1、阳、.卢ICS 13.310 A 92 中华人民共和国公共安全行业标准GA 655-2006 人毛发ABO血型检测解离法Detection method for ABO blood type in human hairs-Elution test 2006嗣门嗣03发布2007-03-01实施中华人民共和国公安部发布前本标准的4.la)为强制性的,真余为推荐性的。本标准的附录A为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位2公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA 655-2006 本标准起草人:温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李浩、刘旭丹、常影琴、张英兰、
2、李兆隆等。I GA 655-2006 人毛发ABO血型检测解离法1 范围本标准规定了法医生物物证检验中人毛发ABO血型检测的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人毛发ABO血型。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GA 471一2004抗A、抗B血清试剂3 原理解离法是利用抗原和抗体反应所形成的抗原抗体复合物,在一定条件下抗原抗体复合物可以
3、释放抗体,而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。毛发检材中的ABO血型物质存在于髓质中,在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下,发生抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物。当在50C56C条件下,抗原抗体复合物发生解离,使抗体游离于液体中,当温度降低至37C左右时,游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应,在显微镜下可观察到凝集块。根据与相应指示红细胞发生提集反应的情况,可判断ABO血型。4 试剂与器材4. 1 试剂a) 标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471-2004的各项要求;b) A型、B型指示红细胞悬被(0.2%)(见附录A); c) 无水乙醇;d) 无水乙酷;e) 洗撮液;f
4、) 生理盐水。4.2 器材a) 台式离心机;b) 光学显微镜;c) 负压吸引装置;d) 恒温箱;e) 冰箱;f) 加样器、加样器吸头;g) 眼科剪、眼科慑;h) 压毛机或其他替代设备、器材;i) 凹玻板;j) 载玻片、盖玻片、载玻片架、保温盒、毛细管;k) 记号笔、滤纸、脱脂棉。1 GA 655-2006 5 操作方法5. 1 取待检毛发,用洗禄剂清洗,然后用无水乙醇浸泡20min - 30 min脱水,无水乙酷漫泡10min 脱脂。5.2 用压毛机(也可用其他方法)将毛发压扁,使其暴露出毛发髓质,压后其直径约为压前的3倍4倍。5.3 用洁净的眼科剪剪取压好的毛发两段,每段约0.4cm,分别置
5、于凹玻板对应的上下两凹内,并分别标记A与Bo5.4 按标记,分别在两凹内滴加相应的标准抗A、标准抗B抗体试剂各1滴-2滴,使毛发完全漫在抗体试剂中。将凹玻极置于保温盒内,在每匮哼栅官嚣宵俨向服收20min,取出保温盒,将其置于40C冰箱中,吸收3h,.4 h或吸收过夜。5.5 取出毛发后,用滤内,用冷生理盐水洗捧4置于载玻片两端,并恒温箱中5min 5. 7 从恒温箱中记录凝集情况,6 结果判定结果判l 2 3 4 7 注意事项加盖玻片,并置560C结果判定。A B AB 7. 1 检验的同时应取果才能来倍。酣果正确时,样本的检验结7.2指示红细胞应新鲜配时在跚嘎型商:智彝翩象,1Wi.1喉用
6、应进行洗涤。另外,指示细胞为同型多人份温合血液制备7.3 抗体的效价不应低于1: 128 7.4 毛发压扁的程度,以暴露髓质而又不使7.5 抗体吸收时间不应少于3h4 ho 7.6 若无条件负压吸收,则应放于40C冰箱,适当延长吸收时间,使之充分吸收。7.7 服收后的洗涤次数应根据洗涤的手法、轻重而相应调整。7.8 加盖玻片时,应避免出现气泡。7.9 在判断结果时,除了应考虑阳性和阴性对照外,还要注意A、B抗原性的不均衡性,有时需要适当调高标准抗A抗体试剂效价。2 A. 1 配制材料a) 新鲜A型、B型人红细胞pb) 生理盐水;c) 离L机、离心管、吸管;d) 加样器、加样器吸头;e) 记号笔
7、。A.2 操作步骤附录A规范性附录)指示红细胞配制GA 655-2006 A.2. 1 在3个10mL离心管上分别标记上A型、B型字样,并分别拥入5mL-8 mL生理盐水,然后分别加入约0.5mL新鲜A型、B型、0型人红细胞。A. 2. 2 将以上3个离心智离心.800r/min-1 000 r/min.5 min。A. 2. 3 轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为元色透明,进行下一步,如果上清液颜色淡红,则要重复A.2.1和A.2. 2步骤,直至其颜色为无色透明。A. 2. 4 用生理盐水将A.2. 3搅撩后的红细胞分别配成0.2%A型、B型红细胞悬液。OON-s司。中华人民共和国公共安全行业标准人毛发ABO血型检测解离法GA 655-2006 峰中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北衔16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销4峰印张。.5字数6千字2007年1月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2007年1月第一版定价8.00元4峰书号:155066 2-17417 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GA