1、GB/T 4789.27-2003 188 前言本标准对GB/T4789. 27-1994(食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验进行修订。本标准与GB/T4789.27-1994相比主要修改如下z一一按照GB/T1. 1-2000对标准文本的格式和文字进行修改。一一修改并规范原标准中的设备和材料。本标准自实施之日起.GB/T4789. 27-1994同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位=中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准主要起草人z付萍、计融、姚景会、杨宝兰。本标准于1984年首次发布.1994年第一次修订，本次为第二次修订。GB/T 4789.27
2、-2003 食品卫生微生物学检验鲜事L中抗生素残留量检验1 范围本标准规定了鲜乳中抗生素残留量的检验方法。本标准适用于能杀灭嗜热乳酸链球菌的各种常用抗生素的检验。2 设备和材料2.1 冰箱，4C-20C，2.2 恒温培养箱，36C:i:1 c。2.3 恒温水浴锅，36C土1C、79C士1C。2.4 托盘扭力天平，0g100 g，精度至0.01g, 2.5 灭菌吸管，1mL(具0.01mL刻度、10mL(具0.1mL刻度)。2.6 灭菌试管，16mmX 160 mm, 2.7 100C温度计。2.8 蜡笔。3 菌种、培养基和试剂3.1 菌种2嗜热乳酸链球菌。3.2 脱脂乳:经113C灭菌20mi
3、n, 3.3 4% 2，3，5氯化三苯囚氮瞠nTC)水溶液:称取1gTTC，溶于5mL灭菌蒸偏水中，装褐色瓶内于7C冰箱保存，临用时用灭菌蒸馆水稀释至五倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色，则不能再用。4 检验程序鲜乳中抗生素残留检验程序见图1，图1189 GB/T 4789.27-2003 5 操作步骤5.1 菌液制备.将菌种移种脱脂乳，经36C土1C培养15h后，以灭菌脱脂乳1 1稀释待用。5.2 取检样9mL，置16mmX 160 mm试管内，80C水浴加热5rnin冷却37C以下，加菌液1mL , 36C土1C水浴培养2h，加TTCO. 3 mL，36C士lC水浴培养30min，观察如为阳性，
4、再于水浴中培养30 min作第二次观察，每份检样作两份，另外再作阴性和阳性对照各一份，阳性对照管用无抗生素的乳8 mL加抗生素及菌液和TTC.阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC.5.3 判断方法=准确培养30min观察结果，如为阳性，再继续培养30min作第二次观察。观察时要迅速，避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在，则检样中虽加菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制，因此指示剂TTC不还原，不显色。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。具体内容见表l和表2，190 显色状态未显色者微红色者桃红色-红色抗生素名称青霉素链霉素庆大霉素卡那霉素表1显色状态判断标准表2检测各种抗生素的灵敏度最低检出量0.004单位0.5单位0.4单位5单位
