1、ICS 67.050 X 04 中华人民=H工.;、和国国家标准GB/T 20755-2006 畜禽肉中九种青霉素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法Method for the determination of nine peniciIlins residues in livestork and poultry muscles一LC-MS皿MSmethod 2006-12-31发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2007-03-01实施发布GB(T 20755-2006 前言本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局提出。
2、本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。本标准主要起草人:庞国芳、李学民、张进杰、曹彦忠、刘晓茂、范春林、刘永明、赵为。本标准系首次发布的国家标准。I GB/T 20755一-2006畜禽肉中九种青寓素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法1 范围本标准规定了牛、羊、猪和鸡肉中九本标准适用于牛、羊、猪和鸡本标准的方法检出限:荼西林为l.0g/kg，阿莫西2 规范性引用文件的修改单(不包括是否可使用这些(GB/T 6379. 1 GB/T 637 性与再现性的GB/T 3 原理固相萃取柱净化4 试剂和材料除另有说明外，4. 1 甲
3、醇:色谱纯。4.2 乙腊z色谱纯。4.3 磷酸二氢铀(NaHzP4.4 氢氧化铀。4.5 乙酸。4.6 乙腊+7.)(0+1):量取50mL乙腊kg，眼拉西林、青霉素V、苯I哇期陶引用文件，其随后所有标准达成协议的各方研究标准。分:总则与定义准测量方法重复: 1987) 4. 7 氢氧化铀溶液:5 mol/L。称取20g氢氧化铀(4.4) ，用水溶解，定容至100mL。4.8 磷酸二氢铀缓冲榕攘:0.15mol/L。称取18.0g磷酸二氢饷(4.3) ，用水潜解，定容至1000 mL, 然后用氢氧化铀梅液(4.7)调节至pH=8.504.9 阿莫西林、氨书西林、服拉西林、青霉素G、青霉素V、苯
4、嗖西林、氯I挫西林、荼夫西林、双氯西林九种青霉素标准物质:纯度二三99%。4. 10 九种青霉素标准储备潜液:准确称取适量的每种标准物质(4.9)，分别用水配制成融度为l. 0 mg/mL的标准储备梅液。储备液贮存在一180C冰柜中。4. 11 九种青霉素标准工作榕液:根据需要吸取适量的每种青霉素标准储备梅被(4.10)，用空白样品提GB/T 20755-2006 取掖稀释成适当被度的基质1昆合标准工作溶破。4.12 BUND ELUT Cl8固相萃取柱戎相当者:500mg , 6 mL。使用前分别用5mL甲醇(4.1)、5mL 水利10mL磷酸二氢铀缓冲溶被(4.8)预处理，保持桂体湿润。4
5、.13 0.2m滤膜。5 仪器5. 1 皮相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子掘。5.2 分析天平t感量0.1mg和0.01go 5.3 振蔼器。5.4 固捆萃取真空装置。5.5 贮被器:50mL, 5.6 做量注射器:25L，100L。5.7 刻度样品管:5mL，精度为0.1mL。5.8 离心机:带有50mL具塞离心管。5.9 p日计:测量精度0.02pH单位。6 现!tl定步骤6. 1 试样溶液的制备称取3g试样(精确到0.01g)置于离心机(5.8)中，加入25mL磷酸二氧铀缓冲溶被(4.8)，于振蔼器上振荡10min，然后，以4000r/min离心10min，把上层提取液移至下接B
6、UNDELUT Cl8回扣萃取柱(4.12)的贮破器中，以3mL/min的流速通过固柜萃取柱后，用2mL 7.)50 士202050 士251020 土30AU-nu /词一士6.2.3.2 定量测定用九种青霉素标准储备榕液配成的基质提合标准榕液(4.11)分别进样，以标准工作潜藏浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品带掖中九种青毒素的晌应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱条件下，九种青霉素标准物质的总离子流图参见图A.1.九种青霉素的保留时间见表40表夫回林氯西林本方法的6.3 平行试验按上述6.4 空白试验除不称取7 结果计算试样中青毒素
7、残(1)计算zv , .1 000 X=cX一X一一一m . . 1 000 式中:X一一试样中被测组分残留置，单位c一一从标准工作曲线得到的试辑、中被测组分的V一一试样潜被定容体积，单位为毫升J兰嘀嘀阻翻酣卢m一一一最终试样溶被所代表的试样质量，单位为克(g)。注:计算结果需将空白值扣除。8 糟曹度本标准的精密度数据是按照GB/T6379. 1和GB/T6379.2规定确定的，其重复性和再现性的值以95%的可信度来计算e8. 1 重复性在重复性试验条件下，获得的两次强立测试结果的绝对差值不超过重复性限r，试样中丸种青毒素为纳克每毫升(ng/mL); 4 GB/T 20755-2006 含量范
8、围及重复性方程见表5.表5九种青a素含量范围及重复性和再现性方程再现性限R重复性限r含量范围/(问/kg)青霉素名称IgR=O. 988 11gm一0.9461 Igr=O. 924 81gm- 1, 3073 2.0-20 阿莫西林IgR=O. 985 71gm-0. 946 4 Igr=O. 95111gm- 1, 3831 2.0-20 氨韦西林IgR=O. 993 Olgm一0.9616 r=O. 018 2m+0. 036 2 1-10 服拉西林IgR=O. 968 31gm一0.9527 Igr=O. 325 21gm-1, 326 0 0.5-5 青霉素GIgR=l. 020 l
9、lgm-O. 975 4 1-10 青霉素VIgR=O.992 11gm-0. 961 6 1-10 苯略西林0.997 31gm一0.9582 中九种青霉素5 2-20 氯瞠西林UMW川剧阳地也如果两次测定值再现性在再现性试含量范围及重复性茶夫西林双氯西林8.2 附录(资料性附录)九种青霉素标准物质的总离子流圈A G/T 20755-2006 九种青霉素标准物质的总离子流图，见图A.LNN.国同。、s时 同咱H pw 3 CVD 3 营电. 蜘叫。M畸3鸣同时甘.凹F叫.的F叫 L . 。3 0万飞3.ge5 3.0e5 2.0e5 1. Oe5 mRH川向四口制UH0.0 t/min 15
10、 10 5 l一一阿莫商林，2.50ITlin; 2一氨节西林，9.82ITlin; 3一-P，辰拉西林，11.79 miu; 4一一青霉素G，12.71 min; 5一一-青霉素V，13.48 min; 6一一苯瞠西林，14.18 ml1; 7-一-氯嗖西林，15.22min; 8一一-茶夫西林，15.45mn; 9-一一双氮西林!17.30 min。九种青.素标准物质的总离子流圈图A.1 6 附录B(资料性附录)回收率九种青霉素添加故度及其平均回收率的试验数据，见表B.LG/T 20755-2006 表B.1九种青Z毒素添加浓度及其平均回收率的试验数据青霉素名称添加浓度/cg/kg)回收率
11、/c%)2.0 73.1 4.0 75.6 阿莫西林8.0 73.6 20.0 78.6 2.0 82.6 氨节西林4.0 85. 7 8.0 89. 7 20.0 97.2 1. 0 81. 7 2.0 90.9 lJJR拉西林4.0 98.2 10.0 95. 7 O. 5 85.9 青霉素G1. 0 92.5 2.0 103.4 5.0 89.8 l. 0 86.4 青霉素V2.0 89.6 4.0 96.5 10.0 93.4 O. 25 82.5 O. 5 105. 6 茶夫西林1. 0 95.9 2. 5 94.3 1. 0 90. 7 苯I些西林2. 0 97.3 4.0 85.
12、6 10.0 90.5 2. 0 89.2 氯也西林4.0 84. 7 8. 0 97.2 20.0 87.6 2. 0 87.3 4. 0 91. 7 双氯西林8. 0 82.4 20.0 97.1 CON-mmhONH阁。华人民共和国家标准畜禽肉中九种青霉素英药物残留量的测定施相色i普串联质谱法GB/T 20755-2006 国中+毛中国标准出版社出版发行北京复兴门外三旦河北街16号邮政编码:100045网址. c口电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销引&印张O.75 字数15千字2007年3月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2007年3月第一版定价14.00元* 书号:155066 1-28935 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533G8/T 20755-2006
