1、ICS 67.060 X 11 中华人民共和国国家标准GB/T 22464-2008 昔皂一旦大2009-01皿01实施Soybean saponin 2008-11-04发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会本标准的附录A为规范性附录。本标准由国家粮食局提出。目。吕本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准负责起草单位:南京财经大学。GB/T 22464-2008 本标准参与起草单位:上海交通大学、武汉工业学院、黑龙江九三粮油工业集团公司、黑龙江双河松嫩大豆生物工程有限公司。本标准主要起草人:袁建、鞠兴荣、汪海峰、赵大云、张世宏、下清德、罗莉、王哲。I GB
2、/T 22464-2008 大豆皂昔1 范围本标准规定了大豆皂昔的术语和定义、质量要求和卫生要求、检验方法、检验规则、标签标识，以及包装、运输、贮存要求。本标准适用于以大豆、大豆粉或大豆胚芽为原料提取的商品大豆皂背。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 4789.2 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T 4789. 3 食品卫生微生物学检验大肠菌群测
3、定GB/T 4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB/T 4789. 5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB/T 4789. 10 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB/T 4789. 15 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数GB/T 5009. 1食品卫生检验方法理化部分总则GB/T 5009.3 食品中水分的测定GB/T 5009.4 食品中灰分的测定GB/T 5009.11 食品中总畔及无机碑的测定GB/T 5009. 12 食品中铅的测定GB/T 5492 粮食、油料检验色泽、气昧、口味鉴定法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB 7718 预包装食品标签
4、通则3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 大豆皂苦soybean saponin 以大豆、大豆柏或大豆胚芽为原料生产的，由非极性的三币苦苦元(aglycone或sapogenol)和低聚糖链(glycones)组成的五环三市类齐墩果烧型皂试产品。4 质量要求和卫生要求4. 1 成分特征大豆皂昔产品中主要成分为A类、B类、E类或DDMP类皂苦，其主成分的化学结构见图101 GB/T 22464-2008 OH O 。OAc A类大豆皂昔结构构结的昔侃皂尸U马阳D D 和011类/E oflo-YE 则-H-1J|O|R时团ClLf01吐一一士在/l-H-J /rHRLf043 OH
5、/R OI吃可1R R 中图构结昔皂一旦大R3 组名代号Rl R2 R3 Aa CH20H -D-Glc H Ab CH2 0H -D-Glc CH2 0COCH3 Ac CH20H -L-Rha CH20COCH3 Ad H -D-Glc CH20COCH3 A组Ae CH2 0H H H Af CH20H H CH20COCH3 Ag H H H Ah H H CH20COCH3 Ba (V) CH2 0H tD-Glc Bb (1) CH20H -L-Rha B组Bc( II ) H -L-Rha OH Bb( I1D CH2 0H H Bc(W) H H 图1大豆皂苦主成分的化学结构2
6、 组名代号Rl Bd CH2 0H E组Be CH2 0H g CH20H g CH2 0H DDMP a H g CH20H g H 图1(续)4.2 质量指标大豆皂昔质量指标见表10表1大豆皂营质量指标项目色泽、外观气味、口味杂质水分/%三二灰分(以干基计)/%、一、大豆皂昔含量(以干基计)/%，飞pH值0%水溶液)4.3 卫生指标4.3.1 大豆皂昔卫生指标见表2。表2大豆皂苦卫生指标项目菌落总数/(CFU/g)运二大肠菌群/(MPN/100 g) 运二霉菌和酵母菌总数/(CFU/g)、一、致病菌(指肠道致病菌和致病性球菌总碑(以As计)/(mg/kg)运二铅(Pb)/ (mg/kg)
7、主4.3.2 植物检疫按照国家有关标准和规定执行。5 检验方法5. 1 抨样、分样:按GB/T5009.1执行。5.2 色泽、气昧、口味检验=按GB/T5492执行。GB/T 22464-2008 R2 R3 -D-Glc =0 -L-Rha D-Glc -L-Rha h -L-Rha H H 质量指标黄色至棕黄色粉末气昧、口味正常，元异味无肉眼可见杂质5.0 3.0 40 6.5士1.0卫生指标1 000 30 100 不得检出0.5 1. 0 5.3 杂质测定:取一定量的试样平摊后，在自然光线下，肉眼观察有元与产品颜色差异的斑点或其他物质。5.4 水分测定:按GB/T5009.3执行。3
8、GB/T 22464-2008 5.5 灰分含量测定:按GB/T5009.4执行。5.6 大豆皂昔含量测定:按附录A执行。5. 7 菌落总数测定:按GB/T4789.2执行。5.8 大肠菌群测定:按GB/T4789.3执行。5.9 致病菌检验:按GB/T4789.4、GB/T4789.5、GB/T4789. 10执行。5. 10 霉菌和酵母数检验:按GB/T4789. 15执行。5. 11 总碑含量测定:按GB/T5009.11执行。5.12 铅含量测定:按GB/T5009. 12执行。5.13 pH值测定:称取1.00 g样品，加入到99.0mL水中，搅拌均匀，制成1.0%的样品溶液。用pH
9、计测定样液pH值。6 检验规则6. 1 检验批同一批原料，同一班次生产的产品为一批。6.2 出厂检验按本标准4.2的规定对每批产品检验。6.3 型式检验6.3.1 遇有下列情况之一时，应进行型式检验:常年连续生产的每年至少进行一次;一一当原料、设备、工艺有较大变化可能影响产品质量时;一一质量监督部门提出要求时。6.3.2 型式检验按本标准4.2、4.3规定执行。6.4 判定规则6.4.1 检验结果全部符合本标准要求时，判定该批产品为合格品。6.4.2 卫生指标中有一项检验结果不符合本标准要求时，判定该批产品为不合格产品。6.4.3 除卫生指标外，其他项目检验结果不符合本标准要求时，可在原批次产
10、品中双倍抽样复检一次，若仍有指标不合格，则判该批产品为不合格产品。7 标签标识7. 1 应符合GB7718的规定及要求。7.2 凡标识大豆皂昔的产品均应符合本标准。7.3 采用转基因大豆为原料生产的产品，应按国家有关规定进行标识。7.4 应注明产品原料的生产国名。8 包装、运输及贮存8. 1 包装材料或容器应符合相应食品卫生要求，包装应完整、元破损、元污染。8.2 应使用符合卫生要求的工具、容器运送，运输中应注意防止日晒、雨淋、污染和标签脱落。8.3 应贮存于清洁、干燥、阴凉处。不得与有毒、有害物品混存。4 A.1 高效液相色谱法A. 1. 1 范围附录A(规范性附录)大豆皂昔含量测定本方法规
11、定了采用高效液相色谱测定大豆皂昔中皂昔含量的方法。本方法皂昔各单体的检出限为o.1 g/峙。A. 1.2 原理GB/T 22464-2008 试样用80%乙醇溶解后，经0.45m滤膜过滤，采用反相键合相色谱测定，根据色谱峰保留时间进行定性，根据峰面积或峰高定量，计算大豆皂昔各单体的含量之和为大豆皂昔含量。A. 1.3 试剂除非另有说明，仅使用确认为优级纯的试剂。A. 1. 3. 1 水:符合GB/T6682规定的一级。A. 1. 3. 2 甲醇。A. 1. 3. 3 80%乙醇溶液z量取800mL元水乙醇加水稀释至1000 mL。A. 1. 3. 4 大豆皂昔标准溶液z称取A类、B类、E类及D
12、DMP类大豆皂背单体标准品(含量98%)各10.0 mg置于100mL容量瓶中，用80%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。每毫升溶液分别含每种大豆皂昔单体标准品0.10mg o A. 1.4 仪器与设备除常规实验室仪器设备外，还包括以下仪器设备zA. 1. 4. 1 高效液相色谱仪:具紫外检测器。A. 1. 4. 2 高效液相色谱分析参考条件:一一色谱柱:N ova-pak C18柱3.9mmX300 mm，或相同性质的填充柱。一一流动相:甲醇水溶液，V(甲醇)十V(水)=80+20。一一流速:1. 0 mL/min o 一一-检测器z紫外检测器，205nm波长，0.2AUFS。一一色谱柱温度:
13、30oc。一一进样量:10L。A. 1.5 操作步骤A. 1. 5. 1 试样制备称取试样约0.1g，精确至O.001 g，加80%乙醇溶液溶解并稀释定容至100mL，混匀，通过0.45m微孔滤膜过滤，滤液备作高效液相色谱(HPLC)分析用。A. 1. 5. 2 测定在相同的色谱分析条件下，分别取10L大豆皂昔溶液和试样溶液注入高效液相色谱分析，根据保留时间定性，外标峰面积定量。A. 1.6 结果计算大豆皂昔的含量按式(A.1)计算2 (A;) X V X 100 x = LJ -_: , =-_-_-, X 100 ( A.1 ) V1 X m X 1 000 X (100 - w) 5 G
14、B/T 22464-2008 式中:X一一产品中大豆皂昔的含量(以质量分数计)，%;Ai进样体积中大豆皂昔单体组分t的质量，单位为毫克(mg); V一一样品稀释总体积，单位为微升(L); V1一一进样体积，单位为微升(L); m一一一样品质量，单位为克(g); 四一一一样品水分(以质量分数计)，%。计算结果保留三位有效数字。A. 1.7 重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。A.2 分光光度法A. 2.1 范围本方法规定了采用分光光度法测定大豆皂背中皂昔含量的方法。本方法大豆皂昔的检出限为O.1 g/峙。A.2.2 原理样品用50%甲醇水溶液溶解后，在酸
15、性条件下水解，以乙酸乙醋萃取出昔元，与香草醒、高氯酸反应显色，在560nm波长下测定吸光度，与标准曲线比较定量。A.2.3 试剂A. 2. 3.1 高氯酸。A. 2. 3. 2 95%乙醇。A. 2. 3. 3 乙酸乙醋。A. 2. 3. 4 50%甲醇溶液:量取100mL甲醇加入100mL水中，摇匀。A. 2. 3. 5 2 mol/L HCl溶液:量取16.5mL HCl加水稀释至100mLo A. 2. 3. 6 5%香草酸冰乙酸溶液:称取5.00g香草醒溶于100mL冰乙酸中，摇匀。A. 2. 3. 7 大豆皂昔标准溶液z称取大豆皂昔单体标准品或混合标准品(含量二三98%)10.0mg
16、用少量50%甲醇溶液溶解后，加入2mol/L HCl 60 mL 100 oc水解5h，用70mL乙酸乙醋分数次萃取，提取液用旋转蒸发器蒸干后，用95%乙醇溶解并转移至100mL容量瓶中，以95%乙醇定容至刻度，摇匀。每毫升溶液含大豆皂昔0.10mg o A. 2. 4 仪器除常规实验室仪器设备外，还包括以下仪器设备z分光光度计:具1cm比色皿。A.2.5 操作步骤A. 2. 5.1 试样制备称取试样约0.1g，精确至0.001g，溶于50mL 50%甲醇溶液中，用50%的甲醇溶液定容于100 mL，取10mL加入2mol/L HCl 60 mL, 100 oc水解5h，用70mL乙酸乙醋分数
17、次萃取，提取液用旋转蒸发器蒸干后，用95%乙醇溶解并转移至容量瓶中，以95%乙醇定容至100mL作为待测样液。A.2.5.2 标准曲线的绘制取大豆皂昔标准溶液(A.2. 3. 7) 0 mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7 mL (相当于大豆皂昔omg、0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg)于10 mL具塞试管中，水浴挥干，加5%的香草醒冰乙酸溶液0.2mL，加入高氯酸0.8mL，摇匀，60oC7.K 浴加热15min，取出后立即用流水冷却，加入4mL冰乙酸稀释摇匀后，在560nm处以0
18、管调零，测定吸光度，每个浓度平行测定两次，计算平均吸光度值，以吸光度值为横坐标，大豆皂昔质量(mg)为纵坐标，绘制标准曲线。A.2.5.3 测定GB/T 22464-2008 吸收待测样液(A.2. 5. 1) O. 4 mL于10mL具塞试管中，水浴挥干，加5%的香草醒冰乙酸溶液0.2 mL，加人高氯酸0.8mL，摇匀，600C水浴加热15min，取出后立即用流水冷却，加人4mL冰乙酸稀释摇匀后，在560nm处以0管调零，测定吸光度，与标准曲线比较定量。A.2.6 结果计算大豆皂昔的含量按式(A.2)计算:AXVXV2 X 100 X=T7 ._T，.A /:A: , X100 ( A.2
19、) V1 X V3 X m X 1 000 X (100 - w) 式中zX一产品中大豆皂昔含量(以质量分数计)，%;A一一样液中大豆皂昔的质量，单位为毫克(mg); V一一样品稀释总体积，单位为毫升(mL);V1 -水解时取样液体积，单位为毫升(mL);V2一一水解液定容体积，单位为毫升(mL);V3一一一测定用水解液定容体积，单位为毫升(mL);m 一一一样品质量，单位为克(g); w-一样品水分(以质量分数计)，%。计算结果保留三位有效数字。A.2.7 重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。OON|寸寸NNH阁。国华人民共和国家标准大豆皂昔GB/T 22464-2008 中骨中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销骨印张O.75 字数15千字2009年1月第一次印刷开本880X12301/16 2009年1月第一版* 定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-35459 GB/T 22464-2008
