1、GB 359883 1 适用范围 本标准适用于尿素酶法测定尿素或仅含有氮的肥料中尿素态氮含量。该法也适用于相应的工业产品。 2 原理 在一定酸度的溶液中，用尿素酶将尿素态氮转化为氨，再用硫酸标准溶液滴定。反应式如下： 3 试剂和溶液 3.1 溴甲酚绿(HG 3122079)：0.1乙醇溶液。 3.2 甲基橙(HGB 308959)：0.1溶液。 3.3 95乙醇(GB 67980)。 3.4 混合指示剂溶液：6份0.1溴甲酚绿溶液(3.1)和1份0.1甲基橙溶液 (3.2)混合。 3.5 硫酸(GB 62577)。 3.6 0.5N硫酸标准溶液：按照GB 60177化学试剂标准溶液制备方法配制
2、和标定。 3.7 尿素酶：新鲜的1溶液(悬浮液)。 4 仪器 4.1 pH计。 4.2 水浴。 5 测定手续 5.1 试液制备 称取5克试样，称准至0.0002克，置于烧杯中，加水溶解后，移入500毫升容量瓶中，稀释至刻度，混匀。 5.2 滴定 吸取 V毫升(含相当0.200.25克尿素)的试液，移入烧杯中，稀释至100毫升，用0.5N硫酸标准溶液(3.6)滴定至pH为4.2用pH计(4.1)测量；或加入4滴混合指示剂溶液(3.4)，用0.5N硫酸标准溶液(3.6)滴定至溶液呈灰绿色(pH为4.2)为终点，记录所需用量。 另吸取 V毫升试液，移入250毫升带磨口塞的锥形瓶中，稀释至100毫升，
3、加入和上述滴定页码，1/3GB 3598832006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbfF359800j.htm所需体积的0.5N硫酸标准溶液(3.6)，再加入25毫升1尿素酶溶液(3.7)，塞紧瓶塞，用力振荡2分钟，在252下静置1小时或在402水浴(4.2)下静置30分钟，冷却至室温，用水冲洗瓶塞和瓶壁，然后用0.5N硫酸标准溶液(3.6)滴定，开始时快速加入15毫升，再继续滴定至近pH4.2，将溶液定量地移入烧杯中（溶液总体积不大于200毫升），在pH 计（4.1）上，再滴定至pH4.2为终点；或在快速加入15毫升0.5N硫酸标准溶液（3.6）后，再加入4
4、滴混合指示剂溶液（3.4），继续滴定至溶液呈灰绿色（pH为4.2）为终点。 5.3 空白试验 按上述手续进行空白试验。 6 结果的表示 6.1 计算 6.1.1 尿素态氮含量百分数(以干基计)按下式计算： 6.2 允许误差 6.2.1 取平行测定结果的算术平均值为测定结果。 6.2.2 平行测定结果的绝对差值不大于0.10。 6.2.3 不同实验室测定结果的绝对差值不大于0.15。 附 录 A 本标准一般说明 (补充件) A.1 标准中使用的计量仪器，如天平、砝码、容量瓶、滴定管、移液管等应校正后使用。 A.2 标准中使用的水，除特别说明外，均用蒸馏水或去离子水。 A.3 标准中使用的试剂，除
5、特别注明外，均为化学纯以上试剂。 式中： N硫酸标准溶液的当量浓度； V1滴定试样用去硫酸标准溶液的体积，毫升；V2空白试验用去硫酸标准溶液的体积，毫升；V 吸取试液的体积，毫升；G 试样的质量，克；X 试样水分含量百分数；0.01401每毫克当量氮的质量，克。页码，2/3GB 3598832006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbfF359800j.htm A.4 标准中所用酸或氨水液体试剂，只写试剂名称时，系指该试剂标准规定浓度的试剂(即浓酸或浓氨水)。例如硫酸系指9598硫酸，氨水系指2528氨水。 A.5 标准中用液体试剂配制的水溶液，以试剂的体积加水的体积表示时，例如1+3硫酸，系指1体积硫酸和3体积水配成。 A.6 标准中用固体试剂配制的百分浓度溶液，系指100毫升溶液中含有溶质的克数。 A.7 标准中测定手续项中所提及的仪器或试剂和溶液，均使用仪器或试剂和溶液项中所规定的规格。 A.8 空白试验，除不加试样外，操作手续、应用试剂和试剂用量均与测定时相同。 页码，3/3GB 3598832006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbfF359800j.htm
