1、lCS 67050X 40 圆雪中华人民共和国国家标准GBT 2 1 927-2008食品中叔丁基对苯二酚的测定高效液相色谱法Determination of tertiary butylhydrOquinOne in foOdsHighperformance of liquid chromatography2008-05-1 6发布 2008-1 1-01实施宰瞀鬻鬻瓣警篷攀瞥鐾发布中国国家标准化管理委员会捉11刚 吾GBT 21927-2008本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会提出。本标准由中国国家标准化管理委员会归口。本标
2、准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。本标准主要起草人：卢业举、顾亮、刘坤、陈戈、刘琴芳、沈宏林、蒋俊树。1范围食品中叔丁基对苯二酚的测定高效液相色谱法GBT 21927-2008本标准规定了食品中叔丁基对苯二酚(TBHQ)的高效液相色谱一荧光检测器测定方法。本标准适用于食用油脂、油炸食品、干鱼制品、饼干、方便面、速煮米、千果罐头、腌制肉制品等食品中TBHQ的测定。本标准各类食品中TBHQ检出限为005 pgmL(进样量10 pL)。2原理本标准用乙腈提取食品中的TBHQ，用正己烷脱脂。测试液用乙腈和15的乙酸作为洗脱液，经反相c。色谱柱分离，荧光检测器检
3、测，以外标法定量。3试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。31叔丁基对苯二酚(TBHQ)标准品：纯度98。32 L-抗坏血酸棕榈酸酯。33正己烷。34冰乙酸。35乙腈：色谱纯。36饱和乙腈：将乙腈和正己烷混合，在分液漏斗中充分振摇。静置分层，收集下层溶液，并于每升溶液中溶解100 mg的卜抗坏血酸棕榈酸酯。37 TBHQ标准储备液：准确称取100 mg TBHQ，加饱和乙腈溶解定容至100 mL。TBHQ浓度为1 mgmL，O4避光保存。38 TBHQ标准溶液：准确移取1 mL TBHQ的储备液，加饱和乙腈定容至100 mL，分别移取10，50，100，20o，
4、500 mL该TBHQ溶液，放入loo mL容量瓶，加饱和乙腈至刻度，制成TBHQ含量分别为01，05，1，2，5，100tLgmL的TBHQ标准溶液，用于制定标准蓝线。4仪器和设备41高效液相色谱仪，附荧光检测器。42移液器。43振荡器。44微孔过滤器：孔径045 btm，有机溶剂型滤膜。5分析步骤51样品处理511食用油脂称取混合均匀的样品10 g(精确至0001 g)，用正己烷溶解并定容至100 mL。移取zo mL该溶液至150mL分液漏斗中，加入20 mL饱和乙腈，振摇l min。静置分层，收集下层乙腈层后，再加入20 mL饱和乙腈，重复萃取一次，合并乙腈层定容至50 mL。经045
5、pm滤膜过滤作为测试液。1GBT 21927-2008512油炸食品、干鱼制品、腌制肉制品等称取混合均匀的样品25 g(精确至0001 g)，置于100 mL具塞锥形瓶中，用20 mL饱和乙腈振荡提取5min，再加入20mL正己烷继续振荡5rain，过滤到分液漏斗中，静置分层后，收集下层乙腈层；再向样品残渣中加入20mL正己烷振荡提取10min，再过滤到分液漏斗中，加入20mL乙腈振摇1min，静置分层，收集合并乙腈层定容至50 mL容量瓶中。经o45,um滤膜过滤作为测试渡。513饼干、方便面、速煮米、干果罐头等称取混合均匀的样品25 g(精确至0001 g)，置于100 mL具塞锥形瓶中，
6、用20 mL饱和乙腈振荡提取10 min，收集下层乙腈层。在样品残渣中再加入20 mL饱和乙腈振荡提取10 min，合并两次提取的乙腈层，在容量瓶中定容至50 mL。经045bcm滤膜过滤作为测试液。52参考色谱条件5，21色谱柱：ODS-C1846 mm250 mEl，5 pm。522流动相：参考梯度洗脱程序见表1。表1梯度洗脱条件流动相时间min乙腈 15乙酸O 40 60100 40 60110 100 018O 100 019O 40 60220 40 60523流速：10 mLmin。524激发波长：293 nm。5，25发射波长：332 nm。53测定在上述工作条件下，分别取标准使
7、用溶液lo pL进行高效液相色谱分析，以峰面积为纵坐标，以标准溶液中TBHQ浓度为横坐标，绘制标准曲线。取样品测试液10 pL进样，以面积外标法定量。TBHQ标准样品色谱图参见附录A。6结果计算食品中TBHQ的含量按式(1)计算：v CV1V3；又瓦X而式中：x被测食品中TBHQ含量，单位为克每千克(gkg)；c样品溶液中TBHQ浓度，单位为微克每毫升(-gmL)y-乙腈溶液最终定容的总体积，单位为毫升(mL)；砜溶解试样的正己烷总体积，单位为毫升(mL)Fm称取的样品质量，单位为克(g)；U从V。分取的正己烷体积，单位为毫升(mL)。注：样品若按照512或513进行处理，则无Vz、U项。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。Z附录A(资料性附录)TBnQ标准样品色谱图GBT 21927-2008J 、l囤A1 TBHQ标准样品色谱图(20 FgmL)。伽
