1、GB/T 173341998 前 言 本标准于 1998年4月2 0日首次发布。 本标准由中华人民共和国卫生部提出。 本标准起草单位： 河北省卫生防疫站、 天津市食品卫生监督检验所、 山西省食品卫生监测所。 本标准主要起草人：韩会欣、贾丽华、常凤启、王萌国、高唯勤。 本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。 中华人民共和国国家标准 食品中游离棉酚的测定 Determination of gossypol in food GB/T 173341998 1 范围 本标准规定了用液相色谱法测定食品中游离棉酚的含量。 本标准适用于植物油或以棉籽饼为原料的其他 食品中游离棉酚的测定，
2、最低检出量为 5 ng，最低检出浓度 5 mg/kg。 2 原理 植物油中的游离棉酚经无水乙醇提取，经 C18柱将棉酚与样品中杂质分开，在 235 nm 处测定。 水溶性样品中的游离棉酚经无水乙醚提取，浓 缩至干，再加入乙醇溶解，用 C18柱将棉酚与样品中杂质分开， 在 235 nm 处测定。 根据色谱峰的保留时间定性，外标法峰高定量。 3 试剂 本标准所用试剂凡未指定者，均为分析纯（A.R） ，水为石英亚沸蒸馏水。 31 磷酸。 32 无水乙醇。 33 无水乙醚。 34 普通氮气。 35 甲醇：经 0.5m 滤膜过滤。 36 棉酚标准储备液：精密称取 0.1000 g 棉酚纯品，用无水乙醚溶
3、解，并定容至 100 mL，此溶液相当于每毫升含棉酚 1.0 mg。 37 棉酚应用液：取 1 mg/mL 棉酚储备 液 5.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，此溶液相当于每毫升含棉酚 50 g。 38 磷酸水：取 300 mL 水，加 6.0 mL 磷酸，混匀，经 0.5m 滤膜过滤。 4 仪器 41 SY-5060 液相色谱仪（带 UV-100 紫外检测器） 。 42 KD-浓缩仪。 43 离心机：3000 r/min。 中华人民共和国卫生部 1998 04 20 批准 1999 01 01 实施 中华人民共和国卫生部 批准 实施GB/T 173341998 44
4、 100L 微量注射器。 45 Micropark- C18（250 mm-6mm）不锈钢色谱柱。 5 分析步骤 5 1 色谱条件： 柱温 40； 流动相， 甲醇磷酸水=8515； 测定波长 235 nm；流量 1.0 mL/min；纸速 0.25 mm/min,衰减：1；灵敏度：0.02 AUFS；进样 10L。 52 试料制备 521 植物油：取油样 1.000 g，加入 5 mL 无水乙醇，剧烈振摇 2 min，静置分层（或冰箱过夜） ，取上清液过滤，离心，上清液即为试料，10L 进液相色谱。 5 2 2 水溶性样品； 吸取样品 10.0 mL于离心试管中， 加入 10 mL 无水乙醚，
5、振摇 2 min，静置 5 min，取上层乙醚层 5 mL，用氮气吹干，用 1.0 mL 无水乙醇定容，过滤膜，即为试料，取 10L 进液相色谱仪。 53 测定 531 标准曲线制备：准确吸取 1.00，2 .00，5.00，8.00 mL 的 50g/mL的棉酚标准液于 10.0 mL 容量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，此溶液相应于 5，10，25，40g/mL 的标准系列，进样 10L ，作 050g/mL 的标准系列，根据响应值绘制标准曲线。 5 3 2 色谱分析： 取 10L 样品溶液注入液相色谱仪， 记录色谱峰的保留时间和峰高，根据保留时间确定游离棉酚，根据峰高，从标准曲线上查出游离棉酚含量。 6 计算结果 见式（1） 。 mAX=5 （ 1） 式中： X样品中棉酚的含量，mg/kg； m样品质量，g； A测定试料中棉酚的含量，g/mL； 5折合所用无水乙醇的体积，mL； 7 精密度和允许误差 重复测定变异系数（相对标准差）小于 6%；两次平行测定相对允许误差绝对值小于 10%；平行测定结果用算术平均值表示。 中华人民共和国卫生部 1998 04 20 批准 1999 01 01 实施
