1、ICS 71.100.70 Y 42 中华人民=IJ工和国国家标准G/T 24800.3-2009 化妆品中螺内醋、过氧苯甲酷和维甲酸的测定高效液相色谱法2009-11-30发布Determination of spironolacton, benzoyl peroxide and lretinoin in cosmetics by high performance Jiquid chromatography method 法斗f2010-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菠总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T 24800 .3-2009 本标准的附录A为资料性附录。本标准由中
2、国轻工业联合会提出。目IJa:I 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会CSAC/TC257)归口。本标准负责起草单位:中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所、上海香料研究所。本标准主要起草人:王星、武婷、马强、张庆、肖海清、沈敏、康薇。I GB/T 24800.3-2009 百|本标准中的被测物质螺内醋、维甲酸是我国化妆品卫生规范规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，则化妆品成品应符合化妆品卫生规范对化妆品的一般要求，血丘丘主及合理的、可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害。目前我国尚未规定这些物质u 1
3、 范围本标准规定了化妆品中部A 本标准适用于皮肤拍2 原理3.2 螺内醋，3. 3 螺内醋标后移人100mL 箱冷藏保存。甲醇溶解后移人10准储备液。注:由于过氧苯甲酷i3. 5 维甲酸标准储备液:后移人100mL容量瓶中，用箱避光冷藏保存。GB/T 24800.3-2009 化妆品中螺内醋、过氧苯甲酷和维甲酸的测定高效液相色谱法mg/kg;维甲酸的检出限，于50mL是杯卡，加适量甲醇溶解为1000品19/珊的标准储备液。冰000 1户，于10mL烧杯中，加适量甲mL烧杯中，加适量甲醇溶解1 000 mg/L的标准储备液。冰注:由于维甲酸对光十分敏感川岛懒也监脑牛础。3. 6 标准混合溶液:分
4、别移取10mL的上述三种标准储备液(3.3、3.4、3.5)至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，即得三种物质均为100mg/L的混合标准储备液。3. 7 标准工作溶液:用甲醇将上述标准混合溶液(3.6)分别配成一系列浓度1.0mg/L、2.0mg/L、5.0 mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准工作溶液，现用现配。3. 8 O. 1 mo1/L的氢氧化锅溶液:称取氢氧化纳0.4g，精确到0.001g，于50mL烧杯中，加水溶解后转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，即得0.1mol/L的氢氧化锅溶液。3. 9 O. 025 mo1/L
5、磷酸二氢铀溶液(pH6.5):称取磷酸二氢纳(NaH2P01 2HzO)3. 9 g，精确至0.001 g，于50mL烧杯中，加水溶解，移入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，&11得到0.025 mol/L的磷酸二氢铀溶液。用0.1mol/L氢氧化锅溶液(3.8)调节pH值至6.5。G/T 24800.3-2009 4 仪器4. 1 液相色谱仪，配有二极管阵列检测器。4.2 微量进样器，10L。4. 3 超声波清洗器。4. 4 离心机，大于5000 r/min。4. 5 溶剂过滤器和0.45m有机过滤膜。4. 6 具塞比色管，10mL。5 测定步骤5. 1 样品处理称取化妆品试样约
6、0.2g，精确到0.001g，于10mL具塞比色管中，加人8mL甲醇，在超声波清洗器中超声振荡20min，冷却后用甲醇稀释至J度，混匀。取部分溶液放人离心管中，在离心机上于5 000 r/min离心20min，离心后的上清液经0.45m有机滤膜过滤，滤液待测定用。5.2 测定5.2. 1 色谱条件5.2. 1. 1 色谱柱:Kromasl CIS柱(250mmX4. 6 mm内径，5m); 5.2. 1. 2 流动相:八:甲醇.B:O.025 mol/L磷酸二氢铀溶液(pH6.5) (3.9)，梯度洗脱条件见表l。时间Imin巳5 7 13 5.2. 1. 3 流速:1. 0 rnL/min;
7、 5.2.1 . 4 柱温:25oC; 表1方法的梯度洗脱条件A/% 80 80 90 90 5.2. 1. 5 检测说长:0.，9.50mn , 240 nm ,9. 51 min.13 min , 335 nm; 5.2. 1. 6 进样盘:10L。5.2.2 标准工作曲线绘制B/% 20 20 10 10 分别移取一系列浓度为1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、200 mg/L的混合标准工作溶液，按色谱条件(5.2.1)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准物质色谱图参见附录A的图A
8、.l。5.2.3 试样测定用微量注射器准确吸取试样溶液(5.1)注入液相色谱仪，按色谱条件(5.2.1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰顶积，由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应的被测物浓度。样品溶液中的被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。被测物含量高的试样可取适量试样溶液用流动相稀释后进行测定。5.2.4 定性确认液相色谱仪对样品进行定性测定，进行样品测定时，如果检出蝶、内醋、过氧苯甲酷或维甲酸的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收图谱与标准品的紫外吸收图谱相一致，则可初步判断样品中存在螺内醋、过氧苯甲酷或维甲酸。必要时，阳性样品德用2
9、 其他方法进行确认试验。5.3 平行试验按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。5. 4 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。6 结果计算结果按式(1)计算(计算结果应扣除空白值): X , = s_二主-m 式中:X, 样品中被测物质的质量浓度，单位为毫克每千克Cmg/kg); c 标准曲线查得被测物质的浓度，单位为毫克每升(mg/L)i V一-样品稀释后的总体积，单位为毫升(mL)i m一一-样品质量，单位为克(g)o7 方法检出限与定量限GB/T 24800.3-2009 _. ( 1 ) 螺内醋、过氧苯甲酷的检出限均为2.5mg/怡，定量限均为5mg/kg;维甲酸的检出限为1mg
10、/kg , 定量限为2.5mg/kg。8 回收率与精密度在添加浓度5mg/kg -.; 50 mg/kg浓度范围内，回收率在85%-110%之间，相对标准偏差小于10%。9 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。CON-30寸NH筒。GB/T 24800.3-2009 附录资料性附录)标准物质的液相色谱固A -hh-C【mAlJ 175 N0，-v150 125 50 25 100 75 。14 12 10 8 6 4 2 1-一一蝶、内酣(4.072min) ; 2 过氧苯甲酿(7.587 min); 3一一维甲酸(10.871min)。侵权必究司k版权专有螺内醋、过氧苯甲酷和维甲酸的标准液相色谱图图A.1书号;155066.1-39671 14.00元定价:GB/T 24800. 3-2009 打印FI别:2010年2月2H F007
