1、ICS 65.020.30 B 45 中华人民11: ./、gB 和国国家标准GB/T 20362-2006 鸡蛋中氯是毗昵残留量的检测方法高效液相色谱法Method for the determination of clopidol residues in eggs High performance liquid chromatographic 2006-06-05发布中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局中国国家标准化管理委员A2006-09-01实施GB/T 20362-2006 目。昌本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准起草单位:江苏省兽药监察所、上海兽
2、药监察所。本标准主要起草人:贡玉清、邵德佳、耿士伟、黄土新、曹莹。1 1 范围鸡蛋中氯瓷毗昵残留量的检测方法高效液相色谱法GB/ T 20362-2006 本标准规定了鸡蛋中氯是毗院残留量检验的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于鸡蛋中氯是毗晓残留量的2 规范性引用文件的修改单(不包括勘误的是否可使用这些文件的GB/ T 6682分3 制样4 测定方法4. 2 试剂和材料以下所用的试剂，.币4.2. 1 氯是毗院标准口地14.2.2 甲醇:色谱纯。4.2.3 乙睛:色谱纯。4. 2.4 磷酸二氢饵。4. 2.5 磷酸氢二铀。./ 4. 2. 6 碱性氧化铝:200目300目，层的引用文件，
3、其随后所有4. 2.7 碱性氧化铝SPE柱:取适量氧化铝粉末置高温炉中，3000C4000C烘烤3h，冷却后准确称取100.0 g，加水5.0mL，搅拌使均匀，振摇3h，加适量甲醇，充入下装G1砂芯板的300mm X 18 mm玻璃柱中，填充至12cm高度，用两倍柱体积甲醇淋洗后，备用。4. 2. 8 磷酸盐缓冲液(pH7.0):准确称取磷酸氢二铀(Na2HP04)2.09 g，磷酸二氢饵(KH2P04) 1. 40 g，加水洛解并稀释至500mL，调节pH值至7.0。4. 2. 9 氯是口比睫标准液:准确称取氯是毗院约25mg，置250mL容量瓶中，加甲醇榕解，并稀释至刻度，使成浓度为100
4、g/mL的氯起毗院标准储备液，置40C冰箱中保存。临用前，准确量取适量标准储备液，用甲醇稀释成浓度为适宜浓度的标准工作液。G/T 20362-2006 4. 3 仪器和设备4.3. 1 高效液相色谱仪(配紫外检测器)。4.3.2 旋涡泪合器。4.3.3 离心机。4.3.4 分析天平:感量0.0001 go 4.3.5 天平:感量0.01g。4.3.6 旋转蒸发仪。4.3.7 组织匀浆机。4.4 测定步骤4.4. 1 试料的制备试料的制备包括:一一取搅匀后的供试样品，作为供试试料。取搅匀后的空白样品，作为空白试料。取搅匀后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试料。4.4.2 提取准确
5、称取5g士0.05g试料，置于50mL匀浆杯中，用25mL乙睛分两次各匀浆5min ,3 000 r/min 3 500 r/min离心5min，分离并合并上清液备用。4.4.3 净化将碱性氧化铝柱分别用10mL甲醇和乙睛依次润洗，加入提取的上清液，过柱，弃去流出液，用20 mL甲醇进行洗脱.收集洗脱液于鸡心瓶中，于600C旋转蒸发至近干，浓缩液用1.00 mL甲醇榕解，用0.45m微孔有机滤膜过滤，收集滤液作为试样溶液，供高效液相色谱测定。4.4.4 测定4.4.4.1 色谱条件与系统适用性试验a) 色谱柱:反相C18柱:250mmX4. 6 mm，粒径5m，或相当者;b) 流动相:磷酸盐缓
6、冲液(pH7.0):乙睛(90: 10); c) 流速:1. 0 mL/min; d) 检测波长:270nm; e) 进样量20L;f) 理论板数按氯搓口比院峰计算，应不低于1500。4.4.4.2 色谱测定法取适量试样溶液和相应浓度的标准工作液，作单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。标准工作液及试样液中氯在毗睫的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准品液相色谱图见附录A中图A.1。4.4.4.3 空白试验除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。4.5 结果计算和表述2 组织中氯起毗睫的残留量按式。)计算:x = X C, X 1 00。一A, X c X 1 000 式中tX一
7、供试组织中氯是口比睫的残留量，单位为毫克每千克(mg/kg); A-供试试料试样溶液中氯在毗院色谱峰的峰面积;A，一标准工作液中氯是毗脏的峰面积;. ( 1 ) Cs 标准工作液中氯起毗睫的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); c一一最终试样洛液的浓度，单位为克每毫升(g/mL)。注:计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后2位。5 检测方法灵敏度、准确度、精密度5. 1 灵敏度本方法在鸡蛋中的定量限为20g/峙。5.2 准确度G/T 20362-2006 本方法在20g/kg、1.25 mg/kg、2.5mg/kg、5.0mg/kg添加水平上的回收率范围都注8
8、0%。5.3 精密度本方法的批内变异系数cv10%，批间变异系数cv10%。3 G/T 20362-2006 mV 26.5 mV 5.3 2.4 0.6 0. 0 1. 0 4 2.0 3.0 附录A(资料性附录)色谱圈4.0 5.0 6.0 7.0 图A.3鸡蛋中氯挂毗院最低定量限色谱固8.0 9. O. 10.0 t/ min GB/T 20362-2006 mV 18.1 11. 5 4.8 0.0 1. 0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 1QO t/min 圈A.4鸡蛋中氯挂毗睫回收率(1. 25 mg/kg)色谱图5 CON-NSONH阁。华人民共和国家标准鸡蛋中氯是毗睫残留量的检测方法高效液相色谱法GB/T 20362-2006 国中长中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张O.75 字数9千字2006年9月第一次印刷1/16 2006年9月第一版开本880X 1230 拎定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066. 1-28120 GB/T 20362-2006
