1、 ICS 67.080.01 B 31 备案号： 浙江省地方标准DB33DB33/T 5432005水果、蔬菜中农药多残留测定方法 气相色谱离子阱质谱联用法 Determination of pesticides residues in fruit and vegetable Ion -Trap GC/MS/MS 2005-03-04 发布 2005-04-05 实施浙江省质量技术监督局发布DB33/T 5432005 I 前 言 本标准的附录 A、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E 均为资料性附录。 本标准由浙江省质量技术监督局提出并归口。 本标准起草单位：浙江方圆检测集团股份有限公司、
2、浙江工商大学。 本标准主要起草人：陈自力、励建荣、盛华栋、廖上富、陈小珍、何乔桑、鲁燕骅。 DB33/T 5432005 II 引 言 目前采用气相色谱质谱联用法检测水果、蔬菜中农药多残留方面尚无国家标准、行业标准。本方法涉及的十四种农残分别属有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯三类农药，传统方法需采用气相色谱分离,多个检测器分类进行检测，如：有机磷可采用火焰光度检测器（FPD）、氮磷检测器（NPD）检测，氨基甲酸酯可采用氮磷检测器（NPD）、高效液相色 谱仪（带荧光检测器和柱后衍生系统）检测、拟除虫菊酯可采用电子捕获检测器（ECD）检测。本方法采用气相色谱-质谱联用法，结合大体积进样，采用同一种前
3、处理方法，同一个检测器（MS），进行三类农药残留的同时测定。 DB33/T 5432005 1 水果、蔬菜中农药多残留测定方法 气相色谱离子阱质谱联用法 1 范围 本标准规定了水果、蔬菜中甲胺磷、克百威、乙酰甲胺磷、氧化乐果、久效磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷、毒死蜱、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯 14 种农药多残留气相色谱离子阱质谱的检测方法。 本标准适用于水果、蔬菜中上述14种农药残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达
4、成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 样品中有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类农药经乙腈提取，提取液经净化、浓缩后使用气相色谱离子阱质谱进行检测。 4 试剂和材料 4.1 除非另有规定，均使用分析纯试剂。 4.2 水：GB/T6682，三级。 4.3 乙腈。 4.4 丙酮：重蒸 4.5 氯化钠：140烘烤 4 小时。 4.6 有机相滤膜：0.2m。 4.7 农药标准品，详见附录 A。 4.8 农药标准溶液配制：单一农药标准溶液：准确称取一定量某农药标准品，用丙酮稀释，逐一配制14
5、 种农药 1000mg/L 的单一农药标准储备液(有效期 12 个月)，贮存在-18以下冰箱中。使用时根据各农药对应检测器上的响应值，吸取适量的标准储备液，分别注入同一容量瓶中，用丙酮稀释配制成所需的混合标准工作液。混合标准工作溶液的浓度参见附录 A。 5 仪器设备 5.1 气相色谱离子阱质谱：配有直接进样杆、程序升温大体积进样口、电子轰击源（EI）、离子阱二级质谱。 5.2 分析天平：感量 0.1mg 和 0.1g。 5.3 旋转蒸发器。 DB33/T 5432005 2 5.4 匀浆机。 5.5 鸡心瓶：50mL。 5.6 移液器：1mL。 5.7 样品瓶：2mL，带聚四氟乙烯旋盖。 5.
6、8 氮吹仪。 5.9 具塞量筒：100mL。 5.10 烧杯：100mL。 6 6 分析步骤 6.1 试样制备 取水果、蔬菜样品，取可食部分，用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物。将样品充分混匀后搅碎，制成待测样，放入分装容器中备用。 6.2 提取、净化 准确称取25.0g试料放入烧杯中，加入50m L乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后经滤纸过滤，滤液收集到装有5g7g氯化钠的100mL具塞量筒中， 盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温下静止10min，使乙腈相和水相分层。 6.3 净化 从100mL具塞量筒中吸取25mL乙腈溶液，放入鸡心 瓶中，在40水浴旋转蒸发至近干，再用氮吹仪吹干。用少量丙
7、酮分多次洗涤鸡心瓶，将溶液转移并定容到2mL容量瓶中。 如样品过于混浊，用0.2m有机滤膜过滤后再进行测定。 6.4 测定 6.4.1 色谱、质谱条件 6.4.1.1 色谱柱：VF-5MS（30m0.25mm0.25m）石英毛细管柱或性能相当的其他色谱柱。可接一根预柱。 6.4.1.2 色谱柱温度：55保持 1min，然后以 10/min 程序升温至 165，再以 20/min 升温到 260，保持 5min，再以 5/min 升温至 290，保持 3min； 6.4.1.3 载气：氦气，纯度99.999%，流速 1.2mL/min； 6.4.1.4 进样口升温程序和分流控制程序见表 1 和表
8、 2： 表1 进样口升温程序 温度 () 升温速率 (/min) 保持时间 （min） 总时间 （min） 53 / 0.70 0.70 280 200 1.00 2.84 表2 进样口分流程序 时间(min) 分流/不分流 分流比 初始 分流 20 0.01 分流 100 0.70 不分流 / 3.00 分流 100 7.00 分流 20 6.4.1.5 进样量：10L。 6.4.1.6 电子轰击源:70eV。 DB33/T 5432005 3 6.4.1.7 离子阱温度：180。 6.4.1.8 传输线温度：280。 6.4.1.9 选择离子监测：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化乐果、久效磷、甲拌
9、磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、对硫磷 10 种农残采用选择离子监测模式监测。每种化合物分别选择一个定量离子，1个2 个定性离子。所有需要检测化合物按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值，参见附录 B。选择离子监测的时间程序和监测离子组见附录 C。 6.4.1.10 二级质谱监测：克百威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯 4 种农药采用二级质谱检测。二级质谱母离子、二级质谱共振模式电压、二级质谱定量离子、定性离子见附录 D。 6.4.2 定性测定 样品提取液按照气相色谱 -质谱测定条件测定 14 种农药化合物。进行样品测定时，如果检
10、出的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除试剂背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子比与标准样品的离子比相一致，则可判断样品中存在这种农药化合物。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式来确证。 6.4.3 定量测定 本方法采用外标法单离子定量测定。标准溶液的浓度应与样品中待测化合物的浓度相近。本方法14 种农残混合标样选择离子监测 GC-MS（EI-SIS）和二级质谱监测 GC-MS/MS 总离子流图谱见附录 E。 6.4.4 平行试验 按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。 6.4.5 空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤进
11、行。 7 结果表述 7.1 样品中被测农药残留量以质量分数 计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）计算。 =mAVVAVs231 （1） 式中： 标准溶液中农药的含量，单位为毫克/升（mg/L） ； A样品中待测农药的峰面积； As农药标准溶液中待测农药的峰面积； V1提取溶剂总体积； V2吸取出用于检测的提取溶液的体积； V3样品定容体积； m样品的质量。 7.2 回收率 将 14 种农药混合标准溶液在 0.05mg/L5mg/L 水平范围添加到蔬菜和水果样品中进行添加回收试验，回收率在 65.2%102.5%之间。 7.3 7.3 检出限 方法的检出限见附录 A DB33/T
12、 5432005 4 附 录 A （资料性附录） 14 种农药标准品中文和英文名称、农药纯度、 方法检出限、混合标液图谱对应的农药浓度表 14 种农药标准品中文和英文名称、农药纯度、方法检出限、混合标液图谱对应的农药浓度见表A.1。 表 A.1 14 种农药标准品中文和英文名称、农药纯度、方法检出限、混合标液图谱对应的农药浓度 序号 中文名 英文名 纯度 检出限（ mg/kg） 混合标准溶液图谱对应的农药浓度（ mg/L） 1 甲胺磷 Methamidophos 90% 0.01 1.0 2 克百威 Carbofuran 90% 0.005 1.0 3 乙酰甲胺磷 Acephate 90% 0
13、.01 1.0 4 氧化乐果 Omethoate 90% 0.002 0.5 5 久效磷 Monocrotophos 90% 0.005 0.5 6 甲拌磷 Phorate 90% 0.005 0.5 7 乐果 Dimethoate 90% 0.01 0.5 8 甲基对硫磷 Methyl parathion 90% 0.002 0.5 9 马拉硫磷 Malathion 90% 0.005 0.5 10 对硫磷 parathion 90% 0.002 0.5 11 毒死蜱 Chlorpyrifos 90% 0.002 0.25 12 氯氰菊酯 Cypermethrin 90% 0.01 2.0
14、13 氰戊菊酯 Fenvalerate 90% 0.005 1.0 14 溴氰菊酯 Decamethrin 90% 0.01 1.0 DB33/T 5432005 5 附 录 B （资料性附录） GC-MS 测定的 14 种农药化合物的保留时间、定量离子、 定性离子及定量离子与定性离子的比值表 GC-MS 测定的 14 种农药化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值见表B.1。 表 B.1 GC-MS 测定的 14 种农药化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值 序号 中文名称 CAS.No 保留时间 /min 定量离子 定性离子 1 定性离子 2
15、1 甲胺磷 10265-92-6 9.50 94(100) 141(50) / 2 克百威 1563-66-2 10.53 149(100) 131(25) 122(20) 3 乙酰甲胺磷 30560-19-1 12.27 136(100) 94(59) 183(2) 4 氧化乐果 1113-02-6 13.87 79(100) 110(76) 156(65) 5 久效磷 919-44-8 14.53 127(100) 192(20) / 6 甲拌磷 298-02-2 14.66 75(100) 121(50) 260(8) 7 乐果 60-51-5 14.92 87(100) 125(80)
16、 143(15) 8 甲基对硫磷 298-00-0 15.97 263(100) 109(95) 125(65) 9 马拉硫磷 121-75-5 16.28 125(100) 173(35) 127(14) 10 毒死蜱 2921-88-2 16.39 314(100) 258(75) 197(65) 11 对硫磷 56-38-2 16.48 291(100) 109(95) / 12 氯氰菊酯 97955-44-7 24.31,24.52, 24.63,24.71 127(100) 163(90) 91(10) 13 氰戊菊酯 51630-58-1 26.13,26.56 225(100)
17、119(20) 147(50) 14 溴氰菊酯 62229-77-0 27.70 253(100) 172(36) 251(20) DB33/T 5432005 6 附 录 C （资料性附录） 甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化乐果、久效磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、对硫磷10 种农残的选择离子监测的时间程序和选择离子表 甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化乐果、久效磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、对硫磷10种农残的选择离子监测的时间程序和选择离子见表C.1。 表 C.1 甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化乐果、久效磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、对硫磷 10 种农残的选择离
18、子监测的时间程序和选择离子 时间片段序号 时间范围，min 选择离子/（m/z） 1 8.509.80 94，141 2 12.0012.60 94，136，183 3 13.6014.20 79，110，156 4 14.2014.70 75，121，127，192，260 5 14.8515.05 87，125，143 6 15.9316.15 109，125，263 7 16.1516.34 125，127，173 8 16.3416.60 109，258，291,197,314 DB33/T 5432005 7 附 录 D （资料性附录） 克百威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯 4 种农
19、药的二级质谱（MS/MS）母离子、二级质谱共振模式电压、二级质谱定量离子、定性离子表 克百威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯4种农药的二级质谱（MS/MS）母离子、二级质谱共振模式电压、二级质谱定量离子、定性离子见表D.1。 表 D.1 克百威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯 4 种农药的二级质谱（MS/MS）母离子、二级质谱共振模式电压、二级质谱定量离子、定性离子表 序号 时间程序 min 电压共振模式 Volts 母离子 定量离子 定性离子 1 10.2010.80 0.70 164 149 122，131 2 23.0025.50 0.30 163 127 163，91 3 25.9027.00 0.50 225 225 119,147 4 27.0030.00 0.30 253 253 172，251 DB33/T 5432005 8 附 录 E （资料性附录） 14 种农药标准混合溶液(浓度见附录 A)选择离子、二级质谱离子流图 1-甲胺磷 2-克百威 3-乙酰甲胺磷 4-氧化乐果 5-久效磷 6-甲拌磷 7-乐果 8-甲基对硫磷 9-马拉硫磷 10- 毒死蜱 11-对硫磷 12-氯氰菊酯 13-氰戊菊酯 14-溴氰菊酯 图E.1 14种农药标准混合溶液(浓度见附录A)选择离子、二级质谱离子流图
