1、中华人民共和国国家标准淋病诊断标准及处理原则GB 15975-1995 Diagnostic criteria and management of gonorrhea 根据中华人民共和国传染病防治法及中华人民共和国传染病防治法实施办法特制定本标准。1 主题内容与适用范围本标准规定了淋病的诊断标准及处理原则。本标准适用于全国各级医疗保健机构、卫生防疫机构对淋病的诊断、报告和处理。2诊断标准淋病必须根据病史、体检和实验室检查结果进行综合分析，慎重作出诊断。2. 1 接触史有婚外或婚前性行为，性伴感染史，或与淋病患者共用物品史，或新生儿的母亲有淋病史等。淋病潜伏期110天，平均为35天。2.2 临床
2、表现2.2. 1 男性：尿痛、尿道口红肿、溢版，可有尿急，尿频及伴有全身不适。2.2.2 支性：白带增多、服性；有腰痛、下腹痛、子宫颈红肿、宫颈口廉烂、有腋性分泌物。前庭大腺部位可发生红肿及疼痛。可有较轻的尿急、尿频、尿痛、尿道门红肿及服性分泌物。幼女可有外阴阴道炎、外阴及旺门周围皮肤粘膜红肿，阴道溢版。2. 2. 3 有合并症的淋病，男性可出现前列腺炎、精囊炎、附辜炎、尿道狭窄；女性可出现输卵管炎、盆腔炎，严重时发生播散性感染，表现为寒战、高烧、皮殇、关节炎、心包炎、心内膜炎等全身症状。2. 2. 4 其他部位淋病：淋菌性眼结膜炎结膜充血水肿，有大量服性分泌物。新生儿淋菌性结膜炎大部分是分娩
3、时经患淋病的母亲产道所感染，多为双侧。成人结膜炎常是患者自身或性伴的泌尿生殖道淋球菌感染的分泌物通过于指旦旦毛巾等污染眼睛被感染，多为单侧。淋菌性咽炎和直肠淋病与淋病患抒有口交或Jf交行为而感染。2. 3 实验室检查2. 3. 1 涂片取尿道或宫颈服性分泌物涂片作革兰染色，镜F可见大量多形核白细胞。多个多形核白细胞内可见数量多少不等的革兰阴性双球菌。此法对女性患者检出率低，可有假阴性，必要时应作培养。2. 3.2 培养标本在选择性培养基上培养，叮出现典型菌落。氧化酶试验阳性。取典型菌范作细菌涂片叮见到革兰阴性双球菌。诊断：根据2.1 2. 3进行。如标本取自生殖器以外部位、儿童或在法民学上有重
4、要意义时，则必须对培养的菌株经糖发酵试验荧光抗体试验进步鉴定确证（见附录A）。3 治疗原因lj应遵循及时、足量、规则用药的原则，根据不同的病情采用相应的治疗方案（见附录胁。性伴如有感国家技术监督局1995-12-15批准1996-07 01实施17 GB 15975一1995染应同时接受治疗。疗后应进行随访判愈。4治愈标准治疗结束后两周内，在无性病接触史情况下，符合如下标准为治愈a.症状和体征全部消失；b.在治疗结束后48天内从患病部位取材，作涂片和培养均阴性5 管理及预防首先要进行社会一级预防，加强性病防治宣传教育要重视二级预防，早期发现病人给予合理治疗。可在高危人群中进行筛查，以及追踪病人
5、的传染源及接触者。同时加强对淋病患者的管理。在患病期间不能从事可能扩散疾病的职业，如保育员、护理及浴室工作人员等。在医院及托儿所等如发现工作人员患有淋病及入托幼儿有外阴阴道炎，要严加注意，例如规定分用体温表，浴盆、毛巾及床单应消毒等淋病属常见病之一，根据民政部有关规定，患有性病尚未治愈者，暂不予以登记结婚。为预防感染，性伴任何一方染有淋病未彻底治愈之前，应避免性生活，并应严格分开使用毛巾、面盆、浴盆、床单等可致传染的媒介物品$污染物品可煮沸消毒。个人预防可用避孕套或避孕套与杀精J1ij合用。在性接触后不滥用抗生素，因为可能发生耐药菌株及对抗生素过敏等问题。为预防新生儿发生淋菌性Dill炎，应在
6、出生后lh以内用抗生素或硝酸银眼药水滴眼。推荐应用1%硝酸银眼药水或1%四环素眼药膏，或0.5%红霉素眼药膏点眼1次。228 A1 标本的采集GB 15975-1995 附录A淋球菌感染的实验室诊断（补充件）女性采取标本的主要部位是富颈管，次要部位是尿道、直肠和口咽部。男性应从尿道取材，对同性恋的男性增加直肠和口咽部取材。子宫颈内膜采标本时应避免使用抗菌剂、麻醉剂和润滑剂。窥器可用温水湿润。将灭菌棉拭子、藻酸钙拭子或涤纶拭子插入宫颈管I2cn1，转动并停留拭子1030s以吸取分泌物。尿道：由男性病人前尿道取材时，将细棉拭子、藻酸钙拭子或接种环伸入尿道23cm，连续转动5s,取出分泌物应略带粘膜
7、。在女病人应朝向耻骨联合按摩尿道后，如男病人一样的方法取材。宣肠：将棉拭子插入!II管3cm，转动数秒钟从紧靠!II环边的隐窝中取得分泌物。口口肉：用棉拭子在扁桃体隐窝和咽后壁取材。A2分泌物的涂片检查为获得4薄而均匀的涂片，应将拭子在干净的玻片上滚动，然后在空气中F燥，加热固定，革兰染色、镜检。A2. 1 革兰染色A2. 1. 1 将经过固定的涂膜铺满结晶紫溶液，染！min。迅速在流水中洗净。A2. 1. 2 用碗液铺满涂片，染！min。用流水轻轻洗净。A2. 1. 3 用丙翻乙醇液脱色，直到涂膜无蓝色脱下为止。通常要1020s，取决于涂膜的厚薄。避免脱色过分，否则革兰阳性菌误认为阴性菌。A
8、2. 1. 4 很快在流水中淋洗停止脱色，将过量的水用吸水纸吸干。A2. 1. 5 用抄黄或复红液复染！min0A2. 1. 6 用流水淋洗，用吸水纸轻轻吸干。A2. 2 结果使用1000油镜检查在患者染色的标本中可见到大量红色多形核白细胞。有些细胞中吞有淋球菌。淋球菌为革兰阴性，呈肾形或卵圆形，常成对排列，两菌接触面平坦或稍凹。菌体长约0.7m，宽约0. 5m。但两菌大小可有差异。不少细胞内常可见1到数对，甚至2050对淋球菌。A2. 3 注意非项涂片时不要用力涂擦，以防止细胞破裂和变形。涂片厚薄要合适。涂片过薄，涂片中几乎没有细胞，会造成假阴性：涂片过厚，脱色不易干净，会使各种成分难以分辨
9、。女性生殖道中有些菌如不动杆菌等很象淋球菌，常可造成涂片的假阳性结果。咽和直肠标本的直接涂片结果也常由于正常菌丛或各种杂菌的掩盖而不可靠。A3淋球菌的分离培养标本取后应立即接种于培养基中。国外常用的培养基有ThayerMartin培养基及改良的Stuart运送培养慕。国内也己研制成国产培养基，如加多粘菌素E(25g/mL）的血液琼脂或巧克力琼脂。初代分离时应用5%二氧化碳环境（烛缸），培养温度36c为宜，相对湿度80%以上。培养2448h观看结果。A3. 1 Thayer Martin(T M）培养基配制法GB 1 5 9 7 5-1 9 9 5 A3. 1. 1 成分A3. 1. 1. 1
10、GC基础培养基将蛋白陈1.5g、玉米粉0.lg、磷酸氢二饵（K,HPO,) 0. 4g、磷酸二氢饵（KH2PO,) 0. lg、氯化纳(NaCl)O. 5g和琼脂1.2g混合而成A3. 1. 1. 2 VCN抑菌制lmL溶液中含万古霉素300月、多粘菌素E750月和制霉菌素1250单位。为抑制变形菌可加三甲氧韦氨唔睫500吨。配成后应立即用完或贮于一20以下于Z周内用完。A3. 1. 1. 3 !so Vitalex增菌剂每升蒸馆水中加入维生素B,O.Olg、L谷殷殷10.Og、P氨基苯甲酸0.012g、腺瞟岭1.Og、鸟嚓岭0.。挝、二磷酸口比睫核背酸。.2挝、硫胶焦磷酸。.lg、硝酸铁0.
11、0挝、硫胶0.00挝、L半就氨酸25.9g、L脱氨酸1.lg和葡萄糖lOOg。A3. 1. 1. 4 2 %血红蛋白溶液A3. 1. 2 配制法A3. 1. 2. 1 制备双倍浓度的基础培养基2将GC基础培养基7.2g溶于lOOmL蒸馆水中（用500mL烧瓶h充分ill匀，边加热边搅动直至煮沸，使充分溶解经高压灭菌后凉到50待用。A3.1.2.2将与血红蛋白粉放入研钵，加Z3mL蒸馆水研成糊状，逐步加入蒸储水直到lOOmL，高压121C20min灭菌。A3. 1. 2. 3配制增菌剂2每安额增菌剂加入稀释液2mL，使溶解eA3. 1. 2. 4 配制抑菌剂s每安瓶抑菌剂加入蒸馆水2mL，摇动，
12、使充分溶解。A3. 1. 2. 5 以无菌手续将lOOmLGC基础培养基、lOOmL2%血红蛋白液、2mL增菌剂和2mL抑菌lfJ混合后倒入平皿。c冰箱保存、待用。A3. 2 改良Stuart运送培养基配制法琼脂4g、蒸馆水lOOOmL，加热到琼脂溶化并趁热加入氯化锅挝、氯化御挝、无水磷酸二氧锅。.15日、硫代乙醇纳lg、新配制的1%氯化钙溶液lOmL和1%氯化镇lOmL。pH7.3o k述物质越热搅动直到溶解。加入lOg中性炭末。分装于13mmX10mm1、管，每管56mL。在121 C灭菌20min，在琼脂未凝固前摇动小管，然后立即浸入冷水中使琼脂迅速凝固，要求使炭粒均匀分布在培养基中而不
13、是沉于管底。A3. 3结果淋球菌经2448h培养之后，可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色的菌落边缘呈花瓣状。直径为0.5 1. Ommo用接种环触之有粘性。如继续培养，菌落体积增大，表面粗糙，边缘皱缩淋球菌培养对症状很轻或无症状的女性和男性病人敏感性都高，因此，培养是目前世界卫生组织推荐的筛查和诊断淋病病人的主要实验室方法。A3. 4 注意事项某些细菌如表皮葡萄球菌能抑制淋球菌的生长，因此，分离时应采用加抗生素的选择性培养基。但某些抗生素如万古霉素能抑制某些淋球商这种万古霉素敏感株在有些地区可达15%），因此，培养基中是否加入万亩霉素及其加入量的多少应予注意。淋球商对于干燥和寒冷的抵
14、抗力很弱。为提高培养的成功率标本离体时间越短越好。取材处离实验室较远时，应将标本先接种于运送培养基中。对症状不典型的男病人，最好是在晨起首次排尿前或排尿23h后采取标本。定期比较直接涂片和培养的阴性率有助于发现淋球菌培养分离中的问题。在涂片阳性而培养阴性的百分率大于平均数时，应对培养标本的采集方法、培养基的质量和培养条件等进行全面检查A4 氧化酶试验淋球菌具有氧化酶，它产生的氧离子能将氧化酶试剂盐酸四甲基对苯二胶或盐酸二甲基对苯二:!30 胶）氧化成眼类化合物，出现颜色反应。A4. 1 方法GB 1 5 9 7 5-1 9 9 5 将氧化酶试剂配制成o.51%水溶液。将溶液滴加于可疑菌落上，观
15、察颜色变化。也可先将试剂滴在一小张滤纸k，然后挑取可疑菌落与之接触；或先将菌落涂在滤纸上，再滴加试剂，观察有无颜色出现。A4. 2结果在滴加1%盐酸二甲基对苯二胶溶液后，一般于1520s内菌落即呈红色，然后逐步变成紫色，最后呈黑色。在i昆有杂菌的淋球菌分离平皿上，见到形态具有一定特征且氧化酶阳性的菌落，即可能是淋球菌。氧化酶试验，菌体形态和菌落形态是初步鉴定淋球菌的三个重要标准。A4. 3 注意事项为保证有良好的反应，使用的氧化酶试剂不应是过分陈旧的，如试剂已呈灰色或黑色则不应再使用。试剂配好后应放在棕色玻璃瓶中避光保存并尽快用完。氧化酶试剂遇铁也会出现红色，造成假阳性结果，所以操作用的接种环
16、不可用旧铁丝制成。需传代的菌株应在菌落变黑之前挑取，一旦菌落变黑，多数菌己死亡。A5 糖发酵试验淋球菌具有分解某些糖类如葡萄糖的能力，使培养基中的指示剂的颜色发生改变。此外，淋球菌不能利用某些糖如麦芽糖，因而该糖发酵培养基颜色不变。A5. 1 糖发酵试剂的配制A5. 1. 1 配制20%糖溶液，用过滤灭菌。A5. 1. 2 配制缓冲平衡盐指示溶液（BSS）。每II，中含磷酸氢二例（K,HP0,)0.4日、磷酸二氧惆（KH,PO,)o. lg、氯化饵（KCll8.Og、盼红0.6g、pH7. I 7. 2 0过滤灭菌，贮于4C备用。A5. 2 方法A5. 2. 1 取5文小试管（70mmX !O
17、mm）。在l4管中分别加入20%的灭菌葡萄糖、麦芽糖、煎糖和乳糖溶液o.05mL，第5管不加糖作对照。A5. 2. 2 每管加入0.!mLBSS液。A5. 2. 3 每管加入0.05ml，菌悬液（淋球菌需用非选择性的巧克力琼脂培养，培养时间为2024h.超过24h以上的较陈旧培养物可产生假阴性。用直径为3mm的白金耳挑取2满环菌混悬子o.4ml,BSS 中制成浓厚菌悬液）。A5. 2. 4 充分混匀后置37c水浴中孵育4h观看结果。A5. 3结果淋球菌能发酵葡萄糖，产酸，但不发酵麦芽糖、煎糖和乳糖。因此，只有葡萄糖管的pH下降，颜色由红变黄，其他糖管颜色不变，保持红色。糖发酵试验用于淋球菌的鉴
18、定。A5. 4 注意事项用于发酵试验的糖类纯度要高。接种发酵管的菌要纯，如若混有杂菌，就会影响结果。由于淋球菌在普通营养琼脂中生长得不好，所以作淋球菌糖发酵的培养基中应加有动物蛋白如血清等。在使用肮氨酸膜酶琼脂（C:TA）作糖发酵试验时，可用接种针将菌种入培养管的上三分之一。如将琼脂量由1%增加到.5%.糖含量由1%增加到2%，则糖发酵试验的时间可缩短到仙。如将糖发酵管放到37水浴中，则看结果的时间可更短。A6 荧光抗体染色法抗淋球菌抗体标记荧光素后，与淋球菌结合时，可在荧光显微镜下见到发特异荧光淋球菌。GB 15975一1995A6. 1 方法取病人分泌物或初代分离的培养物和j成涂片，干燥后
19、加热固定。将经稀释的淋球菌荧光血清滴加于涂膜上。宦37湿盒内30min，使抗体与淋球菌结合。再用磷酸缓冲液充分洗去未结合之血槽，用甘油封固剂封片，用荧光显微镜检查。A6. 2 结果如是阳性标本，则在荧光显微镜下可见到发蓝绿色特异荧光的双球菌。A6. 3 注意事项本法是直接荧光抗体染色法，标本制成后即可进行染色和观察结果，只有抗原抗体二种因子参加反应，所以方法简便、快速。但市售的抗淋球菌荧光抗体也可和脑膜炎球菌和某些其他的奈瑟菌起交叉反应；此外，也有些淋球菌菌株不与所用的抗血清起反应。反应温度一般为37，为加快反应可将温度提高到40。反应环填应有一定的湿度，否则干燥的抗体附着在玻片上会产生非特异
20、荧光。封固剂中甘汹的纯度要高，否则其产生的自发荧光会影响结果的正确判断B1 淋菌性尿道炎（宫颈炎）附录B淋病治疗方案（参考件）氟嗦酸400mg（女性600mg），次口服s或氟昧酸800lOOOmg，次口服，或环丙氟赈酸500mg，一次口HI害（以上三种喳诺酣类药物孕妇及肝肾功能障碍者忌用）或状观霉素2.0g（宫颈炎可用4.0g），一次肌注；或头抱唾肝1.0日，一次肌注，或头抱兰嚓250mg，一次肌注g如当地无耐青霉素菌株流行，分离的淋球菌对青霉素敏感，可用普鲁卡因青霉素480万单位，一次分二侧臀部肌注$或经氨节青霉素3.0g，一次口服，或氨节青霉素3.栓，一次口服，也可用针剂。选择后三种药物时
21、，均应同时顿服丙磺舒l.Ogo以上各种药物一次剂量不足时，可根据病情适当增加用药次数、用量或联合用药。为预防同时存在的衣原体感染，用上述药物治疗后，可继续按非淋菌性尿道炎宫颈炎治疗方案用药，一般为强力霉素lOOmg，口服，每日2次，共7天。对上述药物过敏者可用z强力霉素lOOmg，口服，每日2次，共7天（孕妇禁用） 或四环素。蚀，口服，每日4次，共7天（孕妇及8岁以下儿童禁用），或红霉素0.5日，口服，每日4次，共7天B2 淋菌性眼炎B2. 1 成人淋菌性眼炎壮观霉素2.饨，肌注，每日2次，共5天g或头子包E整腾1.饵，肌注，每日2次，共5天；2:12 GB 15975-1995 或头于包三嗦
22、l.Og，肌注，每日1次，共5天。如分离的淋球菌对青霉素敏感，可用青霉素GlOOO万单位，静脉滴注，每日l次，共5天。同时，均用等渗盐水冲洗眼部，每lhl次，冲后再用0.5%红霉素或1%硝酸银液点眼。82. 2 新生儿淋菌性眼炎壮观霉素40mg/kg，肌注，每日1次，共7天g或头也噬的25mg吨，静脉注射或肌注，每日1次，共7天g或头抱三嗦2550mg/kg（单剂量不超过125mg），静脉注射或肌注每日1次，共7夭。高胆红素血症婴儿，尤其是未成熟儿须慎用。如果分离的淋球菌对青霉素敏感，tiJ给水剂青霉素G每日10万单位kg，分2次静脉或肌肉注射(1同龄以F的婴儿每日分4次），共7天。局部处理！扣成人淋菌性眼炎。如对患儿治疗的效果不好，应考虑患儿可能有衣原体感染。附加说明：本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准由中国医学科学院皮肤病研究所负责起草。本标准主要起草人邵长庚，叶干运。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。 ;i:;
