1、ICS 65. 150 B 51 g 中华人民共和国国家标准GB/T 21442-2008 柿孔扇贝Farrers scallop 2008-02-15发布2008-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局串舍中国国家标准化管理委员会。叩GB/T 21442-2008 前-z目本标准的附录A为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位=中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海津大学、山东省海水养殖研究所、山东省柿孔扇贝原种场。本标准主要起草人z于东祥、陈四清、张岩、孔晓瑜、王远隆、燕敬平、王尊青。I GB/
2、T 21442-2008 柿孔扇贝1 范围本标准给出了柿孔扇贝CChlamysfarreri Jones & Preston )的主要形态特征、生长繁殖特征及细胞遗传学和生化遗传学特征以及检测方法。本标准适用于柿孔扇贝的种质监测和鉴定。2 学名与分类位置2. 1 学名柿孔扇贝Chlamys farreri J ones & Presten。2.2 分类位置瓣鲸纲CLamelli branchia)、扇贝科CPectinidae)、珍珠贝目CPterioida)、扇贝属CChlamys)。3 形态特征3. 1 外部形态特征贝壳呈扇面状，左右两壳大小几乎相等，但有壳稍平，左壳微凸，腹缘近似圆形;壳
3、顶位于背缘，略凸;壳顶向前突出一个较大的前耳和向后突出一个较小的后耳，皆呈三角形，左右两耳的形状不同。右壳前耳的腹面向后凹入，形成左右两壳关闭时与外界相通的柿孔，孔的腹面右壳上端边缘生有小形柿状齿。壳外表面多呈紫褐色、浅褐色，间有黄褐色、杏红色、灰白色;壳内面呈白色或褐色、粉红色。两壳放射肋的数量和形状不同。外套膜边缘无愈合点，边缘生有发达的长短不等的触手，触手基部有许多外套眼。足短小，呈棒状，足的膜面有一条足丝沟。足丝发达，细丝状。柿孔扇贝外形见图1。回1柿孔扇贝外形1 GB/T 21442-2008 3.2 可数性状3.2. 1 柿状齿6枚10枚回3.2.2 两壳放射肋不同，左壳有粗的主肋
4、10条左右，而右壳约有20条粗肋。3.3 可量性状3.3. 1 壳高略大于壳长。3.3.2 前耳大，其长度约为后耳的2倍。3.3.3 壳顶角约为60。4 生长和繁殖特征4. 1 生长年龄/龄5. 1 染色体数体细胞染色体数25.2 核型染色体组型公式，6m 染色体核型见图20蠢蠢疆莓辙辘撬鹊桥麟践2 始路如髓掷输部踊树擎拳4售罄图2染色体核型5 76.188. 0 3X105粒，6 生化遗传学特征6. 1 同工酶的谱型GB/T 21442-2008 异拧棱酸脱氢酶(IDH)、6磷酸葡萄糖异构酶(GPO、6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(PGD)电泳图谱见图3，6.2 7 检测方法一一-鲸组织用。.一一去低
5、渗液，用一一一50%乙酸解离(1细胞悬液滴片(吉姆萨(Giemsa)染色10镜检观察染色体。7. 1. 2 核型分析z平均有效等位观察80个以上中期分裂相，并记数以确定二倍体染色体数回从中选取10个分散良好，形态清晰的中期分裂相进行显微摄影，并放大，测量。按Levan等的命名和分类标准对染色体分类(臂比1.01.7为中部着丝点染色体m，l.73.。为亚中部着丝点染色体sm，3. 07. 0为亚端部着丝点染色体st，7.0为端部着丝点染色体。，统计处理测量数据，分析染色体特征。7.2 同工酶分析7.2. 1 样品制备样本活体低温保存带回实验室。活体解剖取消化腺，密封放入超低温冰箱(-76巳或液氮
6、罐中贮3 G/T 21442-2008 存。将部分组织(约0.5g)取出放人玻璃匀浆器中，加人ll(体积质量比)的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7. 0)，冰水浴中匀浆后，倒人1.5 mL离心管内，4C冰箱中抽提0.5hlh，然后在0C4C冷冻离心机中14000 r/min离心10min，离心厉的上清液作为电泳样品。7.2.2 电泳分析采用水平淀粉凝胶电泳方法，凝胶浓度为12%，电泳缓冲系统为TC7.0，恒流(电流大小为12mA) 电泳12h，电泳过程在4C冰箱中进行。电泳结束后分别进行各种酶的染色。各种同工酶染色液的配制见附录A，7.2.3 数据处理平均杂合度观察值的计算见式(1)，平均杂
7、合度期望值的计算见式(2)，平均有效等位基因数的计算见式(3)。式中zH，一平均杂合度观察值;Hoi-多态位点杂合度观察值;n观察位点总和。式中zH, 乎均杂合度期望值;H倍多态位点杂合度期望值gn 观察位点总和。式中zN, 平均有效等位基因数;N , n 观察位点总和。8 司j定规则H, = (L; H,i)/n . ( 1 ) H , = (L; H ,.) / . . ( 2 ) N, = (L; N,.)/n ., ( 3 ) 检测结果不符合第3章、第5章中任一章要求的，则判定为不合格项;有不合格项的样品为不合格样品。合格样品数与样品总数的比值为合格率。4 附录A(规范性附录)同工酶染
8、色液配方A.1 异拧穰酸脱氢酶CIDH)染色液的配方TrisC三泾甲基氨基甲:皖)-HCl0.2 mol/L , pH8.0 辅酶IlCNADP) O. 25 % MgC!, 1. 0 mol/L 异拧棱酸(销盐喽瞠蓝CMTT)0.5% 吩嚓甲硫酸CPMS)0.5% 琼脂1. 0% A.2 6-磷酸葡萄糖异构酶CGPI)染色液的配方Tris-HCl 0.2 mol/L , pH 8.0 NADP 0.25% MgCl, 1. 0 mol/L NAD 6-磷酸果糖MTT 0.5% PMS 0.5% 琼脂1. 0% A.3 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶CPGD)染色液的配方Tris-HCl 0.2 mol/L, pH8.0 NADP 0.25% MgCl, 1. 0 mol/L 6磷酸葡萄糖酸锁MTT 0.5% PMS 0.5% 琼脂1. 0% 15 mL 0.5 mL 0.25 mL 36 mg 0.5 mL 0.5 mL 10 mL 15 mL 0.5 mL 0.25 mL 12U 5 mg 0.5 mL 0.5 mL 10 mL 15 mL 0.5 mL 0.25 mL 20 mg 0.5 mL 0.5 mL 10 mL GB/T 21442-2008 5
