1、GB/T 173361998 前 言 红曲色素作为食品着色剂已经列入 GB 27601996 食品添加剂使用卫生标 准，按正常需要量加入。目前未发现国内外食品中红曲色素的薄层层析检测方 法，我们选用先制定标准TLC板，柱层去掉干扰物，本法快速、准确。 本标准由中华人民共和国卫生部提出。 本标准起草单位：中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所、卫生部食 品卫生监督检验所和中国药品生物制品检定所。 本标准起草人：李严巍、王梅、鲁雁飞、杨祖英、刘宝灵。 本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。 中华人民共和国国家标准 食品中红曲色素的测定 Determination of mon
2、ascas colours in foods GB/T 173361998 1 范围 本标准规定了用薄层层析方法测定食品中红曲色素。 本标准适用于食品中红曲色素的测定。 2 原理 样品中红曲色素经提取，净化后，TLC分离，与标准 TLC 板比较定性，选用 分配系数在两相中不同而达到分离的目的。 3 试剂 31 硅胶：柱层析用，120180目。 32 奎胶GF254。 33 甲醇。 34 正己烷醋酸乙酯甲醇（532） 。 35 氯仿甲醇（83） 。 36 海沙：先用 110 盐酸煮沸 15 min，用水洗至中性，再于 105干燥， 贮于具塞的玻璃瓶中，备用。 37 石油醚：沸程6090。 38
3、红曲色素的标准溶液：取 1 g 红曲色素，加入 30 mL 甲醇溶解，然后加 入 5 g 硅胶，拌匀，装入 50 g 硅胶层析柱中（湿法装柱） ，将拌有硅胶的红曲 色素装在柱项，后用甲醇洗脱；直至洗脱下来的甲醇无色为止，然后减压浓缩 至膏状，于6070烘箱中烘干，约剩下0.89 g的红曲色素作为薄层分析用标 准品。用甲醇配成1 mg/mL的标准溶液。 39 红曲色素标准使用液：临用时吸取标准溶液 5.0 mL，置于 50 mL 容量瓶 中，加甲醇稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.1 mg红曲色素。 4 仪器 41 微量注射器10L。 中华人民共和国卫生部19980420批准 19990101实
4、施 中华人民共和国卫生部19980420批准 19990101实施 GB/T 173361998 42 展开槽25cm6cm4cm。 43 薄层板：市售预制硅胶GF254板。 44 层析柱。 45 接收瓶。 46 全玻璃浓缩器。 47 真空泵。 5 操作方法 51 样品处理 511 配制酒：取10 mL样品，于水浴上挥干，加少量乙醇溶解残渣，进行 薄层分析。 512 蛋糕：取30.0g蛋糕，搅碎，加海沙少许，混匀，用热风机吹干样品 即可，加入30 mL石油醚去脂肪，重复35次，弃去石油醚，然后将蛋糕渣放 入通风橱中，残余石油醚自然挥除后，放入蒸馏瓶中，加95%乙醇约 90 mL，回 流 30
5、min，过滤，用乙醇洗涤 5 次，合并提取液，将提取液浓缩至 20 mL。此 液留作测定用。 513 市售豆腐乳：取豆腐乳30g，搅碎，加95%的乙醇5070 mL，提取回 流30 min，过滤，用乙醇洗涤残渣5次，合并乙醇提取液，减压浓缩至20 mL， 此液留作测定用。 514 火腿肠：称取 30g 火腿肠，捣碎，加海沙少许，混匀，每次加入 50mL 石油醚提取脂肪，共提取三次，每次提取45min，过滤，滤液弃去，残渣放通风 橱中，用吹风机吹干，用50mL甲醇提取红曲色素30 min，共3次，过滤，合并 滤液， 滤液中加入3mL的钨酸钠溶液沉淀蛋白， 弃去蛋白， 滤液减压浓缩至10 mL，
6、此液供测定用。 52 测定 521 点样：取市售硅胶 GF254 板（4 cm20 cm） ，离底边 2 cm 处，点上 述样品溶液10L，同时在右边点2L色素标准溶液。 522 展开：将5.2.1已点上样品与标准品的二块板，分别放入试剂“3.3” 和“3.4”中展开，待展开剂前沿至15 cm处，取出，放入通风橱，晾干，在UV254 nm下观察，试剂“3.3”得到4个点，R f 值分别分0.86，0.71，0.54，0.38，试 剂“3.4”得到 3 个点，R f 值分别为0.86，0.69，0.57。样品与标品的斑点的R f 值一致。则证明样品的色素为红曲色素。 中华人民共和国卫生部19980420批准 19990101实施 中华人民共和国卫生部19980420批准 19990101实施
