1、示例ICS65.020.01B61国家 质量 监督 检验 检疫 总局 备案 号： 15845-2004广 东 省 地 方 标 准DB4/T193204桉树无性系工厂化育苗MasSedling-RaisngofEucalyptClone204-08-23发布 204-10-23实施广 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布44DB44/T1932004I目 次前言 .II1范围 .12规范 性引 用文 件 .13术语 与定 义 .14无性 系材 料的 选取 .35桉树 组织 培养 .36组培 苗的 移栽 .57嫩枝 扦插 育苗 .58苗木 出圃 .79工作 档案 .8DB44/T193200
2、4I前 言本标 准由 广东 省林 业局 科技 与对 外合 作处 提出 。 本标 准由 广东 省林 业局 归口 。本标 准起 草单 位： 广 东 省 林 业 科 学 研 究 院 。本标 准主 要起 草人 ：王 振师 、周 丽华 、曾 雷。DB44/T19320041桉树无性系工厂化育苗1范围本标 准规 范了 桉树 无性 系工 厂化 育苗 过程 中无 性系 材料 的选 取、 培 养 基的 配制 、 无 菌 操作 技术 、 外植体 的培 养、 组 培 苗的 育苗 技术 ； 规 范 了嫩 枝扦 插育 苗 采穗 圃的 建立 与管 理、 嫩 枝 扦插 育苗 技术 和苗 木的质 量标 准等 。 本标 准适
3、用于 国营 、集 体和 个体 的桉 树无 性系 组培 工厂 、扦 插育 苗场 。2规范 性引 用文 件 下列 文件 中的 条款 通过 本标 准的 引用 而成 为本 标准 的条 款。凡 是 注日 期的 引用 文件 ，其 随 后所 有 的修改 单 （ 不 包括 勘误 的内 容） 或 修 订版 均不 适用 于本 标准 ， 然 而 ， 鼓 励 根据 本标 准达 成协 议的 各方 研 究是否 可使 用这 些文 件的 最新 版本 。凡 是不 注日 期的 引用 文件 ，其 最新 版本 适用 于本 标准 。GB/T6001-1999育苗 技术 规程GB/T16620-1996林木 育种 及种 子管 理术 语L
4、Y/T1000-1991容器 育苗 技术3术语 与定 义 下列 术语 和定 义适 用于 本标 准：3.1林木 良种 im provedm aterialofforestre通过 试验 与鉴 定， 证 明 在一 定造 林区 域内 ， 其 产 量、 质 量 、 适 应 性、 抗 性 等方 面明 显优 于当 前主 栽材料 的繁 殖材 料。 3.2植物 组织 培养 plantisueculture在无 菌培 养基 上， 对 植 物离 体器 官、 组 织 或细 胞进 行培 养， 以 形 成再 生植 株或 培养 新的 育种 材料 的生物 技术 。3.3优树 superiortre,plustre在生 长量
5、 、树 形、 抗性 或在 其它 性状 上， 显著 地优 越于 周围 林木 的树 木。3.4幼化 处理 rejuvenizeDB44/T19320042使繁 殖材 料保 持和 回复 幼化 状态 的技 术处 理。3.5营养 繁殖 vegetaivepropagation指用 植物 营养 器官 ， 如 根 、 茎 、 叶 、 芽 等 营养 体进 行繁 殖的 系列 方式 。 林 业 上的 无性 繁殖 ， 通 常 为营养 繁殖 。3.6外植 体 culturem aterial,cultures生长 在培 养基 上的 被培 养的 器官 、组 织或 细胞 。3.7培养 基 culturem dium为外
6、植体 的生 长、 发育 提供 所需 物质 的基 质。3.8无性 系 clone由同 一原 株营 养繁 殖产 生的 植株 总和 。3.9母液 m othersolution,m otherliquid为称 量准 确和 方便 贮藏 ，将 培养 基的 成份 配制 成相 应浓 度的 溶液 或混 合溶 液。3.10接种 inoculation指在 无菌 条件 下， 将处 理好 的植 物组 织材 料放 置或 插入 培养 基的 操作 过程 。3.11瓶苗 bottlesedling用玻 璃瓶 作容 器， 通过 植物 组织 培养 形成 的完 整植 株的 总称 。3.12组培 苗 tisueculturesed
7、ling通过 植物 组织 培养 过程 所获 得的 再生 植株 。3.13炼苗 exercisngsedling把组 培生 根的 瓶苗 从人 工控 制的 培养 环境 ，转 移到 近自 然环 境下 培养 ,以提 高瓶 苗的 木质 化程 度和适应 自然 环境 能力 的过 程。 3.14基质 substrate,m dium栽植 组培 苗或 扦插 育苗 的基 本物 质。 由黄 心土 、沙 、泥 炭土 等材 料混 合而 成。3.15采穗 圃 cutingorchard提供 优良 穗条 的母 本种 植园 。3.16插穗 cuting将枝 条、 苗干 等种 条截 制成 段， 用于 插条 育苗 和分 殖造 林
8、， 这种 扦插 材料 称插 穗。DB44/T193200433.17采穗 母株 stockplant生产 穗条 的母 本植 株。3.18扦插 cuting用植 物的 枝条 或茎 段， 经处 理后 ，插 在适 宜的 基质 中， 促使 其发 生不 定根 和形 成完 整植 株的 过程 。3.19嫩枝 扦插 shootcuting用生 长健 壮、 半木 质化 的枝 条进 行扦 插育 苗的 过程 。 3.1、 3.2、 3.3、 3.4、 3.5、 3.6、 3.7、 3.8、 3.15、 3.16引用于 GB/T16620。4无性 系材 料的 选取 采用 营养 繁殖 表现 优良 的桉 树林 木良 种，
9、 作为 无性 系工 厂化 育苗 生产 的材 料。5桉树 组织 培养5.1外植 体5.1.1采用 经幼 化处 理的 桉树 良种 的枝 条作 为营 养繁 殖的 外植 体。5.1.2为减 少接 种材 料的 污染 ，采 取外 植体 时， 应选 择连 续三 天以 上晴 好天 气后 进行 。5.1.3外植 体消 毒5.1.3.1将外 植体 用自 来水 冲洗 5分钟 。5.1.3.2在无 菌条 件下 ，用 75%酒精 消毒 (5 10)秒， 无菌 水冲洗 2次。5.1.3.3用 1g/l升汞 溶液 ， 加 吐 温 -20两滴 浸没 材料 ， 轻 微 摇动 ， 消 毒 (2 5)分钟 ， 再 用 无菌 水冲
10、洗5次。5.2培养 基的 配制5.2.1培养 基的 成分a)芽增 殖培 养基 ：在 培养 基中 加适 量细 胞分 裂素 和生 长素 ，促 进芽 增殖 生长 的培 养基 。b)根诱 导培 养基 ：在 培养 基中 加适 量植 物生 长素 ，促 进生 根的 培养 基。5.2.2母液 配制5.2.2.1母液 用蒸 馏水 配制 。5.2.2.2氮、 磷、 钾等 无机 盐配 制的 混合 溶液 称为 大量 元素 母液 ，硫 、钙 、镁 、锰 、铜 、锌 、硼 等无机盐 配制 的混 合溶 液称 为微 量元 素母 液， 铁 盐 单独 配成 母液 ， 有 机 成分 和附 加成 分分 别配 成母 液。 母 液按相
11、应浓 度配 制。 配制 时， 各种 物质 要充 分溶 解后 混合 ，配 制好 的母 液置 于冰 箱冷 藏。DB44/T193200445.2.3培养 基配 制5.2.3.1依照 所设 计的 培养 基配 方， 按比 例吸 取母 液注 入容 量瓶 内， 加水 定容 ，倒 进不 锈钢 锅内 。5.2.3.2加入 凝固 剂和 糖。5.2.3.3边加 热边 搅拌 以免 煮糊 ，使 凝固 剂和 糖完 全溶 解。5.2.3.4用盐 酸或 氢氧 化钠 溶液 调整 pH值。5.2.3.5将培 养基 尽快 分装 到培 养瓶 内， 盖好 瓶盖 。5.2.3.6培养 基消 毒加热 ：把 分装 好的 瓶装 培养 基放
12、入高 压消 毒锅 中密 闭、 加热 。排气 ：当 消毒 锅的 消毒 室内 气压 达到 0.05Mpa时， 打开 冷凝 阀， 排尽 消毒 室内 冷空 气。消毒 时间 ： 当 消 毒室 内气 压达到 0.11Mpa、 温 度 达到 121 时， 开 始 计时 ， 保 持 消毒 20分钟 。 然 后关闭 开关 ， 慢 慢 排放 热气 ， 待 消 毒室 内的 气压 表读 数为 0时打 开消 毒锅 盖， 取 出 培养 基， 放 置 到经 过 消毒的 接种 室备 料间 内。5.3无菌 操作5.3.1接种 前的 准备 工作5.3.1.1接种 操作 人员 要保 持自 身和 穿着 衣物 的清 洁。 工 作 前用
13、 肥皂 洗手 ， 换 工 作服 和拖 鞋， 戴 口 罩 。5.3.1.2每次 接种 操作 前都 要用 75%酒精 擦手 消毒 。5.3.2超净 工作 台的 准备 工作5.3.2.1超净 工作 台连 续工作 4小时 ，再 次使 用时 要进 行消 毒， 方法 是： 用消 毒酒 精喷 洒在 工作 台上的工 具、 出风 板、 台面 和两 边玻 璃， 再用 灭菌 纱布 抹一 次。 5.3.2.2摆放 好必 用物 品， 放到 超净 工作 台台 面上 的物 品都 要经 过消 毒。5.3.2.3开启 超净 工作 台上 和接 种室 内的 紫外 灯， 消毒 20分钟 。5.3.2.4消毒 结束 后， 开动 超净
14、工作 台风 机通风 15分钟 。5.3.3接种5.3.3.1接种 动作 要轻 巧快 捷， 接种 材料 与培 养基 接触 良好 ，深 浅适 中， 分布 均匀 。5.3.3.2接种 人员 在接 种过 程中 尽量 不要 说话 ，以 防细 菌传 播， 造成 接种 材料 污染 。5.3.3.3为防 交叉 污染 ，每 瓶材 料接 种完 后， 盛装 过接 种材 料的 碟子 、纸 张须 更换 ，使 用过 的镊 子、刀具 用消 毒纱 布擦 干净 ，高 温灭 菌处 理后 方可 再次 使用 。 5.3.3.4接种 后， 盖上 和扭 紧瓶 盖， 标注 材料 名称 、接 种日 期。 做好 超净 工作 台的 清洁 工作
15、。5.4培养 条件DB44/T193200455.4.1培养 室内 的温 度控 制在 28（ 2） 。5.4.2光照 强度 为 (2000 3000)Lx，光 照时 间每 天 (8 12)小时 。5.5组培 生根 瓶苗 质量 标准苗高 (2.5 3.5)cm，生 长正 常， 根白 色， 根系 完整 。6组培 苗的 移栽6.1炼苗将生 根瓶 苗置 于炼 苗温 室或 荫棚 内炼 苗 (10 20)天， 移苗 前拧 松或 打开 瓶盖 ，再 炼苗 (4 5)天。6.2移苗 基质移苗 基质 为过 筛的 黄心 土。育 苗 容器 中装 好基 质后 ，在 移 栽前 2天用 (0.05 0.10)%高锰 酸钾
16、溶 液淋透 消毒 。 6.3移苗6.3.1移苗 前洗 干净 粘附 在生 根苗 根上 的培 养基 ，不 要损 伤组 培苗 的幼 根。6.3.2移苗 在早 、晚 或阴 天进 行， 移植 时， 把根 放进 预先 打好 的小 孔中 ，使 根系 舒展 ，填 满土 充分 压实， 使根 土密 接， 要防 止栽 植过 深、 窝根 或露 根， 每个 容器 内移 苗一 株， 移植 后随 即浇 透水 。 6.4移栽 苗的 管理6.4.1栽植 后用 塑料 薄膜 作小 拱盖 好小 苗保 湿， 遮荫 70%左右 。6.4.2适当 喷雾 ，保 持湿 度 (80 95)%。6.4.3为防 止发 生病 害， 移苗 后当 天喷
17、防病 药剂 一次 ，以 后每 星期 喷药 一次 ，常 用药 剂和 施用 方法 参照 GB/T6001附录 E。6.4.4一周 后打 开小 拱两 头的 塑料 薄膜 ，以 后逐 渐打 开小 拱两 边的 塑料 薄膜 ， 15天后 全部 打开 。6.4.5移植 成活 后， 喷雾 可改 为用 花洒 淋水 。每 (7 10)天淋施 3g/l的尿 素或 复合 肥的 水溶 液， 施肥后淋 一次 清水 冲洗 叶面 。 6.4.6生长 弱的 植株 ，适 当增 加喷施 3g/l的尿 素或 磷酸 二氢 钾溶 液。6.5组培 苗出 圃质 量标 准苗高 (10 15)cm，地 径 (0.2 0.3)cm，生 长正 常，
18、无病 虫害 。7嫩枝 扦插 育苗7.1扦插 苗圃 的建 立根据 产苗 量决 定桉 树扦 插苗 圃建 设的 规模 ， 扦 插 苗圃 要作 好采 穗圃 的规 划， 苗 圃 的规 划、 建 立 参 照DB44/T19320046GB/T6001的要 求。7.1.1扦插 荫棚7.1.1.1扦插 荫棚 的面 积根 据产 苗量 而定 ，荫 棚内 每平 方米 年产 苗量 约为 1000株。7.1.1.2棚顶 覆盖 遮光 网， 遮光 度为 (50 70)%。7.1.1.3扦插 棚内 的地 面为 水泥 地或 碎石 地， 两边 低中 间略 高， 以利 排水 。在 扦插 苗出 棚后 ，要 清除杂物 ，刷 洗地 板并
19、 用漂 白粉 或生 石灰 等消 毒剂 消毒 。对 重复 使用 的物 品和 工具 要进 行清 洗和 消毒 。 7.1.2扦插 场7.1.2.1扦插 场为 就地 扦插 就地 炼苗 出圃 ，不 需固 定荫 棚的 育苗 场地 。7.1.2.2扦插 场的 地面 为实 地， 四周 稍低 中间 略高 ，苗 床插 苗后 作小 拱， 上盖 遮光 网， 遮光 度 (60%70%)，待 扦插 苗大 部分 生根 后揭 开遮 光网 ，就 地炼 苗出 圃。7.2育苗 容器7.2.1塑料 薄膜 育苗 袋： 用 厚度 (0.02 0.06)mm的无 毒塑 料薄 膜加 工制 作而 成， 在 育苗 袋的 中下 部 打(6 12)
20、个直 径 (0.4 0.6)cm的小 孔。 常用 容器 规格 参照 LY/T1000附录 A7.2.2塑料 育苗 管：用 硬 质塑 料制 成的 圆锥 形底 部有 排水 孔的 容器 ，圆 锥 形窗 口内 壁有 4条棱 状突 起 ，塑料 育苗 管的 规格 为： 4cm 1.5cm 13cm。7.2.3塑料 育苗 管架 用直径 6mm的钢 筋与 8#铁线 焊接 而成 ， 每 架 摆放 育苗管 100个， 育 苗容 器摆 放 按LY/T1000的要 求。7.3扦插 基质7.3.1黄心 土风 干、 粉碎 和过 筛后 ，单 独或 黄心 土 +谷壳 灰（ 或泥 炭土 ）按 9： 1混合 后使 用。7.3.2
21、基质 消毒 ：用 (0.5 1)g/l的高 锰酸 钾水 溶液 充分 淋透 基质 ，消 毒后 24小时 即可 使用 。7.4采穗 圃的 建立 采穗 圃应 建立 在交 通、 灌 溉 和管 理方 便， 空 气 流通 、 阳 光 充足 的地 方， 场 地 应选 用新 开垦 的坡 地 。桉树 嫩枝 扦插 育苗 采穗 圃采 用灌 丛式 作业 。 7.4.1采穗 母株7.4.1.1选择 苗高 (10 15)cm，生 长健 壮， 无病 虫害 的组 培苗 作采 穗母 株。7.4.1.2母株 起垅 种植 ，垅 的 宽度 (100 120)cm，垅 间 的人 行道宽 40cm。母 株 种植 的株 距 (15 20)
22、cm，行距 (20 25)cm。7.4.1.3采穗 母株 3年更 新一 次。7.4.1.4绘制 好各 无性 系定 植图 ，作 好无 性系 品种 标记 。DB44/T193200477.4.2采穗 圃的 管理7.4.2.1采穗 圃要 精耕 细作 ，及 时做 好松 土、 人工 除草 、追 肥、 浇水 和病 虫害 防治 等工 作。7.4.2.2结合 采集 插条 对母 株进 行修 剪， 除去 残枝 病叶 。如 果长 时间 不采 集穗 条， 要定 期修 剪母 株。发现 病虫 害严 重为 害的 母株 ，应 立即 销毁 。7.4.3插条 的采 集7.4.3.1采穗 母株 定植 后将 顶梢 剪下 ，母 株基
23、部保 留 (2 3)对小 叶。 一个 月后 母株 萌发 数条 新梢 ，新梢生 长达 到穗 条标 准时 ，要 及时 采集 。 7.4.3.2采集 时间 ：宜 在早 上或 天气 凉爽 时剪 取枝 条。7.4.3.3采集 方法 ： 剪 取 母株 上生 长健 壮、 半 木 质化 、 长 度 为 (8 10)cm的枝 条。 将 基部 4 6cm以 上叶片 剪去 ，基 部切 口要 平滑 ，剪 下的 枝条 放入 盛有 清水 盆中 。 7.4.3.4穗条 消毒 ：枝 条采 集完 毕，用 0.05%的高 锰酸 钾溶 液浸 泡基部 5分钟 ，再 用清 水冲 洗干 净。7.5生根 激素 处理用植 物生 长调 节物
24、质调 制成 生根 粉或 生根 水， 扦插 时用 生根 粉或 生根 水蘸 插条 基部 ，随 蘸随 插。7.6扦插嫩枝 扦插 在秋 、 冬 、 春 早 晚或 阴天 气温 凉爽 时进 行。 扦 插 时先 在基 质上 打孔 ， 扦 插 深度为 4 6cm，把经 生根 激素 处理 的枝 条插 好后 压实 。7.7扦插 后的 管理7.7.1遮光 保湿 ：插 床遮光 70%，保 持空 气相 对湿 度 (85 95)%。7.7.2病虫 害防 治： 插 后 当天 喷一 次灭 菌剂 ， 以 后 每周 喷灭 菌剂 一次 。 发 现 烂叶 、 死 株 ， 应 立 即清 除 ，并喷 灭菌 剂。 发 病 的苗 床每 三天
25、 喷一 次灭 菌剂 。 发 现 扦插 穗条 有害 虫， 应 及 时喷 洒杀 虫剂 。 常 用 药剂 和施用 方法 参照 GB/T6001附录 E。7.7.3扦插 条大 部分 生根 后， 揭开 遮荫 网进 行露 地培 育。8苗木 出圃8.1出圃 苗的 规格 ：苗 高 (12 18)cm，地 径 (0.2 0.3)cm，新 梢 (3 5)cm，根 系完 整， 无病 虫害 。8.2苗木 出圃 包括 苗木 分级 、露 地炼 苗、 包装 和运 输等 工序 。8.3苗木 分级 与露 地炼 苗相 结合 。苗 木分 为死 苗、 不合 格苗 和合 格苗 ，死 苗的 容器 与基 质不 再使 用；不合 格苗 继续
26、培育 ，加 强水 肥管 理； 合格 苗进 行露 地炼 苗 (7 15)天即 可出 圃种 植。8.4包装 苗木 的用 具有 塑料 箱、 竹箩 筐和 竹箕 ，装 苗时 不能 有折 断苗 和脱 袋裸 根苗 ，同 类包 装用 具装苗的 数量 要相 同。DB44/T193200488.5苗木 包装 后要 及时 运输 ，途 中注 意通 风， 避免 风吹 、日 晒， 以防 苗木 发热 与风 干， 必要 时还 要淋水。 9工作 档案9.1桉树 无性 系工 厂化 育苗 工作 要建 立基 本情 况、 技术 管理 和科 学试 验等 各项 档案 ，积 累生 产与 科研数据 资料 ，为 提高 育苗 技术 和经 营管 理水 平提 供科 学依 据。 9.2基本 情况 档案 包括 ：生 产资 料使 用、 苗木 经营 和人 员管 理等 内容 。9.3技术 管理 档案 包括 ：苗 木生 长发 育情 况和 各阶 段采 取的 技术 措施 ；各 项作 业的 用工 量和 各种 药品及水 、肥 、电 的使 用情 况。 9.4科学 试验 档案 包括 ：各 项试 验的 设计 和试 验结 果资 料等 。9.5桉树 无性 系工 厂化 育苗 工作 档案 要有 专人 记载 ，分 阶段 系统 整理 ，由 技术 负责 人审 查存 档， 长期保存 。
