1、ICS 67.040 X 10 gE 国家标准国不日11: _，、中华人民GB/T 25228-2010 粮油检验玉米及其制品中伏马毒素含量测定免疫亲和柱净化高效液相色谱法和荧光光度法Inspection of grain and oils-Determination of fumonisins in corn and its products by high liquid chromatography and fluorometer with immunoaffinity column cleanup 2010-09-26发布2011-03-01实施数E马防伪中华人民共和国国家质量监督检验检
2、疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T 25228-2010 目lJ1=1 本标准中的免疫亲和柱净化高效液相色谱法修改采用国际分析化学师协会的测定方法(AOAC官方方法2001.04玉米和玉米片中伏马毒素的测定免疫亲和柱净化液相色谱法)(Official method 2001. 04 Determination of fumonisins Bl and B2 in corn and corn flakes-Liquid chromatography with immunoaffinity column cleanup)。为了便于使用，本标准对AOACofficial method 200
3、1. 04进行了下列修改:将适用测定浓度范围修改为检出限，删除了该标准中实验室间测试数据表A和表B，增加了国内实验室间测试数据;修改了对免疫亲和柱的要求;修改了标准曲线的浓度范围;将定容体积由200L改为400L;一一增加了空白试验;十一简化了结果计算。本标准的附录A、附录B和附录C为资料性附录。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准负责起草单位=国家粮食局科学研究院。本标准参加起草单位:北京中检维康技术有限公司。本标准主要起草人:王松雪、王雄、刘始、张艳、孙长坡、王岩。I GB/T 25228-2010 1 范围粮油检验玉米及其制品中伏马毒素含量测定免疫亲和柱净
4、化高效液相色谱法和荧光光度法本标准规定了采用免疫亲和柱净化高效液相色谱法和免疫亲和柱净化荧光光度法测定玉米及其制品中伏马毒素测定的原理、试剂和材料、仪器和设备、操作步骤及结果表示。本标准中免疫亲和柱净化高效液相色谱法适用于玉米和玉米制品中伏马毒素BI和良的测定，免疫亲和柱净化荧光光度法适用于玉米和玉米制品中伏马毒素总量的测定。免疫亲和柱净化高效液相色谱法的检测限为0.1mg/kg;免疫亲和柱净化荧光光度法的检测限为0.5 mg/kgo 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而
5、，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法3.1 原理利用免疫亲和反应净化样品，以邻苯二甲醒柱前衍生伏马毒素为荧光化合物，用反相高效液相色谱进行分离、检测，外标法测定伏马毒素矶和Bz的含量。3.2 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级水的要求。3.2. 1 甲醇:色谱纯，或纯度相当。3.2.2 乙腊:色谱纯，或纯度相当。3.2.3 磷酸二氢铀(NaHzP04.2HzO)。3.2.4 四棚酸铀(Naz
6、B407.10HzO)。3.2.5 氯化铀。3.2.6 磷酸氢二锅。3.2.7 磷酸二氢钢。3.2.8 氧化饵。3.2.9 浓盐酸。3.2.10 磷酸。3.2.11 邻苯二甲醒(OPA)。3.2. 12 2-硫基乙醇(MCE)。3.2. 13 0.1 mol/L磷酸二氢铀溶液:称取15.6g磷酸二氢铀(3.2.3)，用水溶解并定容为1L。3.2. 14 0.1 mol/L四棚酸铀溶液:称取3.8g四珊酸铀(3.2.4)，用水溶解并定容至100mL。3.2.15 2mol/L盐酸溶液:将1体积浓盐酸(3.2. 9)溶解在5体积水中。1 G/T 25228-2010 3.2.16 提取溶液:取25
7、mL甲醇(3.2.1)加入25mL乙腊(3.2.2)和50mL水。3.2. 17 乙睛十水:取5mL乙睛(3.2.2)加入5mL水。3.2.18 磷酸盐缓冲液(PB曰:将8.0g氧化纳(3.2.5)、1.2g磷酸氢二铀(3.2.6)、0.2g磷酸二氢饵(3.2. 7)、0.2g氯化饵(3.2.8)溶解于990mL 水中，用2mol/L盐酸溶液(3.2.15)调节pH为7.0，最后定容为1L。3.2.19 流动相:甲醇(3.2.1) +0. 1 mol/L磷酸二氢铀溶液(3.2.13)= 77十23，用磷酸(3.2.10)调节pH为3.34. 0，用0.45m滤膜(3.3.13)过滤。3.2.2
8、0 OPA衍生液z将40mg OPA(3. 2. 11)榕解在1mL甲醇中，用0.1mol/L Na2B407溶液(3.2.14)5 mL稀释。加2-硫基乙醇(MCE)(3.2.12)50L，混匀。装于具塞棕色瓶中，室温避光处可以储藏1周。3.2.21 伏马毒素Bl和民标准品:晶体，纯度95%。3.2.22 伏马毒素标准储备液:准确称取适量伏马毒素Bl和B2标准品(3.2.21)，用乙睛十水(3.2.17)溶解，配制成伏马毒素Bl浓度为100g/mL、伏马毒素B2浓度为50g/mL的棍合标准溶液。该标准溶液在40C下，可以稳定储藏6个月。移取500L该混合标准溶被于5mL的容量瓶中，用乙腊十水
9、(3.2.17)定容至刻度，摇匀，即可获得伏马毒素B1浓度为10ng/L、伏马毒素B2浓度为5ng/L的储备液。3.2.23 伏马毒素标准工作溶液t分别取上述伏马毒素储备液(3.2.22)125L、250L、500L、1000L和2500L置于5个5mL的容量瓶中，用乙腊+水(3.2. 17)定容至刻度，获得5种不同浓度的伏马毒素工作标准溶液。其中，伏马毒素B1标准工作溶液浓度为o.250 ng/L、O.500 ng/L、1. 00 ng/L、2.00ng/L和5.00ng/L;伏马毒素B2标准工作溶液浓度为0.125ng/L、0.250ng/L、0.500 ng/L、1.00 ng/.uL和
10、2.50ng/L. 3.3 仪器和设备3.3. 1 天平:感量0.1mgo 3.3.2 谷物粉碎机。3.3.3 离心管=塑料，250mL，带盖。3.3.4 离心机=离心力不小于2500g 0 3.3.5 滤纸:12cm Whatman 4号1，或相当者。3.3.6 玻璃微纤维滤纸:9cmWhatman GF/A，或相当者。3.3.7 免疫亲和柱:对伏马毒素凯和B2均有100%的交叉反应性。对伏马毒素队和B2总吸附容量大于5阔，对于甲醇-PBS溶液中含有1g伏马毒素的回收率二三90%。3.3.8 玻璃注射器:10mL，可以与亲和柱相连。3.3.9 微量注射器:25Ll000Lo 3.3. 10
11、空气压力泵:可以与免疫亲和柱相连。3.3. 11 高效液相色谱仪:配备20L进样系统、荧光检测器和数据处理系统。3.3.12 氮吹仪。3.3.13 滤膜:0.45m孔径，25mm直径的聚飘膜或相当者。3.3.14 振荡器。3.4 操作步骤3.4. 1 提取2 将样品用谷物粉碎机磨细至粒径小于1mm(全部通过1mm孔径的试验筛)，称取20g(m，精确到1) Whatman 4号为适合的市售产品的实例。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示本标准对该产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，可经实验评估后使用这些等效的产品，下同。GB/T 25228-2010 0.1 g)粉碎试样，置于25
12、0mL的离心管(3.3.3)中，加50mL提取液(3.2.16)。盖好离心管的盖，在振荡器(3.3. 14)上水平振荡20mino在离心力为2500g条件下离心10min，用滤纸(3.3.5)过滤上清液(尽可能滤尽并避免将固体残留物转移到滤纸上，下同);在离心管的残渣中再加50mL提取液，以上述方式提取离心后，仍用上次的滤纸过滤，合并两次滤液。混合均匀后，量取10mL滤液置于100mL的烧杯中，加40mL PBS缓冲液(3.2. 18) ，混匀。用玻璃微纤维滤纸(3.3.6)过滤，取10mL滤液用于免疫亲和柱(3.3. 7)净化。3.4.2 免症亲和柱净化将免疫亲和柱(3.3. 7)与玻璃注射
13、器(3.3.8)下端连接。准确移取10.0mL上述滤液(3.4.1)加入玻璃注射器中，将空气压力泵(3.3.10)与玻璃注射器上端连接，加压，使滤液以1滴/s2滴/s的流速通过亲和柱，弃掉流出液。用上述方式，再以10mL PBS缓冲液(3.2.18)清洗亲和柱，直至液体完全流出，空气通过，弃掉全部流出液。最后以1.5 mL甲醇(3.2.1)将亲和柱中的伏马毒素洗脱，控制流速为1滴/s，收集全部洗脱液于玻璃试管中，在600C下用氮吹仪(3.3.12)以氮气吹干，残留物置于4.C下存放，备用。测定前用乙腊十水(3.2.17)400L溶解残留物，此为供高效液相色谱测定用样品净化液。注:由于不同厂商提
14、供的亲和柱操作程序可能有所不同，实际操作时，请参照免疫亲和柱厂商提供的操作说明和程序使用。3.4.3 衍生化反应分别取上述净化液(3.4.2)和标准工作溶液(3.2.23)各50L，分别置于1mL的各个试管中，各加入50LOPA衍生液(3.2. 20) ，涡流混合器上混合30s，静置3min后，立即取20L衍生液进高效液相色谱仪分析。3.4.4 色谱参考条件色谱柱:C18柱或相当的柱，柱长150mm，内径4.6mm，填料直径5m。流动相:见3.2.1凹9。流速:1.0 mL/min 荧光检测器:激发波长335nrr队发射波长440nm盯m。柱温z室温。3.4.5 标准曲线制作在上述色谱条件下，
15、等基线平稳后制作标准曲线，伏马毒素Bl和民标准品的参考色谱图参见附录A。分别吸取各标准溶液的衍生液(3.4.3)20L进样分析，以各衍生液衍生前的伏马毒素Bl、伏马毒素Bz的色谱峰峰面积对相应标准工作溶液的浓度作图，制作伏马毒素Bl、伏马毒素Bz的标准曲线。3.4.6 测定在上述色谱条件下，等基线平稳后进样分析。吸取20L样液的衍生液(3.4.3)进样分析。比较样品与标准的色谱图，根据保留时间定性。根据伏马毒素Bl或民的峰面积查标准曲线，得到净化液中相应的伏马毒素Bl或民的浓度(c)。如果伏马毒素的浓度超过了所制作的标准曲线浓度范围，用乙腊+水(3.2. 17)将净化液稀释f倍后，重新进行衍生
16、化反应和色谱分析。3.4.7 空白试验除不加试样外，按3.4.1至3.4.6的步骤进行。3.5 结果计算3.5.1 样品中伏马毒素Bl或岛的含量按式(1)计算:Xl=c - co) x V X 50 X f m X 1 000 . ( 1 ) 3 G/T 25228-2010 式中:X1二样品中伏马毒素Bl或民的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); c-一净化液中伏马毒素Bl或B2的浓度，单位为纳克每微升(ng/L); co一一空白试验的净化液中伏马毒素Bl或坠的浓度，单位为纳克每微升(ng/L); V一一-净化液体积(400L)，单位为微升(L);50 样品量与净化液对应样品量的倍数;m
17、试样的质量，单位为克(g); f-一一样品净化液的稀释倍数。3.5.2 每个试样进行两次平行试验，两次测定重复性符合3.6.2要求，取两次测定的算术平均值作为测定结果。3.6 精密度3.6. 1 实验室间试验附录B统计了本法精密度的实验室间测试数据。这些结果适用于给定的分析浓度范围和基体之内的样品。3.6.2 重复性在同一实验室，出同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试，获得的两次独立测试结果的绝对差值大于按式(2)计算的重复性限(r)值的情况不超过5%。伏马毒素Bl或民含量在05mg/同时zr=二0.3119 X F - 0.026 2 ( 2
18、) 式中:r 重复性限zF一一两次测定结果的算术平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。3.6.3 再现性在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立进行测试，获得的两次独立测试结果的绝对差伯大于按式(3)计算的再现性限(R)值的情况不超过5%。伏马毒素Bl或Bz含量在05mg/kg fI;j: R =0. 4053 X F一0.0377 . ( 3 ) 式中:R 再现性限;F一两次测定结果的算术平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。4 免疫亲和柱层析净化荧光光度法4.1 原理利用免疫亲和反应净化样品，样品净化后经邻苯二甲醒衍生化，用荧光光度计测定伏
19、马毒素总量。4.2 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级用水要求。4.2. 1 甲醇:色谱级。4.2.2 氧化铀。4.2.3 磷酸氢二铀04.2.4 磷酸二氢饵。4.2.5 氯化饵。4.2.6 聚乙二醇(PEG8000)。4.2.7 吐温-20(Tween-20)。4.2.8 邻苯二甲醒(OPA)。4.2.9 2-硫基乙醇(MCE)。4.2. 10 四棚酸铀(Na2B407.10H20)。4.2. 11 硫酸奎宁(C40HS4 N4 010 S)。4.2. 12 浓盐酸。4.2.13 2mol/L盐酸溶液:将1体积浓盐酸(4.2.12)溶解在5倍体积
20、水中。4.2.14 浓硫酸。G/T 25228-2010 4.2. 15 O. 05 mol/L硫酸溶液:取2.8mL浓硫酸(4.2.14)，缓慢加人适量水中，冷却后定容至1000 mL 4.2.16 甲醇+水=80+2004.2. 17 0.12 mol/L四棚酸铀珞液:称取4.6g四珊酸铀(4.2.10).用水溶解并定容至100mL。4.2.18 磷酸盐缓冲液CPBS):将8.0g NaCl(4. 2. 2)、1.2 g Na2HP04 (4.2.3)、0.2g KH2P04 (4.2.4)、0.2g KC1(4. 2. 5)溶解于990mL 水中，用2mol/L盐酸溶液(4.2.13)调
21、节pH为7.0，最后定容为1L。4.2. 19 清洗缓冲液z称取25g PEG 8000(4. 2. 6)，加1mL吐温20(4.2.7)，用磷酸盐缓冲液(4.2.18)溶解并稀释至1000mL。4.2.20 OPA衍生液:将50mg OPA(4. 2. 8)溶解在1mL甲醇(4.2.1)中，用49mL O. 12 mol/L四砌酸铀溶液(4.2.17)稀释。加2-硫基乙醇(MCE)(4.2. 9)200L，混匀，装于密封的棕色瓶中，在室温避光处可以储藏1周。4.2.21 伏马毒素B1、B2、民标准品(fumonisins):晶体，纯度95%。4.2.22 6g/mL和12g/mL总伏马毒素甲
22、醇标准溶液:以伏马毒素B1、鸟、B3标准品(4.2.21)，按伏马毒素B1、B2和民的比例为FBl+FB2十FB3=5十2+1.配制6g/mL和12g/mL总伏马毒素甲醇标准溶液。4.2.23 荧光光度计标定溶液:称取一定量硫酸奎宁(4.2. 11) ，用0.05mol/L硫酸溶液(4.2.15)稀释至100mL，用6.0g/mL和12g/mL总伏弓毒素甲醇标准溶液(4.2.22)各1mL，分别与等体积OPA衍生液(4.2.20)涡流混合器上混合30s，静宣3min，进行衍生化反应。在荧光光度计激发披长335nm、发射波长440nm的条件下，分别用0.05mol/L硫酸溶液调节硫酸奎宁溶液的浓
23、度，使两个硫酸奎宁溶液的荧光强度分别与6.0g/mL和12g/mL总伏马毒素甲醇标准溶液衍生液的荧光强度相等(配制时可参考:1g/mL硫酸奎宁的荧光强度约相当于1.5g/mLOPA-伏马毒素衍生液的荧光强度，具体根据实际情况定)。此标定溶液浓度一经确定，可在该荧光光度计上多次使用。4.3 仪器和设备4.3.1 免疫亲和柱:同3.3.7。4.3.2 元荧光玻璃测试管。4.3.3 微纤维滤纸:11cm、孔径1.0m。4.3.4 带不锈钢均质杯的高速均质器:转速约22000r/min。4.3.5 1 mL微量移液器和吸头。4.3.6 20L微量移液器和吸头。4.4 操作步骤4.4.1 提取粉碎样品并
24、使其全部通过1mm孔径的试验筛，称取粉碎后的试样50g(精确到0.1g)和5g氯化铀(4.2.2)置于均质杯中，加入100mL甲醇+水溶液(4.2.16)，盖上均质杯的盖子，用高速均质器(4.3.4)均质1mino取下盖子，将提取物倒入折叠式滤纸上，滤液收集于干净的容器中。移取10.0mL G/T 25228-2010 滤液，置于50mL容量瓶中，用清洗缓冲液(4.2.19)稀释并定容至刻度。稀释液通过1.0m微纤维滤纸(4.3.3)过滤，备用。4.4.2 免症亲和柱净化准确量取10mL上述过滤、稀释的提取液(4.4.1)，按3.4.2相同的方法，使提取液全部通过伏马毒素免疫亲和柱，直至空气进
25、入到亲和柱中。再以上述方法分别依次用10mL清洗缓冲液(4.2.19)和10 mL PBS缓冲液(4.2.18)清洗免疫亲和柱，直至空气进入柱中。用甲醇(4.2.1)1.0 mL(V)以1滴/s的流速淋洗亲和柱，全部收集净化液于玻璃测试管中(4.3.2)，备测。4.4.3 荧光光度计标定在激发波长335nm、发射波长440nm条件下，以0.05mol/L硫酸溶液(4.2.15)为空白，调节荧光光度计的读数值为0.0。用荧光光度计标定溶液(4.2.23)调节荧光光度计的读数值为相当的伏马毒素浓度，即为6和1204.4.4 衍生与测定于装有1mL净化液(4.4.2)的玻璃试管中加入1mL OPA衍
26、生液(4.2.20)，混匀。将测试管置于已标定好的荧光光度计中，240s后读数，即为试样中伏马毒素浓度(c)。如超出荧光光度计读数12太多，需要将净化液稀释f倍后重新测定。4.4.5 空白试验除不加试样外，按4.4.1至4.4.4的步骤进行。4.5 结果计算4.5.1 样品伏马毒素的含量按式(4)计算=X2一(c- co) x v X 50 X f -m 式中:X2一一样品中伏马毒素的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); C一一试样中犬马毒素的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); co一一空白试验中的伏马毒素浓度，单位为微克每毫升(g/mL); V一一净化液体积(1mL)，单位为毫升(mL)
27、;50一一样品量与净化液对应样品量的倍数;m 试样的质量，单位为克(g); f一一一样品净化溶液的稀释倍数。( 4 ) 4.5.2 每个试样进行两次平行试验，两次测定重复性符合4.6.2要求，取两次测定的算术平均值作为测定结果。4.6 精密度4.6.1 实验室间试验附录C统计了本方法精密度的实验室间测试数据。这些结果适用于给定的分析浓度范围和基体之内的样品。4.6.2 重复性在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于按式(5)计算的重复性限(r)值的情况不超过5%。总伏马毒素含量在08mg/kg时:r
28、=O. 332 4 X F十0.2216 . ( 5 ) 式中zr 重复性限z6 GB/T 25228-2010 F 两次测定结果的算术平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。4.6.3 再现性在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于按式(6)计算的再现性限(R)值的情况不超过5%。总伏马毒素含量在08mg/kg时:R =0.3324 X F十0.2216 式中:R 再现性限;F一二两次测定结果的算术平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。/ / / . ( 6 ) 7 GB/T 25228-2010 附
29、录(资料性附录)伏马毒素B，和B2标准晶的参考色谱图A HdTC.U FB, 8 7 65 DJ 4 3 2 mm 图.117.5 15 伏马毒素矶和B2标准品的参考色谱图12.5 10 7.5 5 2.5 。8 GB/T 25228-2010 附录B(资料性附录)免瘟亲和层析净化高效液相色谱法联合实验室测试结果免疫亲和层析净化高效液相色谱法的实验室间测试统计结果见表B.1，样品为添加了伏马毒素标准品(FBj十FB2)的玉米和玉米制品。表B.1联合实验室测试结果玉米玉米制品项目FB1 FB2 FB1 FB2 FB1 F乌FB1 FB2 FB1 FB2 FB1 FB2 参加实验室的数量5 5 5
30、 5 5 5 5 5 5 5 5 5 样品的数量1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 去除离群值后的测试实验室数量5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 所有可接受结果的15 15 数量14 15 15 15 15 15 15 15 15 15 平均值/(mg/kg)0.405 o. 196 o. 784 0.414 4.25 1. 91 0.400 0.204 0.855 0.389 4.46 2. 09 重复性的标准偏差，5，/(mg/kg)0.049 2 0.0324 0.043 6 0.0476 0.458 1 0.1904 0.0440 0.0292 0.056 0
31、 0.033 7 0.5022 0.2054 重复性的变异12.2 16.6 5.6 11. 5 10.8 10.0 11. 0 14.4 6.5 8.7 11. 3 9.8 系数/%重复性限值，r/ O. 139 0.092 (mg/kg) O. 123 0.135 1. 296 0.539 O. 125 0.083 O. 158 0.095 1. 421 0.581 再现性标准偏差，sR/(mg/kg) 0.0493 0.0324 0.0442 0.0554 0.628 3 O. 190 4 0.053 3 0.0351 O. 128 0 0.033 7 0.6095 0.322 6 再现
32、性的变异12. 2 16.6 5.6 13.4 14.8 10.0 13.3 17.3 15.0 8. 7 13.7 15.5 I 系数/%再现性限值，RO. 140 0.092 O. 125 0.157 1. 778 O. 539 0.151 0.099 0.362 0.095 1. 725 0.913 回收率/%81. 0 78. 3 78.4 82.9 84.9 76.5 80. 1 81. 5 85.5 77.8 89. 3 83.5 9 G/T 25228-2010 附录C(资料性附录)免症亲和柱层析净化荧光光度法联合实验室测试结果免疫亲和柱层析净化荧光光度法的实验室间测试统计结果见
33、表C.l，样品为添加了伏马毒素标准品FBs(FBj+ FBz + FB3 =5+2十1)的玉米和玉米制品。表C.1联合实验室测试结果玉米玉米制品项目FBs FBs FBs FBs FBs FBs 参加实验室的数量6 6 6 6 6 6 样品的数量1 1 1 1 1 1 去除离群值后的测试实验室数量6 6 6 6 6 6 所有可接受结果的数量18 18 18 18 18 18 平均值/Cmg/kg)0.801 3.93 7.84 o. 798 3.98 7.73 重复性的标准偏差，s，/Cmg/kg)O. 162 5 0.461 3 1. 156 1 0.1449 0.6984 0.792 3
34、重复性的变异系数/%20. 3 11. 7 14.7 18.2 17.6 10.2 重复性限值，/Cmg/kg)O. 460 1. 305 3.272 0.410 1. 977 2.242 再现性标准偏差，SR/ C mg/kg) O. 162 5 0.461 3 1. 156 1 0.1449 O. 698 4 O. 792 3 再现性的变异系数/%20.3 11. 7 14.7 18.2 17.6 10. 2 再现性限值，R/Cmg/kg)0.460 1. 305 3.272 0.410 1. 977 2.242 回收率/%80.1 78.6 78.4 79.8 79.6 77.3 10
35、EON-NN山NH益。华人民共和国家标准粮油检验玉米及其制品中伏马毒素含量测定免疫亲和柱净化高效渣相色谱法和荧光光度法GB/T 25228-2010 国中峰中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销司除印张1字数19千字2010年11月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2010年11月第一版* 定价18.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-40676 GB/T 25228-2010 打印H期:2010年12月9H F002A
