1、ICS 13.310 A 92 中华人民共和国公共安全行业标准GA 657-2006 人体液斑ABO血型检测凝集抑制试验Detection method for ABO blood type in human body fluid stains一Hemagglutination inhibition. test 2006嗣门-03发布2007-03-01实施中华人民共和国公安部发布中华人民共和国公共安全行业标准人体班斑ABO血型检测提集抑制试验GA 657-2006 * 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三旦河北街16号邮政编码:100045网址电话16852394668517548 中国标准
2、出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销铃开本880X12301/16 印张O.5 字数9千字2007年1月第一版2007年1月第一次印刷* 书号1155066.2-17419 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533前言本标准的4.la)为强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位z公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA 657-2006 本标准起草人z温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李潭、刘旭丹、常影琴、张英兰、李兆隆等。I 1 范围人体液斑ABO
3、血型检测凝集抑制试验GA 657-2006 本标准规定了法医生物物证检验中用凝集抑制试验法检测人体被斑ABO血型的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人体液斑ABO血型。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GA 471-2004 抗A、抗B血清试剂3 原理在分泌型人体液斑中存在有水榕性A型、B型和H型抗原物质，其抗原物质为半抗原，能特异性地
4、与相应抗体结合，从而抑制该抗体与相应的指示红细胞发生凝集，根据抗体与相应指示红细胞发生凝集情况，判断被检人体液斑ABO血型。4 试剂与器材4. 1 试荆a) 标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471-2004的各项要求;b) 抗H抗体试剂(效价应大于16倍)j c) 2%-3%A型、B型、0型人指示红细胞(见附录A)j d) 生理盐水。4.2 器材a) 台式离心机;b) 光学显微镜;c) 凹玻板、吸管、试管、离心管;d) 眼科剪、眼科慑;的加样器、加样器吸头;f) 记号笔。5 操作方法5. 1 抗体的标化见附录Bo5.2 检验步骤5.2. 1 剪取待检体液斑约1cm2放人小离心管中，加生
5、理盐水少许浸泡(以能吸出3滴为宜)，并充分搅拌、浸泡，根据被检体液斑的陈旧程度，漫泡十几分钟到几小时不等。1 GA 657-2006 5.2.2将体液斑浸出被离心，然后吸取上清液3滴，分别加到标记有A，B、0的3排洁净凹玻板的第一凹中，并用生理盐水分别倍比稀释。每一排稀释到第六凹即可。5.2.3 每一凹内按标记分别加入1滴标化好的抗A、抗B和抗H抗体试剂。5.2.4 混匀后置保湿盒内，室温反应30min。5.2.5每凹内分别滴加5.1中配制的2%3%的红细胞悬液1滴，摇动凹玻板棍匀，置保温盒内，室温30min60 min，然后肉眼观察凝集情况，必要时光学显微镜下观察，记录结果。6 结果判定结果
6、判定见表1。被检体浓斑编号1 2 3 4 5 7 注意事项囊1抗A目由几百国抗B抗日抗A飞|隐抗B血型判定32 A型十: 1: N B型十1+B型I + I唱|国0型AB型非分泌型7. 1 在检测体液斑血型时，监慰自神照现扭身型分调体液斑对照，并只有当空白和已知对照检测结果正确时，样本7.2抗体标化的效价，应根据体液褂问革黠盟路酬哥在鲜的体液斑时，可将抗体效价标化到1 : 16，较陈旧的体掖斑或量较少时，将抗体效价标定为1: 8. 7.3 在检测过程中，加待检体液斑搜出液或抗体时，滴的大小应当一致。7.4 加入指示红细胞后，应即刻摇动凹玻板，并每隔几分钟摇动1次，避免红细胞粘附凹底，影响凝集的
7、观察。2 A. 1 配制材料a) 新鲜A型、B型、0型人红细胞;b) 生理盐水;c) 离心机、离心智、吸管;d) 加样器、加样器吸头pe) 记号笔。A.2 操作步骤附景A(规范性附录)指示红细胞配制GA 657-2006 A.2. 1 在3个10mL离心管上分别标记上A型、B型、0型字样，并分别加入5mL8 mL生理盐水，然后在分别加入约0.5mL新鲜A型、B型、0型人红细胞。A. 2. 2 将以上3个离心管离心，800r/minl 000 r/min, 5 mino A. 2. 3 轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色榄红，则要重复A.2. 1和A.2.
8、2步骤，直至其颜色为无色透明。A.2.4 用生理盐水将A.2. 3洗涤后的红细胞分别配成2%3%A型、B型和0型红细胞悬液。goN-B司。附录B(规范性附录)抗体的标化GA 657-2006 标化材料标准扰A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471-2004的各项要求;抗日抗体试剂(效价应大于16倍); 凹玻板;吸管;2%-3%A型、B型、0型人指示红细胞;生理盐水;记号笔。) ab-CAuerLg B.l 操作步骤B. 2. 1 将3排凹玻板分别标记上A、B、0。B.2.2 每一排的第一凹内分别加入2滴B.1a)和B.1b)中的抗A抗体、抗B抗体和抗H抗体试剂。其余的四内分别加人2滴生理盐水。
9、B.2.3将每排的第一凹内分别加入2滴生理盐水，进行倍比稀释，至1024倍。B.2.4 于A排的每四中加入1滴B.1 e)中的2%-3%A型指示红细胞;于B排的每凹中加入1滴2%-3%B型指示红细胞;于0排的每凹中加入1滴2%3%O型指示红细胞。B. 2. 5 tl昆匀，30min内观察细胞凝集情况，并根据其效价，用生理盐水搭液配制成1: 8或1: 16 效价。B.2.6将配制后的1: 8或1: 16倍的抗A抗体、抗B抗体和抗H抗体试剂1滴分别与1滴2%-3%A型、B型、0型人指示红细胞反应，其凝集程度和出现凝集时间应尽可能的保持一致。否则应当用抗体原液或生理盐水榕液调节。B.2 究制一必口一权去一侵一传出一有m专归一山州弘一批自书一定8. 00元GA 657-2006
