1、道雪ICS 65.020.20 B 21 中华人民共和国国家标准GB/T 29371.5-2012 两系杂交水稻种子生产体系技术规范第5部分:种子纯度鉴定和不育系育性监测技术规范Technical rules for seed production system of two-Iine hybrid rice一Part 5: Technical rules for identification of variety purity & male sterility of MS line 2013-07-01实施2012-12-31发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委
2、员会丸，俨夕阳闹剧ftu叫卢前言GB/T 29371(两系杂交水稻种子生产体系技术规范分为五个部分z一一第1部分z术语z一一第2部分z不育系原种生产技术规范z一一第3部分z不育系大田用种繁殖技术规范z第4部分z杂交制种技术规范;第5部分z种子纯度鉴定和不育系育性监测技术规范。本部分为GB/T29371的第5部分。本部分按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国农作物种子标准化技术委员会(SAC/TC37)归口。GB/T 29371.5-2012 本部分起草单位z湖南杂交水稻研究中心、湖南隆平种业有限公司、湖南农业大学、湖南省种子管理局、安徽省农
3、业科学院、江苏省农业科学院、广东省农业科学院。本部分主要起草人z周承恕、刘爱民、李稳香、肖层林、王守海、吕川根、王丰、廖翠猛、刘建兵、欧阳爱辉。I 1 范围两系杂交水稻种子生产体系技术规范第5部分:种子纯度鉴定和不育系育性监测技术规范GB/T 2937 1.5-2012 GB/T 29371的本部分规定了高温不育型水稻光温敏不育系不青起点温度监测、不育系种子和杂交种种子纯度种植鉴定的方法和程序。本部分适用于已审定或已鉴定的高温不育型光温敏不育系不育起点温度监测、不育系与杂交种种子纯度的种植鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本
4、文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。GB 4404.1一2008粮食作物种子第1部分z禾谷类GB/T 3543.2-1995农作物种子检验规程抨样3 不育系育性监测3. 1 人工气候室监测3. 1. 1 监测材料与要求3. 1. 1. 1 监测材料通过省级或以上农作物品种审定委员会审定或技术鉴定并在生产上使用的水稻光温敏不育系。3.1. 1. 2 材料要求鉴定材料要求种子300g500 g，发芽率80%、纯度注99.5%，并提供该不育系通过审定或鉴定时的品种标准。3. 1. 1.3 奸样要求执行GB/T3543.2-1995的规定。3. 1.2 监测设施条件3
5、. 1. 2. 1 人工气候窒条件人工气候室设置温度为15c 35 C，能保持设定温度恒定，波动幅度和室内温度均句度士0.5C;可控光照强度olx4 X 104 lx. 3. 1. 2. 2 计量器具条件配备照度计、0.2c刻度水银温度计和温度自记仪。1 GB/T 29371.5-2012 3. 1. 3 监测方法3. 1. 3. 1 监测材料准备根据各监测材料播始历期，按8月10日左右始穗确定播种日期。按常规方法浸种、催芽、育秧，5.5叶龄时移栽至大田，密度20cmX20 cm.进入人工气候室前15d，取农艺性状整齐一致、单株分囊穗6个8个的植株移栽人栽培钵，每钵3株，共20钵。钵径25cm
6、30 cm，钵中泥深15cm，按常规方法栽培管理。其中15钵用于人工气候室处理，3钵用作室外对照，2钵用于观察幼穗发育进度。3. 1. 3. 2 处理时期3. 1. 3. 2. 1 轴稻主茎幼穗分化进入H期末时，移入人工气候室进行处理。3. 1.3.2.2 硬稻主茎幼穗分化进入皿期末，移人人工气候室进行处理。3. 1.3.3 处理天触连续处理6d o 3. 1. 3. 4 处理期间温光设置日照长度12.5 h14. 0 h，相浦湿度75%左右，日均温23.5c或23.0c (视鉴定不育系的不育起点温度值而定)，各时间段的温度见表1.表1日平均温度23.5c或23.00C的人工气候室温光设置组度
7、光照时间日均温23.5c 日均温23.0 c 06:01-10:00 23.5 c 23.0 c 光照强度关lX10lx 10:01-18:00 Z6.5 c 26.0 c 20:00-6:00为暗期04.0h) 18:01-22:00 23.5飞;23.0 c 19:3()6:00为暗期03.5h) 22:01-06:00 20. S c 2.O.0.C lS:30-6:00为暗期02.5h) 3. 1.3.5 过蘸期温光设置处理前后2d，如果自然日均温注30c或25C，处理材料应在日温28.C、夜温24c、光照强度1. OX 10. lx条件下过渡2d后，再移人人工气候室或放置自然条件下。
8、3. 1.4 青性观察3. 1.4. 1 现察对象人工气候室处理结束时，挂牌标记剑叶与倒2叶的叶枕距为ocm2 cm的稻穗。3. 1.4.2 观察方法标记穗始穗后每天上午取当天将开花的颖花花药伸长至颖花长三分之二)进行花粉镜检。每穗随2 、GB/T 29371.5-2012 机取5朵6朵颖花的花药制成一个观察片，用12-KI溶液对其花粉染色、压片，在光学显微镜下放大100倍镜检，每片选3个有代表性的视野，每个视野的花粉粒应在50粒以上，观察计数3个视野不同类型花粉(元花粉败育、典败、圆败、染败、正常的数量，计算每片中不同类型花粉的百分率。如果某一观察片发现染色花粉，则视为育性波动。3. 1.
9、4. 3 观察次数每天镜检1次，镜检至标记穗开花结束止。3. 1.4.4 花粉分类3. 1.4.4. 1 元花粉型在显微镜下只见雪花药壁，看不到任何类型的花粉。3. 1.4.4.2 典败花粉一一花粉粒，茄状不规则、粒小，不染色。3. 1. 4. 4. 3 圆败花粉一一花粉粒圆形、大小基本正常，不染色s3. 1.4.4.4 染败花粉J一花粉桂形状不规则、粒小、染色，或花粉粒形状正常、染色浅。3. 1.4.4.5 正常花粉一一花粉粒圆形、大小正常，深染色。3. 1.5 分组标准3. 1. 5. 1 原种标准所有单株材料每次镜检染色花粉率均为零。3. 1.5.2 大田用种标准单株每次销检染色花粉率小
10、于1%，所有单株平均染色花粉率小于0.1%。3.2 多点自然生态监测3.2. 1 监测材料苟要求同3.1.1。3.2.2 播期安排与田间设计在监测地点的最早播种期至最晚播种期期间，每10d播1期，每个播期移栽100个单株，移栽叶龄5.5叶左右，密度13.3 ctnX 20 CUl 田间管理按大田生产要求进行。3.2.3 生育特性与形态特征记载3.2.3. 1 生育特性记载z播种期、移栽期、始穗期，计算播始历期。3.2.3.2 主茎叶片数记载z对奇数播期定点10株，记载主茎总叶片数。3.2.3.3 形态特征z考察不同生长发育时期的形态特征。3.2.4 育性考查3.2.4. 1 花粉镜栓从最早播期
11、始花至最迟正常抽穗播期终花止，每2d3d镜捡一次。期间若发现有染色花粉，从该天起至没有染色花粉之日后两天止，每天镜检花粉。3.2.4.2 自主结实率考查在镜检发现染色花粉的播期中随机选取10个单株完全隔离栽培，齐穗后20d25 d考查自交结GB/T 2937 1.5-2012 实率。3.2.5 不育系群体整齐度调查每个不育系选择2个完全不育的播期，调查生育期、株高、株叶穗粒型、颜色等性状。3.2.6 综合评价3.2.6.1 农艺性状根据监测材料田间的生育特性、植株形态特征、穗粒形状、异交特性、抗性等表现，对照品种介绍，对监测材料群体的稳定性、一致性进行评价。3.2.6.2 不盲起点温度将各自然
12、生态点的育性波动出现的日期与育性敏感期的日平均气温进行对应分析，判断监测材料的不育起点温度。4 种子纯度种植鉴定4. 1 鉴定材料不育系种子和杂交种子。4.2 鉴定程序4.2. 1 抨取样晶按GB/T3543. 2-1995的有关规定执行。4.2.2 选择田块选择田块的基本要求是z田块形状较规则以便于小区布局;土壤肥力均匀、排灌方便z前作不是水稻，或能确认散落在田间的种子已全部发芽或得到清除。4.2.3 设立对照选具有供鉴定品种原有的特征特性的种子和同组合母本种子作对照。4.2.4 小区设计4.2.4. 1 要求将同一品种、类似品种的所有样品和对照样品种相邻种植。4.2.4.2 种植株数不育系
13、原种注4000株P不青系大田用种注1000株z杂交种子注500株。4.2.4.3 种植密度不育系种子10cmX10 cm，杂交种子10cmX 13.3 cmo每行种植10株，不育系原种种植400行，不育系大田用种种植100行，杂交种子种植50行。样品之间间隔25cm。4 、 GB/T 2937 1.5-2012 4.2.5 栽培管理4.2.5. 1 播种采用浸种催芽播种方式。每样品播种面积为0.5m21.0 m2秧龄视生长时期的气温高低而定。海南种植鉴定的播种期根据材料的生育期安排，冬季鉴定宜将抽穗期安排在11月底前，春季鉴定宜将抽穗期安排在4月10日后。杂交种子本地种植鉴定按本品种正季播种，
14、不育系种子按当地制种季节播种。4.2.5.2 移栽单本栽插。4.2.5.3 田间管理选中等土壤肥力的田块作种植鉴定田，较低肥料水平管理;生长期间注意病虫害防治和灭螺灭鼠。4.2.6 鉴定4.2.6. 1 鉴定时期在特征特性表现明显的时期进行鉴定，抽穗开花期和成熟期应进行鉴定。4.2.6.2 晶种真实性鉴定根据对照样品和鉴定品种的性状描述，鉴定样品的品种真实性。4.2.6.3 杂株类型判定不育系种子杂株类型包括同形可育株、异型株、早熟株、迟熟株、其他杂株。杂交种子的杂株类型包括不育系株、同形可育株、异品种株、父本株及其他杂株。4.3 结果计算与判断4.3. 1 结果计算种子纯度以标准品种株数占鉴
15、定总株数的百分率表示，保留1位小数。4.3.2 质量判定种子纯度质量按GB4404. 1-2008的有关规定执行。5 NFONi.hgNH阁。eJVS 也FA-，华人民共和国家标准两系杂交水稻种子生产体系技术规范第5部分:种子纯度鉴定和不育系育性监测技术规范GB/T 29371. 5-2012 国中rFF * 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号。00013)北京市西城区三里凋北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 印张O.75 字数11千字2013年5月第一次印刷开本880X12301/16 2013年5月第一版 书号:155066. 1-46935定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107打印日期:2013年5月17日F002A
