1、GB 18281.3-2000 前会口本标准的全部技术内容为强制性。本标准等问采用国际标准13011138-3 ,) 995(医疗保健产品灭菌-一生物指示物-一第3部分湿热灭菌用生物指示物。本标准的附录A和附录B都是标准的附录。本标准由国家药品监督管理局提出。本标准由全国消毒技术与设备标准化技术委员会归口。本标准起草单位2山东新华医疗器械股份有限公司、国家药品监督管理局广州医疗器械质量监督检验中心。本标准主要起草人z杨兆旭、梁!It、莫富诚。62.t GB 18281.3-2000 ISO前言ISO(国际标准化组织)是由各国标准化团体(!SO成员团体)组成的世界性的联合会。制定国际标准的工作通
2、常由ISO的技术委员会完成。各成员团体若对某技术委员会确立的标准项目感兴趣，均有权参加该委员会的工作。与ISO保持联系的各国际组织(官方的或非官方的)也可参加有关工作。在电工技术标准化各方面，ISO与国际电工委员会(!EC)保持密切合作关系。由技术委员会正式通过的国际标准草案提交各成员团体表决，国际标准需取得至少75%参加表决的成员团体的同意才能正式发布。国际标准ISO11138-3由ISO/TC198医疗保健产品灭菌(Sterilization01 health care products)技术委员会制定。ISO 11138包括了在医疗保健产品灭菌生物指示物总标题下的下列各个部分z第1部分:
3、通则一一第2部分z环氧乙烧灭商用生物指示物一一第3部分a湿热灭菌用生物指示物附录A和附录B为ISO11138本部分的有机组成部分。623 GB 18281. 3-2000 引言本标准规定生产预定用于混热灭菌周期检测的生物指示物在生产、标签和性能方面的总要求。应由训练有素合适的人员实施规定的各项步骤和方法。生物指示物并不准备供生产厂未在标签上规定的任何工艺所使用，生物指示物使用不当会产生出误导的结果。生物指示物总是应当与物理的和(或)化学的检测配合在一起使用，以证明灭菌工艺的功效。不管生物指示物获得的结果如何，若灭菌工艺的某一物理/化学变量超过了规定范围，灭菌周期均应视作未达预期目标。生物指示物
4、的性能会受到使用前的贮存环境、使用方法或暴露于灭菌工艺后所用技术的影响，因此，应遵照生产厂的建议进行贮存和使用。而且，应当在暴露于灭菌工艺之后，尽快地把生物指示物转至规定的复苏条件下。生物指示物若超过了生产厂规定的有效期，应不得使用。生物指示物用于检验灭菌工艺和灭菌设备的效果，这类分析研究应由训练宿素合适的人员进行。626 1 范围中华人民共和国国家标准医疗保健产品灭菌生物指示物第3部分:湿热灭菌用生物指示物Sterilization of health care products-Biological indicators一Part 3, Biological indicators for
5、moist heat sterilization GB 18281. 3-2000 idt ISO 11138-3,1995 本标准规定拟在评价灭菌器性能时采用的试验徽生物和生物指示物的专用要求，该灭菌器使用灭菌温度超过100C的湿热作灭菌因子。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB 18278 2000 医疗保健产品灭商确认和常规控制要求工业湿热灭菌。dtISO 11134 1994) GB 18281. 1-2000医疗保健产品灭菌生物指示物第1部
6、分:通则(idtISO 11138-1 ,1 994) 3定义本标准采用GB18281. 1-ISO 11138-1的定义和以下定义。3.1 z值z-value使D值变化1个数量级所需温度的度数。4 通则除本标准的下述各条款为修改内容外，GB18281. l-ISO 11138-1标准的要求适用。5 试验微生物试验微生物必须为嗜热脂肪杆菌芽胞(sporesof bacillus stearothermophilus)或其他菌株和被证明具有本标准所要求的同等性能的微生物。注l据证实，噜热脂肪杆菌(Bacillusstearothermophilus) NCTC 10003 , DSM 497，嗜
7、热脂肪杆菌(8.时earothermophilus )ATCC 12980. DSM 22以及嗜热脂肪杆菌(B.stearoth盯mophilus)C1P52. 81.DSM 5934. ATCC 7953 , NCTC 10007是告适的富株.6 微生物悬液重复测定同批悬浮液所含存活试验微生物的数目，必须在额定总数范围土35%之内。国质量技术监督局2000-12-13批准2001 - 05 -01实施627 GB 18281- 3-2000 7 载体和内层包装有关载体和内层包装的专用要求，见GB18281. 1-150 11138-1.4.4。证明合适性所必须采用的试验条件如下z-温度不低于
8、生产厂规定的最大暴露温度+5C.若未作规定，温度必须采用145C. 暴露时间:不少于生产厂规定的最大暴露时间。若未作规定，暴露时间必须采用30mino 注2只要载体仍旧处于蒸汽灭菌工艺的实效范围之内，这些被选条件就代表了对载体的实际检验。8 生物指示物8. 1 在生产过程中，必须控制每个生物指示物上可复苏的试验微生物数的数目，使之限定在生产厂规定的额定总数范围士50%之内，或在生产厂规定总数的最小值和最大值范围之内。8. 2 应用超声波、与玻璃球起震荡的物理方法或其他经认巧的合适方法，从载体上分离出试验微生物.并必须在生产厂规定的条件下对所获得的试验微生物的悬浮液进行培养，通过活微生物计数，进
9、行微生物数的追溯性测定。假若所获得的微生物数是在额定值的一50%和+300%范围之内，应判为合格。8. 3 预定在日常监测中使用的接种载体和生物指示物，试验微生物额定总数必须不少于1X 10.并必须规定增值不大于0.IXI0.自身配套的生物指示物系统若符合9.3条要求.供日常监测使用时，试验微生物额定总数可少于1 X 105。注3其他方面如合格鉴定、确认或其他特定试验使用的接种载体和(或)生物指示物，可要求规定另一额定总数，对于某些日常监测应用，可要求额定总数lX10o9 抗力9. 1 生产厂必须标明每批生物指示物或接种载体的D值，其精确度为土0.5min. 9.2 必须按照附录A的规定，测定
10、每批生物指示物的抗力特性。9.3 可通过存活曲线法和(或)采用最大可能数(MPN)步骤的部分阴性分析法分别见GB18231. 1 15011138一l标准第5章和附录B、附录C、附录D)获得生物指示物上试验微生物总数的D值，若是暴露于湿热121C士1C.必须不少于1.5 min.总数对数倍数的D值必须不少于10mm。9.4 接种载体上的试验微生物的D值，必须在1l0C130C范围内的两种温度下采用给出的两种方法之进行测定。这些数据应用于计算z值，2值必须不低于6C，而且必须规定增值不大于O.1 .C z值应根据附录B进行计算。10 试验方法本标准给出的试验方法为基准方法。若采用其他可供选择的方
11、法，则必须作出规定.并经确认和证实与本基准方法一致。G28 GB 18281.3-2000 附景A(标准的附录)测定对湿热灭菌的抗力的方法Al 蒸汽生物指示物抗力测定器A1. 1 该测定器必须在给定范围内能维持下列条件，暴露时间范围5s180 min，精确度土1s , -一一温度，010C145 C)士O.5C ; 压力，(40kPa413 kPal :f: 2. 5 kPa; 真空(4kPa100 kPa)士O.5 kPa，或。用于检验生物指示物的设备时，不低于10kPa 0该类指示物预定只供包括机械排气阶段在内的周期使用。A 1. 2 该测定器必须配备有抽真空装置，让反应室的真空度在5mn
12、内低于5kPa，以便在通人蒸汽之前充分排除室内空气。抽真空之后，必须不再采用蒸汽冲洗和(或)反复交替通入蒸汽的方法实现排气。A 1. 3 周期结束时通人的空气必须经过一个过滤器进行滤过，该过滤器应能清除O.5m微粒不少于99.9%。A 1.4 反应室和门必须配备有装置，使室的内部表面温度保持需要的工作温度。A 1.5 必须由反应室之外向反应室供应湿热，蒸汽源应符合GB18281一ISO11134标准要求。A 1.6 该测定器必须能够自动操作，并应配有一个不受控制功能制约、能记录室内温度和压力的装置。因此，记录装置的误差范围不得超过每个控制变量的容差的50%。例如，要求控制室温在士1C以内，则温
13、度记录器的最大容差极限就是0.5C。A 1.7 测定器室内的升温时间必须不超过10s 0 A 1.8 暴露阶段结束时，在不超过10s时间内测定器室内的温度必须降至10WC或100C以下，而且室内压力在不到55内必须回复至外界气压。A2 测定器的操作A2.1 把载体、接种载体或生物指示物置于合适的载样器材上。A2.2 让测定器室预热到所需温度。A2.3 把载样器材放入室内，关闭反应室，维持规定的段时间，让温度稳定。A2.4 按下列顺序自动控制操作=a)反应室抽真空，5min内达4.5kPa土0.5kPa(或达到加压排气周期采用的10kPa); b)往室内通入蒸汽，达到规定的温度和压力p注4罪露时间为omin时，应无蒸汽通人。c)在规定的暴露时间内维持该条件g们在暴露阶段结束时反应室拍真空达到10kPa士3.5kPa，接着通人经滤过的空气或某种惰性气体例如氮气).在5s内达到外界气压。A2.5 该周期结束时，从反应室取出载样器材和样品。A3 抗力的测定按照GB18281. 1 ISO 11138-1第5章(及相关附录)规定的方法测定抗力。629 GB 18281. 32000 附最B(标准的附录)z值计算依据9.3条规定的方法和数据，按下述公式计算以摄氏度表示的z值=(T2 - T ,) z= (lgD，一19D2)其中的D，和D2分别为在温度T，和T2下获得的D值。630
