1、中华人民共和国国家标准水果、蔬菜汁游离氨基酸含量的测定J uice 01 fruits and vegetables -Determination 01 free amino acid 1 主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。2 测定原理GB 12292-90 水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂，固定及净化氨基酸。用2mol/L氢氧化钱把氨基酸洗脱后，脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。s 仪器设备3.1 氨基酸分析仪或高压液相色谱仪，3.2 玻璃柱，高20cm，内径2c m. 3.3 捣碎机B3.-4 离心机，3.5 天乎g3.6 旋转蒸发器。3.7 真空r
2、J撮器。4 试剂全部试剂均为分析纯，配制IJ式剂均用去离予水。-4. 1 阳离f交换树脂.Dowex 50Wx 4型.100 -200日，或其他适宜的树脂04.2 盐酸溶液6 mol/L. 0.1 mol/Lo 4.3 氢氧化镀溶液2mol/L。4.4 氢氧化生内溶液3.5mol/L。4.5 每种氨基酸标准溶液。.0025M。4.6 仪器分析用的各种缓冲液。4.7 仪器分析用的部三M试剂。5 试样选取和制备5.1 液体产品需充分混匀。5.2 刮体产品选取有代表性的水果和蔬菜洗净，擦f.剥去或削去果皮，用四分法取中学150g左右。5.3 称牛羊称取样品100-150臣，准确至0.01g.置于捣碎
3、器的玻璃缸内，加入等量的水。5.-4 样品捣碎将盛样品的玻璃缸装在捣碎机上，在1档速度撼碎1m in，取出倒人烧杯中。5.5 过滤及离心把已捣碎的样液过滤，吸取10mL滤液放入离心管中，在4ooor / m川的转速F离心15mI n。国家技术监督局1990-03-29批准1990-12-01实施l( GB 12292-90 5.6 脱果胶对含果胶丰富的样被需用乙内lk处f哩，准确吸取样液5mL.hu人34mL96%乙醉.i1草，用15mL80%乙酌分二次冲洗滤纸，将滤液在35CT减压蒸馆。6 分析步骤6.1 内定柱的装置将Dowex 50Wx 4树脂装入玻璃圆柱巾，离上端空出约10cm，用6m
4、 011 L 盐酸250mL活化树脂，然后用水洗至无氯离F为止(用硝酸银检查，不产t白色沉淀。调节ff;塞，使溶液流速为lmL(min。6.2 叫定及洗脱吸取5mL样被或液体产品，除果胶物的样液则取仓邸，置玻璃圆柱，f .再川5mL水，待液体通过树脂后再加2moljL氢氧化钱50mL.可分3-4次加l右，用50mL水洗涤，将刷l2 m 01 j L氢氧化钱流出的溶液收集在圆底烧瓶内，在减压真空和加热(40-45C)条件下蒸发至I , 用5mLO.lmoljL盐酸溶解。6.3 脱氨吸取寺祺j液1m L.加入3.5mol/L氢氧化纳溶液2-3滴，i周至pHlO-l1.放在FL空燥器中减压蒸。用lm
5、L水洗涤，再抽贞空蒸l工。这样重复2次.bu人pH2.2缓冲液。.5mL 和0.1mol/L盐酸。.5m L.使pH达到2.2.再稀释5-10倍后测定。6.4 测定用氨基酸分析仪测定氨基酸含量，测定前需做2-3个氨祟酸标样，待仪器稳定后再测i式样。7 结果计算7.1结果表示用mgjkg或mgjL。7.2 计算公式某个氨某酸含量(mg(kg) NG =一一一xl0-3xdm NG 某个氨占主酸含量(mg(L);一:x 10-: x d 1 I 式CfJ，NG一一从仪器测得的某个氨基酸的质量.N g , m-一一新鲜样品重.g , mL一一一原始取样体积，m L J d一一稀释(汗数。7.3 允许差水果、蔬菜I游离氨基酸、卡行测定的结果，相对相差不得大f5%。附加说明:本标准由1华人民共和国农业部提出。本标准由小国农收科学院分析测试中心负责起草。本斩、准由1:海农科院分析中心参加起草。本标准主要起草人李伟格、顾金炎、陈必芳。本标准参照采N F V 76-115 1983 (水果蔬菜ncf游离氨基酸的视U.)。170
