1、ICS 65.150 B52 DB33 浙江省 地方标准 DB 33/T 8722012 杂交鳢“杭鳢 1 号”种质要求 Requirements for germplasm of hybrid snakehead “ Hangli No.1” Channa maculate( ) Channa argus( ) F1 2012 - 12 - 21 发布 2013 - 01 - 21 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 8722012 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由浙江省海洋与渔业局提出。 本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。 本标
2、准起草单位：杭州市农业科学研究院。 本标准主要起草人：谢楠、冯晓宇、郭水荣、刘凯、刘新轶、王宇希、姚桂桂。 DB33/T 8722012 1 杂交鳢 杭鳢 1 号 种质要求 1 范围 本标准规定了 杂交鳢“ 杭鳢 1号 ” 的 术语与定义、主要外部形态特征 、 生长、 遗传学特性、检测方法 及检验规则与结果判定 等内容 。 本标准适用于 杂交鳢“ 杭鳢 1号 ” 的种质 检 测与鉴定 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注 日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18654.1
3、养殖鱼类种质检验 第 1部分：检验规则 GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第 3部分：性状 测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第 4部分 ： 年龄和生长的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第 12部分：染色体组型 分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第 13部分：同工酶电泳分析 3 术语与定义 下列 术语和定义适用于本标准。 3.1 杂交鳢 “杭鳢 1 号 ” Hybrid Snakehead “ Hangli No.1” 【 Channa maculata（ ） Channa argus（ ） F1】 以珠江水系斑鳢为母本、钱塘江水
4、系乌鳢为父本，通过杂交获得的杂交种 F1。 4 主要 外部形态特征 4.1 体形与体色 鱼体呈纺锤形，头部尖 而扁平， 躯干前部浑圆后部侧扁，尾鳍呈圆形 。口端位，下颌稍突出。 背部青绿色，体侧灰黑色，腹部白色或灰白色 。 头侧 具 2条纵行黑色条纹，向后延伸 在躯干部 呈 两列块状 斑纹 。 头部上方具 “ ” 形斑纹， 尾鳍基部具 2至 3条弧形斑纹。杂交鳢“杭鳢 1号”外形见图 1。 杂交鳢“杭鳢 1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异 见附录 A。 DB33/T 8722012 2 侧面观 头部背面观 图 1 杂交鳢“杭鳢 1 号”外 形 图 4.2 可数性状 背鳍鳍式为 D.0-42
5、48，臀鳍鳍式为 A. 0-27 32，侧线鳞数 51 64， 第一鳃弓外侧鳃耙数 8 12。 4.3 可量性状 杂交鳢“杭鳢 1号” 外部形态主要可量性状见 表 1。 表 1 杂交鳢“ 杭鳢 1 号” 外部形态主要可量性状 全长 /体长 吻长 /体长 头长 /体长 眼径 /体长 眼间距 /体长 杂交鳢“ 杭鳢 1 号 ” (n=60) 1.1390.055 0.0360.009 0.2530.009 0.0270.013 0.0600.015 5 生长 5.1 生活习性 杂交鳢“杭鳢 1号”可摄食人工配合饲料、鲜活鱼虾及冰鲜鱼。水温 14 以下停止摄食，江浙地区自然条件下可安全越冬， 最适生
6、长水 温 25 30 。 5.2 体重与体长关系 杂交鳢 “ 杭鳢 1号 ” 体重与体长和关系式为 y = 0.1965x2.295（体长 30 cm 35 cm）。 式中 x代表体长（单位： cm）； y代表体重（单位： g）。 6 遗传 学 特性 6.1 细胞遗传 学 特性 染色体数 ： 2n=45 染色体组型见图 2。 DB33/T 8722012 3 图 2 杂交鳢 “杭鳢 1 号 ”染色体组 型 6.2 生化遗传 学 特性 杂交鳢 “杭鳢 1号 ”肾脏组织乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱及电泳扫描图 见 图 3。 图 3 杂交鳢 “杭鳢 1 号 ”乳酸脱氢酶电泳图谱及扫描图 6.3 分子遗传
7、 学 特性 以 微卫星引物 CHA19对 杂交鳢 “杭鳢 1号 ” 及斑鳢、乌鳢 DNA进行 PCR扩增 、 电泳 ，电泳图见图 4。 如图所示， 能 同时扩增出 160bp条带 和 168bp条带 的 可确定 为杂交鳢 “杭鳢 1号” ， 只扩增出 160bp条带 的 可确定 为 斑鳢 ， 只扩增出 168bp条带 的 可确定 为 乌鳢 。 说明 : M:标准分子量； 1-7: 乌鳢； 8-14: 斑鳢； 15-28: 杂交鳢“杭鳢 1号”。 图 4 引物 CHA19PCR 电泳图谱 7 检测方法 DB33/T 8722012 4 7.1 主要外部形态特征检测 按 GB/T 18654.3规
8、定的 方法进行。 7.2 细胞遗传学特性检测 按 GB/T 18654.12方法进行。 7.3 生化遗传学特性检测 按 GB/T 18654.13规定的 方法进行。 7.4 分子遗传学特性检测 7.4.1 DNA 提取 取肌肉组织，尽量剪碎，用 DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组 DNA， TE溶解后 -20 保存备用 。 7.4.2 PCR 扩增 CHA19引物序列为 F： CTTGAGAACTGGCGACGTTT， R： TACGAAGAAATCCCCGTCTG。 10 L PCR扩增反应体积内含： 1XPCR Buffer， 1.5 mmol L MgCl2， 200 mol L d
9、NTP， 200 mol L上下游引物， 0.1U Taq酶， 100ng模板 DNA，灭菌去离子水补齐。 PCR反应程序为： 95 预变性 3 min； 94 变性 30s， 53 退火 30s， 72 延伸 1min， 23个循环；最后72 延伸 10min。 7.4.3 电泳 PCR产物经 8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，用 Puc18DNA /MspI作为标准分子量，快速银染法染色，拍照后观察分析。 8 检验规则与结果判定 按 GB/T 18654.1的规定执行。 DB33/T 8722012 5 A A 附 录 A （资料性附录） 杂交鳢“杭鳢 1 号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差
10、异 A.1 概述 本资料性附录给出了 杂交鳢“杭鳢 1号”与亲本斑鳢、乌鳢的 体形与体色差异。 A.2 杂交鳢“杭鳢 1 号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异 杂交鳢“杭鳢 1号”与亲本斑鳢、乌鳢的外形相似，主要差异表现在头长比例与体表斑纹， 见图 A.1和 表 A.1。 侧面观 头部背面观 图 A.1 杂交鳢“杭鳢 1 号 ”及斑鳢、乌鳢外形图 杂交鳢“杭鳢 1 号” 斑鳢 乌鳢 DB33/T 8722012 6 表 A.1 杂交鳢“杭鳢 1 号”与斑鳢、乌鳢外形差异 差异部位 杂交鳢“杭鳢 1号” 斑鳢 乌鳢 头长比例 较乌鳢小 与杂交鳢“杭鳢 1号”接近 较杂交鳢“杭鳢 1号”及斑鳢大 头部上方斑纹 具 “ ” 形斑纹 具 “ ” 形斑纹 具“ ”形斑纹 体侧斑纹 体侧具两列排列整齐的块状斑纹 体侧具两列斑纹，上侧列斑纹呈连续状或少数几处断开，下侧斑纹呈块状整齐排列 体侧斑纹排列不规则，呈块状斑纹 尾鳍基部斑纹 具 2至 3条弧形斑纹 具 2至 3条弧形斑纹 无弧形斑纹 _
