1、ICS 67.050 X 04 中华人民共和国国家标准GB/T 20759-2006 畜禽肉中十六种磺肢类药物残留量的测定液相色谱皿串联质谱法Method for the determination of sixteen sulfonamide residues in livestock and poultry muscles一LC回MS-MSmethod 2006-12-31发布中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会2007-03-01实施发布中华人民共和国国家标准畜禽肉中十六种磺股类药物残留蠢的删定液相色i蕾串联质谱法GB/T 20759-2006 9峰中国标准出版
2、社出版发行北京复兴门外三里?可北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销峰开本880X12301/16 印张0.75字数17千字2007年3月第一版2007年3月第一次印刷* 书号:155066 1-28937 定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533 GB/T 20759-2006 目U亩本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局提出。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局归口。本标准起草单位1中华人民共和国秦
3、皇岛出入境检验检疫局。本标准主要起草人:庞国芳、曹彦忠、贾光群、张进杰、范春林、李学民、刘东明、石玉秋。本标准系首次发布的国家标准。I 1 范围畜禽肉中十六种磺肢类药物残留量的测定液相色i普-串联质谱法GB/T 20759-2006 本标准规定了牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉亚细且极磺腊类药物残留量液相色谱-串联质谱测定方法。磺腊苯H比盹为40.0 2 规范性引用文CGB/T 6379. 11 GB/T 63 性与再现性的井用正己:境脱脂后，4 试剂和材料除另有说明外，所用、4. 1 乙睛:色谱纯。4.2 异丙醇04. 3 正己蝇。4.4 乙酸锁。4.5 元水疏酸铀:经6500C灼烧4h，置于干燥器中
4、备用。4.6 流动相:乙腊+0.01mol/L乙酸镀榕液(12十88)。二甲唔院为20.0g/kg，残渣用流动相梅解，4. 7 磺腊醋酷、磺胶甲喔二略、磺胶二甲异F恶盹、磺胶氯瞌畴、磺腊唔班、磺脏甲基异嗯嗤、磺胶哇哇、磺胶-6-甲氧嘈脏、磺股甲基嘀脏、磺腊邻二甲氧喃晓、磺牍口比院、磺腊对甲氧喃院、横股甲氧咀嚼、磺股二甲喃院、磺腊苯毗略、磺腊间二甲氧嘈睫标准物质:纯度注99%。4.8 十六种磺腊标准储备榕掖:0.1 mg/mL准确称取适量的每种磺胶标准物质，用甲醇配成0.1 mg/mL的标准储备梅液，该榕砸在4C保存，可使用二个月。1 GB/T 20759-2006 4.9 基质1昆合标准工作搭
5、破:根据每种横脏的灵敏度和仪器线性范围用空白样品提取被配成不同撒度Cng/mL)的基质混合标准工作搭陋，基质棍合标准工作榕砸在4C保存，可使用一周。4.10 墟膜:O. 2m， 5 仪器5. 1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子掘。5.2 勾质器。5. 3 旋转蒸发器。5.4 蔽体混匀器。5.5 离心机。5.6 分析天平t感量0.1mg ,O. 01 go 5. 7 移液器:1mL,2 mL。5.8 鸡心瓶:100mL, 5.9 样品瓶:2mL，带聚四氟乙烯旋盖。6 t式样的制备与保存6. 1 试样的制备从全部样品中取出有代表性样品约1峙，充分搅碎，泪匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密
6、封作为试样，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6.2 试样保存将试样于一180C冷冻保存巳7 测定步骤7. 1 样晶制备称取5g试样，精确至0.01g，置于50mL离心管中，加入20g无水硫酸铀(4.5)和20mL乙腊(4. 1) ，均质2min，以3000r/min离心3mino上清液倒人100mL鸡心瓶中，残渣再加人20mL乙睛，重复上述操作一次。合并提取液，向鸡心瓶中加人10mL异丙醇(4.2) ，用旋转蒸发器(5.3)于50C;j( 褂藕干，准确加入1mL流动相(4.6)和1mL正己皖(4.3)椿解残渣。转移至5mL离心管中，捐旋1 min，
7、以3000 r/min离心3min，吸取上层正己:境弃去，再加入1mL正己蝇，重复上述步骤，直至下层水相变成透明液体。按上述操作步骤制各样品空白提取液。取下层清液，过O.2m臆膜(4.10)后，用?在相色谱-串联质谱仪测定。7.2 色谱测定7. 2. 1 j夜相色i曹条件a) 色谱柱:Lichrospher 100 RP-18，5m，250 mmX 4.6 mm(内径)或相当者;b) 流动相z乙腊十0.01mol/L乙酸偌榕擅(12+88); c) 流速:0.8mL/min; d) 柱温:35 oc ; 的进样量:40L;f) 分配比:1 : 3 c 7.2.2 质谱条件a) 离子游、:电喷雾
8、离子掘1b) 扫描方式:正离子扫描;c) 检测方式z多反应监测;2 GB/T 20759-2006 d) 电喷雾电压:5500 V; 的雾化气压力:0.076MPa; f) 气帘气压力:0.069MPa; g) 辅助气流速:6L/min; h) 离子源温度:3500C;i) 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压见表1.表1十六种磺脏的定性离子对、定量离子对、碰撞气能噩和去簇电压中文名称英文名称定性离子对定量离子对碰撞气能量/去簇电压/Cm/z) Cm/z) V V E黄胶醋酷215/156 18 40 sulfacetamide 215/156 215/108 28 45 磺胶甲嚓二嗖
9、271/156 20 50 sulfamethizole 271/156 271/107 32 50 磺胶二甲异口恶R坐268/156 20 45 sulfisoxazole 268/156 268/113 23 45 285/156 23 50 磺胶氯眩嚓sulfachloropyridazine 285/156 285/108 35 50 磺胶畸昵251/156 23 55 suIfadiazine 251/156 251/185 27 50 磺胶甲基异略略254/156 23 50 sulfamethoxazole 254/156 254/147 22 45 256/156 22 55
10、磺胶喔瞠suIfathiazole 256/156 256/107 32 47 281/156 25 65 磺胶币6喃甲氧啼咬sulfamonomethoxine 281/156 281/215 25 50 265/156 25 50 磺胶甲基畸驼sulfamerazine 265/156 265/172 24 60 311/156 31 70 磺胶邻二甲氧晴院sulfadoxin 311/156 311/108 35 55 250/156 25 50 磺胶H比晓sulfapyridine 250/156 250/184 25 60 281/156 25 65 磺胶对甲氧略q定suIfamet
11、er 281/156 281/215 25 50 281/156 25 65 磺胶甲氧阳也嗦sulfamethoxypyridazine 281/215 281/156 25 50 279/156 22 55 磺胶二甲略院sulfamethazine 279/156 279/204 20 60 315/156 32 55 磺胶苯毗瞠sulfaphenazole 315/156 315/160 35 55 311/156 31 70 磺胶间二甲氧啼昵sulfadimethoxine 311/156 311/218 27 70 3 Gn/T 20759-2006 7.2.3 施相色谱串联质谱测定用
12、i昆合标准工作榕掖(4.的分别进样，以工作榕液放度(ng/mU为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品梅液中十六种磺腊的响应值均应在仪器测定的结性范围内。在上述色谱条件和质谱条件下，十六种磺腊的参考保留时间见表20十六种磺服?昆合桥准总离子流图参见图A.l和图A.2。囊2十六种磺肢参考保留时间药物名称保留时间/min药物名称保留时间/min磺胶醋酷2.61 9.93 磺胶甲唾工盹1l. 29 磺胶二阳异略I峰11. 62 磺胶嘈呢12.66 磺胶氯眩嚓17.28 磺眩甲基异H恶嗤17.95 磺眩嚓咀22.29 磺胶-6-甲氧暗旋28. 97 8 结果计算式
13、中IX一一试样中被C一一从标准工作V一一出样阳在定容飞赞m一-式样榕液所代表试注:计算结果应扣除空白值。9 精密度本标准的精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，其重复性和再现性的值以95%的可信度来计算。9. 1 重复性在重复性条件下，我得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限r，畜禽肉中十六种磺胶含量商围及重复性方程见表304 药物名称磺胶醋眈磺胶甲I塞二盹磺胶二甲异邮电色磺胶氯脑嗦磺胶畸4定磺胶甲基异略略磺胶l塞l些磺胶-6-甲氧啼晓磺胶甲基啼月定磺胶邻二甲氧啼呢磺胶毗院磺胶对甲氧略脆磺胶甲氧I驼嚓磺胶二甲l密院磺胶苯口比I些注:m为两如果差值超9.2
14、 再现性在再现性条件含量范围及再现性表3含量范围及重复性和再现性方程含量范围/Cg/kg)5.0-100.0 2.5-50.0 5.0-100.0 5.0-100.0 5. 0100. 0 5.0-100.0 重复性限rlgr=0.8332Igm一0.8908 lgr= 1. 148 21gm- 1. 2062 lgr=O. 916 91gm-O. 9498 Kr= 1. 037 0Igm- 1. 104 0 19r= 1. 006 6Igm- 1. 096 7 G/T 20759-2006 再现性限RlgR=O. 886 7Igm-0. 473 6 IgR=O. 872 01gm-O. 67
15、1 9 IgR=O. 972 1Igm-O. 764 8 IgR=O. 762 9Igm-0.481 1 lgR=O. 862 6Igm-0. 707 7 IgR=O. 766 91gm-O. 472 5 IgR=O. 779 21gm一0.5137 =0.842 21gm一O.613 9 gR=l 叨IgR=O. 一O.589 2 -0.8233 一0.4218 十六种磷腊的5 G/T 20759-2006 附录A(资料性附录)标准物质总离子流图A. 1 十一种磺胶混合标准物质总离子流图，见图A.L6.4e4 6.0e4 5.0e4 4.0e4 3.0e4 5.20 6.54 2.0e4才4
16、.542.61、1. Oe4 0.0 12.66 17.28 11.62 . 22.29 9.93 28.97 2 4 6 8 10 12 14 16 18 m 22 M 26 30 t/min 磺胶醋酌，2.61 min; 磺胶甲毯二殴，4.54min; 磺胶暗脏，5.20min;磺胶氯H达嚓，6.54min; 磺胶甲基异口恶哇，8.41min; 磺胶甲基峨呢，9.93min; 磺胶H比脆，11.62 min; 磺胶对甲氧畸脆，12.66min; 磺胶甲氧胎嚓，17.28min; 磺胶苯口比啦，22.29min; 磺胶间二甲氧畸脆，28.97min。图A.1 十一种磺膛混合标准物质总离子流图
17、A.2 五种磺股?昆合标准物质总离子流图，见图A.205. 5e4 5.0c4 3.0e4 2.0e4 4.91 1. Oe4 -1 0.0 2 4 6 6 9.13 11. 29 11. 20 11 11 11 8 10 12 14 16 I且9518 20 t/min 磺胶二甲异H恶隙，4.91min; 磺胶瑾瞠，9.13min; 磺胶-6-甲氧啼珑，9.48min; 磺胶邻二甲氧嘀睫，11.29min; 磺胶二甲啼院，17.95min, 圈A.2五种横肢混合标准物质总离子流圄附录B(资料性附录)回收率本方法中十六种磺腊添加激度及其平均回收率的试验数据，见表B.1. GB/T 20759-
18、2006 表B.l十六种磺脏添加谅度及其平均回收率的试验数据药物名称添加浓度/Cg/kg)平均回收率/(%)5.0 77.5 磺胶醋首先10.0 96.6 50.0 81. 6 100. 0 82. 5 2.5 92.8 磺胶甲嚷二瞠5.0 87. 5 25.0 93. 6 50.0 86.0 5.0 85.5 磺胶啼院10.0 87.3 50.0 85. 6 100.0 86.2 5.0 95.3 10.0 91. 3 磺E安氯瞌嚓50.0 88.0 100.0 82. 0 5.0 85. 2 10. 0 86.8 磺股甲基异口嚣嗤50.0 85. 1 100.0 83.0 5.0 85.
19、7 10.0 88. 1 磺胶甲基啼睫50.0 88.8 100. 0 88. 7 5.0 92.0 10.0 88.2 磺胶毗可定50.0 85.0 、100. 0 79. 7 20.0 91. 6 40.0 90.1 磺胶对甲氧暗q定200.0 93.2 400.0 93.2 DON-白白hONH阁。GB/T 20759-2006 表B.1 (续)药物名称添加浓度/(1-日/kg)平均国收率/c%)10.0 92. 6 20.0 87.4 磺胶甲氧时嗦100.0 88. 5 200.0 78.2 30.0 83.0 60.0 82.5 磺胶苯H比略84. 2 300.0 600.0 78.
20、 3 10.0 83.8 20.0 86. 5 磁E安问二甲氧I密院100.0 84.2 200.0 78.3 5.0 81. 7 E黄股二甲异H恶l骏10.0 76.4 50.0 75.4 100.0 84.4 5. 0 92. 9 磺股-6-甲氧畸睫10.0 86. 9 50.0 88. 9 100.0 86.8 10.0 84.0 磺胶喽i些20.0 83.4 100.0 84. 7 200.0 81. 8 5.0 97.3 磺胶邻二甲氧啼陡10.0 88.8 50.0 92.9 100.0 93.9 20.0 90.8 磺胶二甲暗院40.0 96.9 200.0 90.9 400.0 91. 3 侵权必究何叫向4MAHdm oo 。JMm唱EAd- phv nhnu whphJV 咽id:帽:号一价书一定1巳14.00 +非版权专有
