1、Ics 67040X 04 a雷中华人民共和国国家标准GBT 2191820082008-05-16发布食品中硼酸的测定Determination of boric acid i11 foods20081 1-01实施宰瞀髁鬻瓣訾糌赞星发布中国国家标准化管理委员会识邯1前 言GBT 219182008本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。本标准第一法起草单位：上海市质量监督检验技术研究院。本标准第二法起草单位：北京市海淀区产品质量监督检验所(国家食品质量安全监督检验中心)。本标准第一法主要起草人：巢强国、周泽琳、葛宇、李勤、张燕琴、林琳。本标准第二
2、法主要起草人：林立、周谙非、杨彦丽、王朝晖、曹红。食品中硼酸的测定GBT 2191820081范围本标准规定了食品中硼酸的测定方法。本标准适用于水产品、肉制品(如肉丸、鱼丸)、豆类、面食类、腐竹、棕子、糕点、酱油等食品中硼酸的测定。本标准的检出限为：第一法乙基己二醇一三氯甲烷萃取姜黄比色法为250 mgkgl第二法电感耦合等离子体原子发射光谱(IcP_AEs)法为100 mgkg，电感耦合等离子体质谱(ICPMS)法为020 mgkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，
3、鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682-1992，neq ISO 3696：1987)第一法 乙基己二醇一三氯甲烷萃取姜黄比色法3原理通过乙基已二醇一三氯甲烷溶液对样品中的硼酸进行快速的富集、萃取，除去共存盐类的影响，利用浓硫酸与姜黄混合生成的质子化姜黄与硼酸反应生成红色产物。溶液颜色的深浅与样品中硼酸含量成正比，通过比色可以测定样品中硼酸的含量。在酸性条件下硼砂以硼酸形式存在，所以该方法也可以反映食品中添加硼砂的含量。4试剂所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等
4、纯度的水。41浓硫酸。42硫酸(1+1)溶液。43无水乙醇。44亚铁氰化钾溶液：称取1060 g亚铁氰化钾K。Fe(CN)。3H：O，用水溶解，并稀释至1 000 mL。45乙酸锌溶液：称取2200 g乙酸锌Zn(CH。COO)：2H。03，加30 mL冰乙酸溶于水，并稀释至1 000 mL。46姜黄一冰乙酸溶液：称取姜黄色素010 g溶于100mL冰乙酸中，此溶液保存于塑料容器中。47乙基己二醇一三氯甲烷溶液(EHDCHCI。)：取2一乙基一l，3一己二醇10 mL，加三氯甲烷(CHCla)稀释至100 mL，此溶液保存于塑料容器中。48硼酸标准储备液：准确称取在硫酸干燥器中干燥5 h后的硼
5、酸0500 0 g，溶于水并定容至1 000 mL，保存于塑料容器中。此硼酸标准储备液的浓度为500 pgmL。49硼酸标准溶液：取硼酸标准储备液1000 mL，加水定容至1 000 mL，此液保存于塑料容器中。此硼酸标准使用溶液的浓度为5 ugmL。所配制溶液于0C4冰箱中可储存3个月。】GBT 2191820085仪器和设备51试验中使用的容器均为塑料容器。52分光光度计。53高速捣碎机。54 100 mL塑料容量瓶。55 150 mL塑料烧杯。56 25 mL、50 mL带盖塑料试管。57涡旋振荡器。6分析步骤61标准曲线制备准确量取硼酸标准溶液000，100，200，300，400，5
6、00 mL于25 mL塑料试管中，各加水至5 mL。加硫酸(1+1)溶液1 mL，振荡混匀。然后加EHDCHCI。溶液500 mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2 rain，静置分层，吸取下层的EHDCHCl。溶液并通过7 cm干燥快速滤纸过滤。各取100 mL过滤液于50 mL塑料试管中，依次加入姜黄一冰乙酸溶液10 mL、浓硫酸05 mL，摇匀，静置30rain，加无水乙醇25mL，静置10 rain后，于550nm处era比色皿测定吸光度。以标准系列的硼酸量(pg)为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。62测定621样品处理固体样品：称取经高速捣碎机捣碎的样品200 g1000 g(精确
7、至001 g)，加40 mL60 mL水混匀，缓慢滴加2mL浓硫酸，超声10min促进溶解混合。加乙酸锌溶液5mL、亚铁氰化钾溶液5mL，加水定容至100 mL过滤后作为样品溶液。根据样品含量取100 mL300 mL样品溶液于25 mL塑料试管中，加水至5 mL。加硫酸(1+1)溶液1 mL，振荡混勾。接着加EHD-CHCl。溶液500 mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2 rain，静置分层，吸取下层的EHD-CHCI；溶液并通过7 cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。液体样品：称取样品200 g1000 g(精确至001 g)，加水定容至100 mL，作为样品溶液。蛋白质或脂肪含量
8、高的液体样品可加乙酸锌溶液5 mL、亚铁氰化钾溶液5 mL，加水定容至100 mL过滤后作为样品溶液。根据样品含量取100 mL300 mL样品溶液于25 mL塑料试管中，加水至5 mL，加硫酸(1+1)溶液1 mL，振荡混匀。接着加EHD-CHCI。溶液500 mL，盖上盖子，涡旋振荡器振摇约2 rain，静置分层，吸取下层的EHD-CHCI。溶液并通过7 cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。注：如果萃取过程出现乳化现象，可以用3 000 rrain离心3rain或在测定体系中加入1mL无水甲醇以避免乳化或沉淀现象(加水定容总体积为5 mL)。622样品测定准确吸取样品测试液100
9、mL于50 mL塑料试管中，以下操作同标准曲线中显色、比色步骤(61)。以测出的吸光度在标准曲线上查得试样液中的硼酸量。63结果计算试样中硼酸的含量按式(1)进行计算： x一篆专；糌F式中：x1样品中硼酸的含量，单位为毫克每千克(mgkg)；Zm。试样测定液中硼酸量，单位为微克(pg)；V-试样定容体积，单位为毫升(mL)；m样品量。单位为克(g)；Vz测定用试样体积，单位为毫升(mL)；F换算为硼砂的系数，硼酸系数为1，硼砂系数为154。计算结果保留三位有效数字。GBT 2191820087精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。第二法 电感耦合等离子体
10、原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法8原理实验样品经酸解消化后，将样品溶液导人电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICPAES)或电感耦合等离子体质谱仪(ICPMS)中，与标准系列比较定量。9试剂除非另有说明，在分析中仅使用GBT 6682实验室一级用水。91硝酸：优级纯。92硝酸(5，体积分数)：取5mL硝酸置于适量水中，再稀释至100mL。93高氯酸：优级纯。94混合酸：硝酸+高氯酸(10+1)。取10份硝酸与1份高氯酸混合。95 30过氧化氢：优级纯。96硼标准储备溶液(1 000 mgL)：称取在硫酸干燥器中干燥5 h后的0572 0 g硼酸(质量分数不小于999o)，用30 mL水溶解
11、，转移至100 mL容量瓶中，如水至翔度，混匀。此标准溶液保存于塑料瓶中。97钇标准储备溶液：100 mgL(作为ICP-AES检测中的内标物)。98钪标准储备溶液：100 mgL(作为ICP-MS检测中的在线内标物，以校准仪器灵敏度)。99硼标准工作液：10 mgL。准确吸取10 mL硼标准储备液(96)到100 mL的容量瓶中，用5硝酸溶液稀释定容至刻度，此标准储备溶液浓度相当于每毫升10,ug硼。所配制溶液应及时转移至塑料瓶中，于O4冰箱中可储存3个月。910钪标准工作液：100 mgL。吸取1oO mL钪标准储备液(98)于100 mL塑料容量瓶中，用5硝酸溶液定容至刻度，容量瓶中每毫
12、升相当于100 pg钪。所配制溶液应及时移人塑料瓶中，于o4冰箱中可储存3个月。911系列标准溶液的配制：分别吸取硼标准工作液(99)00，05，30，100，200 mL于100 mL容量瓶中，再准确加入100 mL钇元素标准储备溶液(97)，用5硝酸溶液定容至刻度，容量瓶中溶液浓度相当于每毫升000，005，030，100，200 pg硼。所配制溶液应及时移入塑料瓶中。注：使用ICP-MS检测的标准溶液不添加钇元素标准储备溶液。当采用ICPMS进行测定时，采用钪标准工作液(910)在线内标加入。10仪器与设备101试验中使用的容器均为塑料容器。GBT 219182008102超纯水制备系统
13、。103样品粉碎装置。104微波消解系统。105电感耦合等离子体发射光谱仪(ICPAES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICPMS)。所用容器全部经20的硝酸浸泡过夜。11分析步骤”1样品的制备微量元素的分析试样制备过程中应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀浆机、粉碎机等须为不锈钢制品。该实验过程中尽量避免使用玻璃器皿(以避免玻璃器皿中硼元素对样品的污染)。固体样品应采用粉碎机、匀浆机等设备进行粉碎、混匀，液体样品可均匀取样。112样品的消解1121微波消解准确称取制备均匀的固体样品0500 g1000 g(液体样品1000 g2000 g)于微波消解罐中，加入3 mL浓硝酸(91)
14、和2 mL 30过氧化氢(95)。设定合适的微波消解条件(参见附录A)进行消解。消解完毕后，用水少量多次洗人50 mL塑料容量瓶中，准确加入05 mL钇标准储备液(97)作为内标，用水定容至刻度，混匀备用。同时做试剂空白。注：含油脂较多的样品可以适当减小称样量。1122湿法消化准确称取制备均匀的固体样品1000 g(液体样品5000 g)于50 mL或100 mL石英烧杯中，加入10mL的混合酸(94)，盖上表面皿，静置过夜。次日，置于电热板上加热消化至冒白烟，再加入约2mL水，继续加热赶酸，直至烧杯中残留约05 mL液体时，取下冷至室温。用水少量多次洗入50 mL塑料容量瓶中，准确加入05
15、mL钇标准储备液(97)作为内标，用水定容至刻度，混匀备用。同时傲试剂空白。注1：使用ICP MS检测样品时，可不添加钇标准溶液。注2：含量较高的样品应适当稀释。113测定1131 分别将系列标准溶液导入调至最佳条件(参见附录B)的仪器雾化系统中进行测定。以硼元素的浓度为横坐标，以硼元素和内标元素的强度比为纵坐标绘制标准曲线或计算回归方程。1132分别将处理后的样品溶液、试剂空白液导入调至最佳条件的仪器雾化系统中进行测定。将硼元素和内标元素的强度比值与工作曲线比较或代人方程式求出含量。注：由于检测过程中穰的记忆效应很强，检测前应彻底清洗进样和雾化系统。12计算食品中硼酸(或硼砂)的含量按式(2
16、)进行计算X (自一c2)V F o,o(2)m式中：x试样中硼酸(或硼砂)的含量，单位为毫克每千克(mgkg)；c。测定用试样液中硼元素的含量，单位为毫克每升(ragL)；c：试剂空白液中硼元素的含量，单位为毫克每升(ragL)；V试样处理液的总体积，单位为毫升(mL)；m试样质量，单位为克(g)；4GBT 219182008F硼换算为硼酸或硼砂的系数，硼酸系数为572，硼砂系数为883。计算结果保留三位有效数字。13精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的lo。GBT 219182008附录A(资料性附录)微波消解条件表A1微波消解条件步骤 升温时间rain 升至温度 保温时间mln1 5 120 52 5 150 53 5 170 54 5 180 106附录B(资料性附录)ICP-AES或ICP-MS检测条件ICPAES参考条件：选择波长：硼249772 rim或249677 rim，钇371029 nm功率：1 300 W；进样速率：15 mLmin；雾化器流量：08 Lmin；辅助气流量：02 Lmin；燃烧气流量：15 Lmin。ICP-MS参考条件：选择同位素：硼11，钪45；功率：1 300W；进样速率：01 mLmin；载气流量：11 Lmin；辅助气流量：10 Lrain；冷却气流量：15 Lmin。GBT 219182008
