1、ICS 67040X 04 圆雪中华人民共和国国家标准GBT 219152008食品中纳他霉素的测定 液相色谱法2008-05-16发布Determination of natamycin in fbOdHighperformance liquid chromatography20081卜01实施丰瞀骶紫瓣警矬赞翼发布中国国家标准化管理委员会捉111刖 吾GBT 219152008本标准的附录A为资料性附录。本标准由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。本标准起草单位：沈阳产品质量监督检验院(国家加工食品及添加剂质量监督检验中心)。本标准主要起草人：赵丽秀、李乃洁、苏锡辉、张凯、张丽君、吕成
2、学、吴玉銮、赵检、黄士军、张凤清。1范围食品中纳他霉素的测定 液相色谱法GBT 219152008本标准规定了食品中纳他霉素的液相色谱测定方法。本标准适用于食品中纳他霉素的测定。本标准定量检出限为05 mgkg(固体和半固体样品)，05 ragL(液体样品)。2原理样品经甲醇提取，采用加水冷冻去除样品中的脂肪成分或离心的方式净化，反相液相色谱一紫外检测器测定，外标法定量。3试剂和材料31水：去离子水或相当纯度的水。32甲醇：分析纯、色谱纯。33纳他霉素(natamycin)：纯度95。34标准储备液：准确称取适量的纳他霉素标准品(精确至01 mg)，用甲醇溶解，配成浓度为100tgmL的标准储
3、备液。35冰乙酸：优级纯。36 045 pm、022 pm针头式过滤器(水性)。4仪器41高效液相色谱仪：配紫外检测器。42超声波清洗器。43电子天平：感量01 mg。44注射器：一次性，10 mL。45漏斗：直径大约7 cm。46冰箱：一20一15。47离心机。5样品制备51 固体及半固体样品511乳酪、火腿、酸奶等样品准确称取1000 g样品，加入30 mL甲醇超声提取30 min，加水10 mL摇匀后放入冰箱中冷冻1 h，取出冷冻后的样品立即过滤，滤液放置至室温后，依次过045,um和022 pm针头式过滤器，收集滤液约2 mL上机测定。纳他霉素标准品谱图参见图A1，乳酪、火腿样品回收率
4、图参见图A2和图A3。512月饼、糕点样品准确称取500 g月饼皮，置于离心管中，加入30 mL甲醇超声提取30 min，加水10 mL摇匀后置于离心机中以3 500 rrain离心5 rain，上清液依次过045 pm和022 pm针头式过滤器，收集滤液约2 mL上机测定。月饼、糕点样品回收率图参见图A4、图A5。1GBT 21915200852果汁饮料样品准确量取果汁饮料样品100 mL，加入30 mL甲醇，超声提取30 min，提取液依次过045am和022 bLm针头式过滤器，收集滤液约2mL上机测定。橙汁样品回收率图参见图A6。6色谱测定61色谱柱：C18柱，5 pm，46 mmXl
5、50 mm(或相当型号色谱柱)。62流动相：甲醇+水+乙酸(60+40+5)。63流速：10 mLmin。64检测波长：305 nm。65进样量：10 pL。7计算按式(1)计算固体、半固体样品(乳酪、糕点、火腿、月饼、酸奶)中纳他霉素的含量，按式(2)计算液体样品中纳他霉素的含量。x一等等等U m X 1 UU式中：x试样中纳他霉素的含量，单位为微克每克(t,gg)；c由标准曲线得到样品溶液中纳他霉素的含量，单位为微克每毫升(pgmL)；y样品溶液定容体积，单位为毫升(mL)；m一一样品质量，单位为克(g)。计算结果保留三位有效数字。X一垡墨 V2式中：x试样中纳他霉素的含量，单位为微克每毫
6、升(,ugmL)；c由标准曲线得到样品溶液中纳他霉素的含量，单位为微克每毫升(pgmL)；V。样品溶液定容体积，单位为毫升(mL)；v。样品量取体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留三位有效数字。8精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。附录A(资料性附录)纳他霉素标准品谱图及几种样品回收率图A1 纳他霉素标准品色谱图见图A1。GBT 219152008tmin图A1 纳他霉素标准品色谱图纳他霉素含量10 pgmLA2乳酪样品回收率图见图A2。30252015101 68 生。啦，。尺。舭蚋坦。o9 14卫几也2：塑2。85a)乳酪样品回收率图纳tra他i
7、n霉素添加量o5 PgmL412165 679o 43 03；*哩人2键173型量50J L：硅蛩。sjs es巴4八，6177682竺。!。96b)乳酪样品回收率图身藉鼍素添加量1o卜gmL图A2乳酪样品回收率图3踮舳蛎如拍罟宕髑她船他“挖加oo4oGBT 2191520084540353 302520151054ii：。墅L。曼，f1，。 。；。 。115 1462盖里74 2几49乏83336drainc)乳酪样品回收率图纳他霉素添加量10“gmL图A2(续)A3火腿样品回收率图见图A3。41嵴 也一嗵瑚。traina)火腿样品回收率图纳他霉素添加量05,ugmLtrainb)火腿样品回
8、收率图纳他霉素添加量10 pgmL图A3火腿样品回收率图l号强H匏他MH他ooo4540353305 252015lOI，52 659GBT 219152008n0 55 1h09 虬。嗵 1 t 828 900 966trainc)火腿样品回收率圈纳他霉素添加量10-gmL图A3(续)A4月饼样品回收率图见图A4。2422201816l 1412108642上93 2，7 695旦12 1匙 陋-n。 、 八“，traina)月饼样品回收率图纳他霉索添加量05ugmL165 4 14o 8旦1坦 蠼93卧2,77。!。 、8 41 8 95 935 991tramb)月饼样品回收率图纳他霉素
9、添加量10 t-gmL图A4月饼样品回收率图5帖拍如拈肋坫ojGBT 2191520086 6711。叫 I 八。，。，-s J世：父t。，trainc)月饼样品回收率图纳他霉素添加量10 t-gmL图A4(续)A5糕点样品回收率图见图A5。1 62 1 91545 0004。00035 00030 000i 25 00020 00015 000l。00。5 OOO0traina)糕点样品回收率图纳他霉素添加量05-gmLtrainb)糕点样品回收率图纳他霉素添加量10产gmL图A5糕点样品回收率图：g帅两阳：嚣蛎帅弘黔=2mo咖咖咖咖咖啪咖咖。聃撕孔船”埔H他加oo；：3j350 000250 000200 000150 000100 000192 242 4 48GBT 219152008trainc)糕点样品回收率图纳他霉素添加量10 pgmL图A5(续)A6橙汁样品回收率图见图A6。a)橙汁样品回收率图纳他霉素添加量05,ugmLmlntrainb)橙汁样品回收率图纳他霉素添加量10 pgmL图A6橙汁样品回收率图咖咖咖咖咖。船舶孔业埘埔堙加oo4ojj蛎帅跖跖坫加0jGBT 219152008tminc)橙汁样品回收率图纳他霉素添加量10tgmL图A6(续)蛎们嬲衢加坫埔oj_
