1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的测定方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犿犻狀狅狀犻狋狉狅狆犺犲狀狅犾犪狀犱犪犿犻狀狅狀犻狋狉狅狆犺犲狀狅犾犻狀犺犪犻狉犱狔犲犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录、附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：于文莲、陈伟、张青、周新、白桦、王超。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、
2、发售进出口染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的测定方法范围本标准规定了氧化型染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的液相色谱测定方法。本标准适用于氧化型染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的测定。原理氧化型染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚用甲醇超声提取，离心，取上清液过滤，采用配有紫外检测器的液相色谱仪测定。根据其保留时间定性，外标法定量，液相色谱质谱法确证。试剂与材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。甲醇：高效液相色谱级。磷酸二氢钾溶液（）：称取磷酸二氢钾用水稀释至，用氢氧化钾溶液调至。标准品：氨基硝基苯酚（）：纯度；氨基硝基苯酚（）：纯度。标准储备溶液（）：准确称取适量氨基硝基苯酚
3、和氨基硝基苯酚（精确到），以甲醇配制成浓度均为的标准储备溶液。冷冻避光保存周内使用。标准工作溶液：根据需要移取适量标准储备溶液，用甲醇稀释成适用浓度的标准工作溶液，当天配制，使用棕色容量瓶。仪器和设备液相色谱仪：配有紫外检测器。液相色谱串联质谱。超声波清洗器。高速离心机。涡旋振荡器。测定步骤试样的处理准确称取氧化型染发剂中染剂约（精确到），置于棕色具塞离心管中，加入甲醇约，在涡旋振荡器上混匀后，超声波清洗器中超声提取，转入棕色容量瓶，用甲醇定容至刻度。取部分溶液放入具塞离心管中，离心后，取上清液经微孔滤膜过滤，滤液供上机测定用。测定液相色谱测定条件色谱柱：，（内径）或相当者。犛犖犜版权所有 禁
4、止翻制、电子传阅、发售流动相：甲醇、乙腈、磷酸二氢钾溶液，梯度洗脱条件见表。表梯度洗脱条件时间甲醇乙腈磷酸二氢钾溶液流速：。检测波长：。进样体积：。柱温：室温。标准工作曲线的绘制分别移取氨基硝基苯酚、氨基硝基苯酚标准储备溶液（）各、到一系列棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得、的系列混合标准工作溶液。按照色谱条件（）进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准品色谱图参见附录。试样的测定根据进行样品处理，得到的样液根据仪器测定条件进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积。如果待测物质含量超过标准曲线线性范围，可适当稀释后进行测定。需要时可进行确证（
5、参见附录）。结果计算结果按式（）计算：犡犮犞犿（）式中：犡染发剂中待测物的含量，单位为毫克每千克（）；犮从标准工作曲线上查出的试样溶液中待测物的浓度，单位为毫克每升（）；犞试样定容体积，单位为升（）；犿试样的质量，单位为克（）。计算结果需扣除空白值，并保留两位有效数字。测定低限液相色谱测定低限为：。回收率和精密度氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的回收率和精密度结果见表。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表不同添加浓度的回收率和精密度（狀）添加浓度（）回收率相对标准偏差（）氨基硝基苯酚氨基硝基苯酚氨基硝基苯酚氨基硝基苯酚犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犃（资料性附录）标准品液相色谱图
6、图犃氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚标准品液相色谱图犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犅（资料性附录）确证实验犅液相色谱条件犅色谱柱：（内径），或相当者。犅流动相：流动相梯度见表，：水，：乙腈。表犅流动相梯度时间流动相流动相犅流速：。犅进样体积：。犅柱温：室温。犅质谱条件犅离子模式：；犅毛细管电压：；犅毛细管电压：；萃取电压：；犅射频透镜电压：；犅离子源温度：；犅脱溶剂气温度：；犅数据采集方式：多反应监测（）。犅定性测定进行试样测定时，将样液适当稀释，按照液相色谱串联质谱条件测定样液和标准工作溶液，如果样品中待测物质的保留时间与标准物质中对应的保留时间偏差在之内；并且在扣除背景后的样品质谱
7、图中，所选择的离子均出现，且与所选择的离子比与标准的相对丰度一致，相对丰度不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的待测物。表犅监测离子目标物母离子（）子离子（）相对丰度允许相对误差氨基硝基苯酚（）（）氨基硝基苯酚（）（）犅确证测定按照进行试样的处理，滤液经微孔滤膜过滤，滤液适当稀释后，供上机测定用。按照液相色谱条件、质谱条件进行测定。氨基硝基苯酚、氨基硝基苯酚标准品质谱总离子流图见图，质谱图见图和图。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售图犅氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚标准品质谱犜犐犆总离子流图图犅氨基硝基苯酚标准品质谱图图犅氨基硝基苯酚标准品质谱图犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口染发剂中氨基硝基苯酚和氨基硝基苯酚的测定方法中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街号邮政编码：网址电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本印张字数千字年月第一版年月第一次印刷印数书号：定价元版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售
