1、GB/T 173351998 前 言 栀子黄作为食品着色剂已经列入GB 27601996食品添加剂使用卫生标准， 最大使用量 0.3 g/kg。目前日本用气相色谱方法测定，我们用高压液相色谱法 测定。本方法快速、准确、精密度好。 本标准由中华人民共和国卫生部提出。 本标准由中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责起草；卫生部 食品卫生监督检验所参加起草。 本标准主要起草人：李严巍、王梅、杨祖英。 本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。 中华人民共和国卫生部 19980420批准 19990101实施 GB/T 173351998 中华人民共和国国家标准 食品中栀子黄的测
2、定 Determination of crocin in foods GB/T 173351998 1 范围 本标准规定了食品中栀子黄色素的高效液相测定方法和薄层色谱法。 本标准适用于饮料、酒、糕点中栀子黄的测定。 第一法 高效液相色谱法 2 原理 样品中栀子黄经提取净化后，用高效液相色谱法测定，以保留时间定性、 峰高定量，栀子甙是栀子黄的主要成分，为对照品。 3 试剂 试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 31 甲醇。 32 石油醚：6090。 33 乙酸乙酯。 34 三氯甲烷。 35 姜黄色素。 36 栀子甙。 37 栀子甙标准溶液：称取 2.75 mg 栀子甙标准品，用甲醇溶解，并用甲醇 稀释至
3、100 mL混匀。即得27.5g/mL栀子甙。 38 栀子甙标准使用液：分别吸取栀子甙标准溶液0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL 于 10 mL 容量瓶中，加甲醇定容至 10 mL，即得 0，5.5，11.0，16.5，22.0 g/mL的栀子甙标准系列溶液。 4 仪器 41 小型粉碎机。 42 恒温水浴。 43 高效液相色谱系统：Water s M501泵，U6K进样器，岛津RF-535。 荧光检测器，Blue chip/PC计算机和Baseline 810色谱控制程序。 5 分析步骤 51 样品处理 511 饮料：将样品温热，搅拌除去二氧化碳或超声脱气，摇匀后，通过微 孔滤膜0.4m
4、过滤，滤液备作HPLC分析用。 512 酒：样品通过微孔滤膜过滤，滤液备作HPLC分析用。 513 糕点：称取10 g样品放入100 mL的圆底烧瓶中，用50 mL石油醚加 热回流 30 min，置室温。砂芯漏斗过滤，用石油醚洗涤残渣 5 次，洗液并入滤 液中，减压浓缩石油醚提取液，残渣放入通风橱至无石油醚味。用甲醇提取3 5次，每次30 mL，直至提取液无栀子黄颜色，用砂芯漏斗过滤，滤液通过微孔 滤膜过滤，滤液贮于冰箱备用。 52 测定 521 HPLC参考条件 中华人民共和国卫生部 19980420批准 19990101实施 中华人民共和国卫生部 19980420批准 19990101实施
5、 GB/T 173351998 色谱柱：粒度5 m ODS C 18 150 mm4.6mm 流动相：甲醇水（3565） 流速：0.8 mL/min 波长：240 mm 522 标准曲线 在本实验条件下，分别注入栀子甙标准使用液0，2，4，6，8L，进行HPLC 分析，然后以峰高对栀子甙浓度作标准曲线。 523 样品测定 在实验条件下，注入 5L“5.1”项下的样品处理液，进行 HPLC 分析，取 其峰与标准比较，测得样品中栀子甙含量。 6 结果 61 计算 按式（1）计算。 X= 1000 m V A （1） 式中： X样品中栀子黄色素的含量，g/kg； A进样液中栀子甙的含量，g； V样品
6、制备液体积，mL； m样品质量，g。 62 本标准的检测限、回收率、精密度。 本方法栀子甙的检测限为3.2g/mL， 栀子黄色素浓度在0.20.3g/kg范 围内，饮料、酒、蛋糕回收率分别为94.1%，92%，91.3%。相对标准差（R.S.D） %：2.69,4.70,3.20。 第二法 薄层色谱法 1 原理 小样品中栀子黄色素用有机溶剂提取，并经过纯化处理，去除干扰物质， 浓 缩点样展开后，在 UV254nm 灯下呈黑色斑点，与标准比较进行定性，及概略定 量。 2 试剂 所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 21 甲醇。 22 乙醇。 23乙酸乙酯。 24 丙酮。 25 甲酸。 26 三氯甲烷。 27 硅胶GF254：薄层色谱用。 28 展开剂：乙酸乙酯：丙酮：甲醇：水（5：5：1：1） 。 29 展开剂：三氯甲烷：甲醇（6：3） 。 3仪器 中华人民共和国卫生部 19980420批准 19990101实施
