉴定。531 2结果记录记录所有直接观察到和用吸虫器吸取的节肢动物的名称、发育阶段和数量。5 3 1 3结果表述运用节肢动物群落的多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数3个指
6、标，分析比较转基因抗虫棉田节肢动物群落、害虫和天敌亚群落的稳定性。节肢动物群落的多样性指数按公式(1)计算：H一P，lnP：(1)T1式中：H 多样性指数；P，一N：N；N： 第i个物种的个体数；N总个体数；s物种数。计算结果保留2位小数。节肢动物群落的均匀性指数按公式(2)计算。，一HlnS(2)式中：J 均匀性指数；H 多样性指数；s 物种数。计算结果保留2位小数。节肢动物群落的优势集中性指数按公式(3)计算。C一(N。N)2(3)iI式中：C 优势集中性指数；N： 第i个物种的个体数；N 总个体数。汁算结果保留2位小数。5 3 2对靶标害虫和主要非靶标害虫及其天敌种群数量的影响532 1
7、调查方法2农业部953号公告一1 242007每小区采用棋盘式取样方法调查10个样点，每点调查5株棉花，每7天调查一次。调查的靶标害虫包括棉铃虫、红铃虫；其他鳞翅目害虫包括小地老虎、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、棉造桥虫、玉米螟等；其他主要刺吸性害虫包括棉蚜、棉叶螨、炯粉虱、棉叶蝉、棉盲蝽；主要天敌种类包括七星瓢虫、龟纹瓢虫、草间小黑蛛、狼蛛、小花蝽、草蛉、中红测沟茧蜂、齿唇姬蜂等。532 2结果记录记录每次调查的棉铃虫的落卵量、幼虫龄期和数量，其他害虫及天敌的数量。5 3 3对棉花主要病害的影响5 3 3 1调查方法采用对角线5点取样法，每点连续调查相邻两行的20株棉花。分别在棉花苗期、现蕾期、花铃期
8、、吐絮期，调查35次棉花苗病、黄萎病、枯萎病发生情况。棉花枯萎病和黄萎病的分级标准按附录A表A1、表A2执行。5 3 3 2结果表述对棉花苗病、黄萎病、枯萎病和棉铃病发病情况用发病率D表示，按式(4)计算：D一=N100(4)式中：D一 发病率，单位为百分率()；N 病株数，单位为株；T 调查总株数，单位为株。对棉花黄萎病、枯萎病发病严重程度用病情指数表示，按式(5)计算：y(NR)7一气沥r10。(5式中：J病情指数；芝： 调查病害相对病级数值及其株数乘积的总和；N 病害某一级别的植株数，单位为株；R 病害的相对病级数值；M病害的最高病级数值；了、调查总株数，单位为株。5 4结果分析用方差分
9、析方法分析比较转基因抗虫棉花与非转基因棉花对主要害虫及天敌种群数量、节肢动物群落结构和主要病害的影响。农业部953号公告一12 42007附录A(资料性附录)表A 1 棉花枯萎病发病分级标准病情分级 症状描述 抗病级别的划分。级 健株，无症状表现 1 免疫 相对病指为o1级 病株叶片25表现典型病状 2 高抗 相对病指O5o2级 病株叶片2550表现病状矮化 3 抗病 相对病指5 1lOo3级 病株叶片5090表现病状，病状明显矮化 4 耐病 相对病指lO120 o4级 病株叶片全部病状枯萎落叶至桔死或急性枯死 5 感病 相对病指220o表A2棉花黄萎病发病分级标准病情分级 症状描述 抗病级别的划分。级 棉株健康，无病叶，生长正常 l 免疫 相对病指为o】级 棉株发病叶片低于25，变黄萎蔫 2 高抗 相对病指O-lOo2级 棉株发病叶片2550，变黄萎蔫 3 抗病 相对病指lO 1-20 o3级 棉株发病叶片5075，变黄萎蔫 4 耐病 相对病指20135 o4级 棉株发病叶片75以上，或叶片全部脱落，棉株枯死 5 感病 相对病指35o
